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1、实验二实验二 环境中微生物的检测环境中微生物的检测一、目的要求一、目的要求1、了解环境中微生物的存在。、了解环境中微生物的存在。2、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。3、观察不同类型微生物的菌落形态特征。、观察不同类型微生物的菌落形态特征。4、体体会会无无菌菌操操作作的的重重要要性性，初初步步建建立立微微生生物物工工作作者者必必须须具有的具有的“无菌无菌”概念。概念。二、基本原理二、基本原理微微生生个个体体微微小小，种种类类繁繁多多且且无无处处不不在在，但但肉肉眼眼不不可可见见。若若用用营营养琼脂平板法进行检测，可以看到其群体结构。养
2、琼脂平板法进行检测，可以看到其群体结构。平平板板培培养养基基含含有有细细菌菌生生长长所所需需要要的的营营养养成成分分，当当取取自自不不同同来来源源的的样样品品接接种种于于培培养养基基上上，在在适适宜宜温温度度下下培培养养，12 d内内每每一一菌菌体体即即能能通通过过很很多多次次细细胞胞分分裂裂而而进进行行繁繁殖殖，形形成成一一个个可可见见的的细细胞胞群体的集落，称为菌落。群体的集落，称为菌落。每每一一种种细细菌菌所所形形成成的的菌菌落落都都有有它它自自己己的的特特点点，例例如如菌菌落落的的大大小小、表表面面干干燥燥或或湿湿润润、隆隆起起或或扁扁平平、粗粗糙糙或或光光滑滑，边边缘缘整整齐齐或或不
3、不整整齐齐，菌菌落落透透明明、半半透透明明或或不不透透明明，颜颜色色以以及及质质地地疏疏松松或或紧紧密密等等。因此，可通过平板培养来检测环境中细菌的数量和类型。因此，可通过平板培养来检测环境中细菌的数量和类型。三、实验器材三、实验器材1、牛肉膏蛋白胨琼脂平板牛肉膏蛋白胨琼脂平板2、仪器或其他用具、仪器或其他用具、记号笔等记号笔等四、实验步骤四、实验步骤 1、编号、编号任任何何一一个个实实验验，在在动动手手操操作作前前均均需需首首先先将将器器皿皿用用记记号号笔笔做做上上记记号号，写写上上班班级级、姓姓名名、日日期期，本本次次实实验验还还要要注注明明处处理理号号，写写在在皿皿底底的的一一边边，不不
4、要要写写在在当当中中，以免影响观察结果。以免影响观察结果。培培养养皿皿的的记记号号一一般般写写在在皿皿底底上上，如如果果写写在在皿皿盖盖上上，同同时时观观察察两两个个以以上上培培养养皿皿的的结结果果，打打开开皿皿盖盖时时，容容易混淆。易混淆。2、环境中微生物的检测、环境中微生物的检测（1）空空气气 将将一一个个牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨平平板板放放在在桌桌面面上上，移移去去皿皿盖，使其暴露在空气中盖，使其暴露在空气中5-10min后盖上皿盖。后盖上皿盖。（2）手手指指 移移去去皿皿盖盖，用用手手指指在在琼琼脂脂平平板板的的表表面面轻轻轻轻地地来来回划线，盖上皿盖。回划线，盖上皿盖。（3）头头发发
5、 取取头头发发一一根根，在在平平板板表表面面任任一一方方向向划划线线35条条，盖上皿盖。盖上皿盖。（4）咳咳嗽嗽 将将揭揭开开皿皿盖盖的的琼琼脂脂平平板板放放在在离离口口约约68cm处处，对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。3、将所有的琼脂平板翻转、将所有的琼脂平板翻转使皿底朝上，放使皿底朝上，放28培养箱，培养培养箱，培养23 d。（1）菌菌落落计计数数 在在划划线线的的平平板板上上，如如果果菌菌落落很很多多而而重重叠叠，则则数数平平板板最最后后1/4面面积积内内的的菌菌落落数数。不不是是划划线线的平板，也一分为四，数的平板，也一分为四，数1/4面积的菌落
6、数。面积的菌落数。（2）根根据据菌菌落落大大小小、形形态态、高高度度、干干湿湿等等特特征征观观察察不不同同的的菌菌落落特特征征。但但要要注注意意，如如果果细细菌菌数数量量太太多多，会会使使很很多多菌菌落落生生长长在在一一起起，或或者者限限制制了了菌菌落落生生长长而而变变得得很很小小，因因而而外外观观不不典典型型，故故观观察察菌菌落落的的特特点点时时，要选择分离的很开的单个菌落。要选择分离的很开的单个菌落。五、实验报告五、实验报告将你自己的平板结果记录于下表中将你自己的平板结果记录于下表中。皿号皿号菌落数菌落数(近似近似值值)特特 征征 描描 写写形状形状大小大小色泽色泽光泽光泽高度高度透明透明
7、度度表面表面 边缘边缘1234CK菌落特征描写方法如下：菌落特征描写方法如下：形状：圆状、丝状、不规则状、假根状形状：圆状、丝状、不规则状、假根状。大小：以直径表示。大小：以直径表示。表面：光滑、干燥、湿润、皱褶。表面：光滑、干燥、湿润、皱褶。光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。高度：扁平、隆起、凹下。高度：扁平、隆起、凹下。透明程度：透明、半通明、不透明。透明程度：透明、半通明、不透明。边缘：整齐、不整齐。边缘：整齐、不整齐。1.比比较较各各种种来来源源的的样样品品，哪哪一一种种样样品品的的平平板板菌菌落落数与菌落类型最多？数与菌落类型最多？2.通通过过本本次次实实验验，在在防防止止培培养养物物的的污污染染和和防防止止细细菌的扩散方面，你学到些什么？有什么体会？菌的扩散方面，你学到些什么？有什么体会？