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1、一凝固一凝固(nngg)法法定量加取试剂、提供定量加取试剂、提供370.5的反应温度的反应温度血浆血浆血浆凝固(反应终止)血浆凝固(反应终止)试剂试剂反反应应槽槽用于测定用于测定(cdng)血浆凝固血浆凝固时间时间第一页,共三十二页。散射比浊:散射比浊:散射光强度散射光强度透射比浊:透射比浊:吸光度大小吸光度大小1.比浊法比浊法均增大均增大2.电流电流(dinli)(dinli)法法(钩法钩法)连通连通断开断开连通连通第二页,共三十二页。3.3.磁珠法磁珠法(粘度粘度(zhn d)(zhn d)法法)电钩法与磁珠法的优点电钩法与磁珠法的优点(yudin)?第三页,共三十二页。二生物化学二生物化
2、学(shn w hu xu)(shn w hu xu)法:法:(过量)(过量)产色物质产色物质-底物底物+酶酶产色物质产色物质(显色)(显色)水解水解1.酶活化酶活化(huhu)凝血因子的检测:凝血因子的检测:用于测定凝血因子酶原用于测定凝血因子酶原(mi yun)、活化凝、活化凝血因子酶及酶抑制物血因子酶及酶抑制物AT、抗纤溶酶的活性。、抗纤溶酶的活性。产色物质:产色物质:产色物质:产色物质:对硝基苯胺对硝基苯胺对硝基苯胺对硝基苯胺(PNA)(PNA)(PNA)(PNA),游离,游离,游离,游离PNAPNAPNAPNA呈黄色,测定波长呈黄色,测定波长呈黄色,测定波长呈黄色,测定波长405nm
3、405nm405nm405nm。第四页,共三十二页。2.酶原酶原(miyun)凝血因子的检测:凝血因子的检测:3.酶抑制酶抑制(yzh)物的检测:物的检测:(过量)(过量)激活剂激活剂+酶原酶原(过量)(过量)产色物质产色物质-底物底物+酶酶产色物质产色物质(显色)(显色)水解水解酶抑制物酶抑制物+(过量、定量)(过量、定量)酶酶(过量)(过量)产色物质产色物质-底物底物+(剩余)(剩余)酶酶产色物质产色物质(显色)(显色)水解水解第五页,共三十二页。三免疫学方法三免疫学方法(fngf)(fngf)1 1透射比浊法透射比浊法2 2散射散射(snsh)(snsh)比浊法比浊法3 3胶乳比浊法胶乳
4、比浊法抗原抗原+抗体抗体 抗原抗体复合物抗原抗体复合物 浊度增加浊度增加散射光、吸光度增加散射光、吸光度增加胶乳颗粒胶乳颗粒用于检测用于检测(jin c)凝血因子、酶抑制物的含量。凝血因子、酶抑制物的含量。第六页,共三十二页。凝血功能检测凝血功能检测(jin c)试验的检测试验的检测(jin c)前质量控前质量控制:制:停用有影响的药物一周以上停用有影响的药物一周以上(抗凝治疗监测者除外抗凝治疗监测者除外)抗凝剂:抗凝剂:109mmol/L109mmol/L的枸橼酸钠;抗凝比:的枸橼酸钠;抗凝比:1 19 9止血带使用时间要短,采血应顺利,无凝血、溶血止血带使用时间要短,采血应顺利,无凝血、溶
5、血容器:真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器容器:真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器标本储存:标本储存:4 41010,2h2h;(常温常温(chngwn)(chngwn)、不超过、不超过2h)2h)凝血功能检测试验凝血功能检测试验(shyn)的检测前质量控制:的检测前质量控制:第七页,共三十二页。凝血弹性(tnxng)图仪第四章第八页,共三十二页。凝血弹性凝血弹性(tnxng)图图Thrombelastography,TEG一、一、TEG凝血弹性凝血弹性(tnxng)描记仪描记仪ThrombelastographCoagulationAnalyzer,TEG一种能够动态监测整个凝血过程
6、一种能够动态监测整个凝血过程的分析仪。主要用于对凝血和纤的分析仪。主要用于对凝血和纤溶全过程及血小板功能进行全面溶全过程及血小板功能进行全面检测检测(jin c)(jin c)特别是术中能特别是术中能简化凝血功能障碍的诊断,并简化凝血功能障碍的诊断,并指导成份输血。指导成份输血。第九页,共三十二页。19481948年由德国人年由德国人HarterHarter创造创造19801980年代,开始广泛用于临床指导术中输血取得了年代,开始广泛用于临床指导术中输血取得了良好效果,现已成为当今围术期监测凝血功能良好效果,现已成为当今围术期监测凝血功能(gngnng)(gngnng)的最重要指标。的最重要指
7、标。1995-19961995-1996年,开始在心脏外科使用。目前以年,开始在心脏外科使用。目前以TEGTEG为为主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已经在主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已经在世界上世界上4040多个国家使用。多个国家使用。二、凝血弹性二、凝血弹性(tnxng)(tnxng)图仪的历史:图仪的历史:20042004年,抗血小板药物疗效年,抗血小板药物疗效(lioxio)(lioxio)监测的监测的血小板图试血小板图试验验PlateletMappingPlateletMapping上市,为临床带来了快速、准确上市,为临床带来了快速、准确的的监测血小板聚集功能监测血小板
8、聚集功能的技术。的技术。第十页,共三十二页。三、凝血弹性三、凝血弹性(tnxng)(tnxng)图仪的原理:图仪的原理:承载血标本的测试杯以承载血标本的测试杯以445的角度和每的角度和每10秒秒一周的速度均速转动,一旦血栓形成,置于一周的速度均速转动,一旦血栓形成,置于血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的切应力作用切应力作用(zuyng),随之出现左右旋动,金属,随之出现左右旋动,金属针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流,针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流,给电脑软件处理后,便形成给电脑软件处理后,便形成TEG曲线。曲线。第十一页,共三十二页。第十
9、二页,共三十二页。四、凝血弹性图四、凝血弹性图(血栓血栓(xushun)(xushun)弹力图弹力图):第十三页,共三十二页。五、凝血弹性五、凝血弹性(tnxng)(tnxng)(tnxng)(tnxng)图的参数:图的参数:第十四页,共三十二页。一一R时间时间1、从检测开始到第一块纤维蛋白、从检测开始到第一块纤维蛋白(xinwidnbi)凝块形成之间的一段潜伏期,是凝血因子依次激活的凝块形成之间的一段潜伏期,是凝血因子依次激活的时间,反映凝血因子时间,反映凝血因子Fg除外与血小板除外与血小板PF3的活性。的活性。2、R时间因使用抗凝剂或凝血因子、血小板异常而延时间因使用抗凝剂或凝血因子、血小
10、板异常而延长,因血液呈高凝状态而缩短。长,因血液呈高凝状态而缩短。第十五页,共三十二页。二二K时间时间R+K正常为正常为1012min1.从从R时间终点至描记图幅度达时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间;所需的时间;2.主要与主要与Fg、其它、其它(qt)凝血因子和凝血因子和PF3活性有关,抑活性有关,抑制它们活性的抗凝剂能延长制它们活性的抗凝剂能延长K。第十六页,共三十二页。三三角度角度1.从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角,正常为线的夹角,正常为5060。2.角度与角度与K时间时间(shjin)密切相关,影响因素相同。密
11、切相关,影响因素相同。3.角度不受极其低凝状态的影响,较角度不受极其低凝状态的影响,较K时间更全面时间更全面第十七页,共三十二页。四四AA301、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度(kund),是血凝,是血凝块强度或弹性函数,块强度或弹性函数,A值用单位值用单位mm来计量;来计量;2、MA值在确定前与值在确定前与A值相等;值相等;3、MA值确定后值确定后A值测量血凝块溶解的信息。值测量血凝块溶解的信息。第十八页,共三十二页。五最大幅度五最大幅度MA1.正常值为正常值为5060mm。2.MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度(
12、yngd)及血凝块形成的稳定性;及血凝块形成的稳定性;3.主要受主要受PLT及及Fg、F活性的影响,活性的影响,PLT的的作用要比作用要比Fg大。大。第十九页,共三十二页。六六TMA时间时间timetoMA1.从凝血开始至从凝血开始至MA值确定值确定(qudng)所需用的时间所需用的时间2.TMA包含血凝块的形成速率,评估形成稳定血凝包含血凝块的形成速率,评估形成稳定血凝块所需用的时间。块所需用的时间。第二十页,共三十二页。七七CL301.测量在测量在MA值确定后值确定后30分钟内血凝块溶解剩余分钟内血凝块溶解剩余(shngy)的百分比。的百分比。2.CL30=A30/MA100%3.CL30
13、85%意示处于高纤溶状态,即纤溶亢进;意示处于高纤溶状态,即纤溶亢进;应使用抗纤溶药来纠正。应使用抗纤溶药来纠正。八八LY301.MA值后值后30分钟血凝块幅度减少的区域面积分钟血凝块幅度减少的区域面积(minj);2.LY307.5%意示处于高纤溶状态,应使用抗纤溶药来意示处于高纤溶状态,应使用抗纤溶药来纠正。纠正。第二十一页,共三十二页。LY30上=85%LY30下=15%第二十二页,共三十二页。九九TTL1、TTL=Timetolysis溶解时间溶解时间2、指从、指从MA确定确定(qudng)后,曲线幅宽收窄至后,曲线幅宽收窄至2mm时时所经过的时间所经过的时间第二十三页,共三十二页。高
14、岭土高岭土高岭土高岭土ACT其它其它(qt)凝血凝血因子因子+PF3凝血因子凝血因子+PF3+FgFb+F+PLTFb+F+PLT纤纤溶溶期期第二十四页,共三十二页。参参 数数意义意义R凝血反应时间凝血反应时间K血细胞凝集块形成时间血细胞凝集块形成时间血细胞凝集块形成速率血细胞凝集块形成速率MA最大振幅最大振幅A30最大振幅后最大振幅后30min的振幅的振幅LY30MA后后30min振幅减小百分率振幅减小百分率CL30MA后后30min血凝块溶解剩余血凝块溶解剩余%TEG常用常用(chn yn)(chn yn)参数参数第二十五页,共三十二页。方法方法R(r)K(k)TMA(m)MA(ma)EM
15、X(m)minminminmm自然自然全血全血1016 5103545455580130全血全血复钙复钙48242535455580135血浆血浆复钙复钙481320305065105180参数(cnsh)(cnsh)写法与参考值第二十六页,共三十二页。正常正常(zhngchng)TEG图图第二十七页,共三十二页。凝血因子缺乏凝血因子缺乏(quf)与低与低Fg的的TEG第二十八页,共三十二页。高凝状态高凝状态(zhungti)TEG第二十九页,共三十二页。纤溶亢进纤溶亢进(kngjn)TEG第三十页,共三十二页。TEG检测与常规检测与常规(chnggu)(chnggu)实验室检测的区实验室检测
16、的区别别 项目项目项目项目TEGTEG常规检查常规检查常规检查常规检查 操作方便性操作方便性简单,易学。一个样本,同简单,易学。一个样本,同种试剂,床边可完成。种试剂,床边可完成。操作复杂,多种样本,不同的试操作复杂,多种样本,不同的试剂,必须在实验室进行。剂,必须在实验室进行。监测范围监测范围凝血和纤溶连续的全过程凝血和纤溶连续的全过程 凝血或纤溶过程中的一个点或部凝血或纤溶过程中的一个点或部分时程分时程 血样形式血样形式不须处理,全血、血浆、富不须处理,全血、血浆、富血小板血浆等都可血小板血浆等都可须处理血样,以血浆或特定血样须处理血样,以血浆或特定血样为主为主 结果结果定性伴定量的结果,
17、电脑可定性伴定量的结果,电脑可自动生成多种结果。自动生成多种结果。多为定量结果,仪器自动生成部多为定量结果,仪器自动生成部分结果,结果单一。分结果,结果单一。报告报告有初步诊断功能,提示医师有初步诊断功能,提示医师治疗方案治疗方案 多为数值,没有诊断建议,医师多为数值,没有诊断建议,医师需要自行判断需要自行判断时间时间15-2015-20分钟分钟 每个指标的检测时间不一样每个指标的检测时间不一样 参数参数为国际标准化参数为国际标准化参数 多数非国际标准化多数非国际标准化DIC诊断诊断快速,早期,有诊断提示快速,早期,有诊断提示需较多实验室指标,不能提供诊需较多实验室指标,不能提供诊断提示,需医师综合判断断提示,需医师综合判断第三十一页,共三十二页。内容(nirng)总结一凝固法。3.磁珠法(粘度法)。电钩法与磁珠法的优点。酶抑制物+过量、定量酶。目前以TEG为主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已经在世界上40多个国家(guji)使用。2.主要与Fg、其它凝血因子和PF3活性有关,抑制它们活性的抗凝剂能延长K。2、MA值在确定前与A值相等。3、MA值确定后A值测量血凝块溶解的信息。最大振幅后30min的振幅。凝血或纤溶过程中的一个点或局部时程。须处理血样,以血浆或特定血样为主第三十二页,共三十二页。