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1、中药化学实用技术中药化学实用技术吸附柱色谱法操作步骤吸附柱色谱法操作步骤(CC)教学目标:教学目标:1 1、学会吸附柱色谱的操作方法及要点。、学会吸附柱色谱的操作方法及要点。2 2、知道吸附柱色谱的原理。、知道吸附柱色谱的原理。3 3、了解柱色谱的英文(、了解柱色谱的英文(CCCC)缩写。)缩写。教学重点:教学重点:吸附柱色谱法的操作及要点,收集液的鉴别方法。吸附柱色谱法的操作及要点,收集液的鉴别方法。教学难点:教学难点:系统溶剂的选择。系统溶剂的选择。复习旧课色谱法按操作形式可以分为哪几类?薄层色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、纸色谱法、柱色谱法柱色谱法导入新课Rd,17500元元 /g 约约3
2、00元元 /g 龙舟比赛龙舟比赛?先后先后?分离分离龙舟龙舟水水阻力阻力人人推力推力化学成分化学成分固定相固定相吸附力吸附力流动相流动相解吸附力解吸附力吸附柱色谱法吸附柱色谱法(CC)一、原理固定相固定相流动相流动相化学成分化学成分吸附力吸附力 解析附力解析附力 :三要素三要素三要素三要素装柱装柱上样上样二、操作过程洗脱洗脱收集收集1、装柱、装柱 选柱选柱适量适量硅胶硅胶装柱装柱直径直径0.5-10cm,长度,长度为直径的为直径的10-40倍倍 样品:硅胶样品:硅胶1:20-1:501:20-1:50均匀、检查均匀、检查干法干法分组操作分组操作 1、装柱、装柱选柱选柱硅胶硅胶+初始初始洗脱剂洗
3、脱剂装柱装柱直径直径0.5-10cm,长度为直,长度为直径的径的10-40倍倍 混悬液混悬液湿法湿法装均匀装均匀 比较比较 2、上样、上样硅胶硅胶样品液样品液混匀、混匀、阴干阴干上样上样溶剂易溶溶剂易溶样品:硅胶样品:硅胶1:1-1:2干法装柱方干法装柱方式,均匀式,均匀干法干法样品样品溶剂溶剂溶解溶解上样上样溶剂易溶溶剂易溶滴加滴加湿法湿法2、上样、上样比较比较 3、洗脱、洗脱洗脱溶剂洗脱溶剂选择选择 洗脱洗脱TLC筛选,筛选,Rf为为 0.2-0.3为标准为标准洗脱速度,洗脱速度,1-5滴滴/秒秒 第一组第一组 10 10:1 1、9 9:1 1 第二组第二组 8 8:1 1、7 7:1 1 第三组第三组 6 6:1 1、5 5:1 1 第四组第四组 4 4:1 1、3 3:1 1 4、收集、收集 色谱段收集色谱段收集有色化合物有色化合物 等份收集等份收集大多数化合物大多数化合物 目的:合并收集液目的:合并收集液方式:薄层色谱鉴别方式:薄层色谱鉴别三、鉴别显色一致显色一致化学化学成分成分操作操作过程过程原理原理鉴别鉴别围绕一个围绕一个围绕一个围绕一个点点柱色谱柱色谱操作操作课后小结课后小结课后习题1、干法与湿法装柱有何操作要点。2、柱色谱的洗脱溶剂应如何选择。课后预习分配柱色谱法分配柱色谱法操作、分离操作、分离