医学专题—红细胞计数、红细胞形态检查、血红蛋白测定11973.ppt

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1、红细胞计数、红细胞形红细胞计数、红细胞形态态(xngti)检查、血红蛋白测检查、血红蛋白测定定检验检验(jinyn)系临检教研室系临检教研室 陈丽华陈丽华第一页,共九十三页。目的目的(md)要求要求1.掌握:掌握:红细胞计数、氰化高铁血红蛋白红细胞计数、氰化高铁血红蛋白测定的原理、方法、质量控制、参考值、方测定的原理、方法、质量控制、参考值、方法学平价及临床意义法学平价及临床意义;红细胞形态红细胞形态(xngti)。2.了解:血红蛋白测定其他方法了解:血红蛋白测定其他方法。第二页,共九十三页。重点重点:红细胞计数、血红蛋白测定的原理红细胞计数、血红蛋白测定的原理(yunl)、血片血片 红细胞形

2、态、红细胞形态、难点难点:红细胞检验的形态、质控。红细胞检验的形态、质控。目的目的(md)要求要求第三页,共九十三页。一、概一、概 述述第四页,共九十三页。1.红细胞的生成红细胞的生成(shn chn)骨髓(su)造血干细胞-红系祖细胞-原红细胞-早幼-中幼-晚幼-网织红细胞-成熟红细胞Epo每个原红细胞可以每个原红细胞可以(ky)生成生成16个红细胞。个红细胞。48h无分裂能力无分裂能力第五页,共九十三页。2.红细胞的破坏红细胞的破坏(phui)健康人红细胞平均寿命健康人红细胞平均寿命120天。天。红细胞主要因衰老而消亡,破坏主要在单核红细胞主要因衰老而消亡,破坏主要在单核-巨噬巨噬细胞系统

3、细胞系统(xtng),器官主要是在脾脏和肝脏;其次,器官主要是在脾脏和肝脏;其次为骨髓和其他部位。为骨髓和其他部位。第六页,共九十三页。二、红细胞计数二、红细胞计数(j sh)第七页,共九十三页。红细胞计数(红细胞计数(red blood cell count,RBC)即测定单位)即测定单位体积内红细胞数量体积内红细胞数量(shling)。是血液一般检验的基本项。是血液一般检验的基本项目,常作为诊断贫血和红细胞增多的主要指标之一。目,常作为诊断贫血和红细胞增多的主要指标之一。测定方法测定方法显微镜计数法显微镜计数法血液血液(xuy)分析分析仪法仪法第八页,共九十三页。(一)显微镜计数法(一)显

4、微镜计数法【检测原理检测原理】采用采用(ciyng)等渗稀释液将血标本稀释一定倍数,滴等渗稀释液将血标本稀释一定倍数,滴入血细胞计数室中,显微镜下计数一定区域内红入血细胞计数室中,显微镜下计数一定区域内红细胞数,经换算得每升血液中红细胞数量。细胞数,经换算得每升血液中红细胞数量。第九页,共九十三页。【器材器材】微量吸管,采血针,小试管,计数微量吸管,采血针,小试管,计数(j sh)板,盖片,棉板,盖片,棉球,显微镜。球,显微镜。【试剂试剂】红细胞稀释液:任选一种红细胞稀释液:任选一种1.Hayem稀释液稀释液:氯化钠:氯化钠1.0g、硫酸钠(含、硫酸钠(含10个结晶个结晶水)水)5.0g,氯化

5、高汞,氯化高汞0.5g,蒸馏水加至,蒸馏水加至200mL,过滤,过滤后使用。后使用。氯化钠氯化钠-调节渗透浓度调节渗透浓度 硫酸钠硫酸钠-提高比重防止红细胞粘连提高比重防止红细胞粘连 氯化高汞氯化高汞-防腐剂,有毒防腐剂,有毒第十页,共九十三页。2.柠檬酸盐甲醛柠檬酸盐甲醛(ji qun)盐水盐水氯化钠氯化钠 0.6g 调节渗透压调节渗透压柠檬酸钠柠檬酸钠 1.0g 调节渗透压,抗凝调节渗透压,抗凝36%甲醛甲醛 1ml 防腐防腐蒸馏水加至蒸馏水加至100ml,过滤,过滤2次后使用。次后使用。3.生理盐水或加生理盐水或加1%甲醛的生理盐水甲醛的生理盐水第十一页,共九十三页。【操作操作】1.中号

6、试管(中号试管(15100mm)加等渗稀释液)加等渗稀释液2ml;2.毛细血管采末梢血毛细血管采末梢血10l加入加入(jir)上述稀释液,立即上述稀释液,立即摇匀(稀释摇匀(稀释200倍);倍);3.充池,静置充池,静置2min后以低倍镜计数中间大方格内四后以低倍镜计数中间大方格内四角和中央角和中央5个中方格内的红细胞数。个中方格内的红细胞数。未染色未染色(rns)红细胞呈双凹盘形,有黄绿色折光。红细胞呈双凹盘形,有黄绿色折光。第十二页,共九十三页。红细胞计数红细胞计数(j sh)(j sh)2ml稀释液稀释液 充分混匀充分混匀10ul血液血液 充池、静止充池、静止(jngzh)镜下计数镜下计

7、数 第十三页,共九十三页。3mmWBC WBC WBC WBC 1mm第十四页,共九十三页。红细胞数红细胞数/L=5个中方格个中方格(fn)内红细胞内红细胞5 10 200 106/L 或或=1012/L5个中方格个中方格(fn)内红细胞数内红细胞数100【报告报告(bogo)方式方式】【计算计算】RBC(/L)=.1012/L第十五页,共九十三页。【方法学评价】1手工显微镜法 2血液分析仪法 为目前主要临床检验(jinyn)细胞计数方法变异系数(coefficient of variation,CV)小。第十六页,共九十三页。【质量控制】1手工法 误差来源包括(boku):标本、操作、器材、

8、固有误差(计数域误差)2仪器法 严格按操作规程;定期作室内和室间质控。第十七页,共九十三页。【参考值参考值】男性男性(nnxng):(4.00-5.50)1012/L 女性女性 :(3.50-5.00)1012/L新生儿新生儿:(6.00-7.00)1012/L【校正校正】WBC100109/L时,需校正:时,需校正:实际红细胞实际红细胞/L=所数细胞总数所数细胞总数白细胞数白细胞数(正常(正常(zhngchng)红细胞:白细胞红细胞:白细胞=750:1,可忽略白细胞可忽略白细胞的影响)的影响)第十八页,共九十三页。【注意事项注意事项】1.采血及摇匀迅速,防止血液凝固;采血及摇匀迅速,防止血液

9、凝固;2.器械应防酸防碱且干燥器械应防酸防碱且干燥(gnzo);3.充池要摇匀;充池要摇匀;4.计数时,应识别酵母及白细胞。计数时,应识别酵母及白细胞。第十九页,共九十三页。三、血红蛋白三、血红蛋白(xuhng dnbi)测定测定第二十页,共九十三页。(一)血红蛋白(一)血红蛋白(xuhng dnbi)的结构的结构血红蛋白结构血红蛋白结构(jigu):由珠蛋白和亚铁血红素结合组由珠蛋白和亚铁血红素结合组成。成。Hb色素部分:色素部分:亚铁血红素亚铁血红素蛋白质部分:珠蛋白蛋白质部分:珠蛋白Fe 2+原卟啉原卟啉第二十一页,共九十三页。空间结构:每个血红蛋白有空间结构:每个血红蛋白有4条珠蛋白肽

10、链,条珠蛋白肽链,每条肽链包裹每条肽链包裹(bogu)1个亚铁血红素,形成具有个亚铁血红素,形成具有四级空间结构的四聚体。四级空间结构的四聚体。第二十二页,共九十三页。【分类分类】(每个珠蛋白分子含两条(每个珠蛋白分子含两条 链和两条非链和两条非 链)链)正常人:正常人:HbA(22)占占90%成人主要血红蛋成人主要血红蛋白;白;HbA2(22)占占2%-3%成人次要成人次要(cyo)血红蛋白血红蛋白 HbF (22)占占2%以下以下 胎儿主要血红蛋白胎儿主要血红蛋白第二十三页,共九十三页。生理情况生理情况(qngkung)下,下,99%Hb的铁呈的铁呈Fe2+状态,称状态,称为还原血红蛋白,

11、亚铁状态的为还原血红蛋白,亚铁状态的Hb与氧结合称氧合与氧结合称氧合血红蛋白(血红蛋白(HbO2).1%Hb的铁呈的铁呈Fe3+状态,称为高铁血红蛋白状态,称为高铁血红蛋白(Hi)。)。Hb的合成的合成(hchng)受激素的调节:受激素的调节:Epo和雄激素。和雄激素。第二十四页,共九十三页。注意事项注意事项:1.如如-链或链或-链合成障碍,使三种正常链合成障碍,使三种正常血红蛋白比例异常血红蛋白比例异常(ychng),即各型地中海贫血;如,即各型地中海贫血;如多肽链发生氨基酸置换、丢失、加长,称为血红多肽链发生氨基酸置换、丢失、加长,称为血红蛋白病蛋白病。2.病理情况下可出现硫化血红蛋白(病

12、理情况下可出现硫化血红蛋白(SHb)。)。第二十五页,共九十三页。(二)血红蛋白(二)血红蛋白(xuhng dnbi)衍生物及其吸收衍生物及其吸收光谱光谱 1.氧合血红蛋白(氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,HbO2):Hb与与O2结结合时形成。合时形成。2.还原还原(hun yun)血红蛋白(血红蛋白(reduced hemoglobin,Hbred):未与):未与O2结合时的结合时的Hb。3.高铁血红蛋白(高铁血红蛋白(hemiglo-bin,Hi)或正铁血红蛋白)或正铁血红蛋白(methemoglobin,Mhb):Fe 2+被氧化成被氧化成Fe 3+。第二十六页,共九十三页。4

13、.碳氧血红蛋白(碳氧血红蛋白(HbCO)、硫化血红蛋白)、硫化血红蛋白(SHb):与):与O2结合的配位键被结合的配位键被CO、S等占据。等占据。5.氰化高铁血红蛋白(氰化高铁血红蛋白(HiCN):):Hi与与CN-结合而成。结合而成。波峰波峰(bfng)540nm,波谷,波谷504nm。正常情况下,血液正常情况下,血液(xuy)中血红蛋白主要是中血红蛋白主要是HbO2和和Hbred,以及少量,以及少量HbCO和和Hi。第二十七页,共九十三页。(三)血红蛋白(三)血红蛋白(xuhng dnbi)测定方法测定方法手工手工(shugng)法:法:HiCN法法SLS-Hb法法AHD575法法HiN3

14、法法血液血液(xuy)分析仪法分析仪法第二十八页,共九十三页。1、氰化高铁血红蛋白、氰化高铁血红蛋白(xuhng dnbi)(HiCN)测定法测定法1)原理)原理:在:在Hb转化液中,转化液中,除除SHb外,外,Hb被高铁氰被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白化钾氧化成高铁血红蛋白(xuhng dnbi),再与,再与CN-结结合,生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白合,生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN),吸收峰为),吸收峰为540nm,毫摩尔消光系数,毫摩尔消光系数为为44 Lmmol-1 cm-1。因此根据标本的吸光度,。因此根据标本的吸光度,即可求得血红蛋白总量(不含即可求得血红蛋白总量(

15、不含SHb)。)。第二十九页,共九十三页。2)器材)器材:分光光度计、移液管、微量吸管、试管等。分光光度计、移液管、微量吸管、试管等。3)试剂)试剂:血红蛋白转化液(文齐液)成分如下:血红蛋白转化液(文齐液)成分如下高铁氰化钾:使高铁氰化钾:使Hb转化成转化成Hi氰化钾:使氰化钾:使Hi形成形成(xngchng)HiCN无水磷酸二氢钾:防止混浊,调节无水磷酸二氢钾:防止混浊,调节pH值值TritonX100:非离子型表面活性剂,加速溶血,缩非离子型表面活性剂,加速溶血,缩短转化时间,防止因血浆蛋白改变引起的混浊。短转化时间,防止因血浆蛋白改变引起的混浊。第三十页,共九十三页。4)操作:)操作:

16、a.取指血取指血20ul,加到,加到5ml血红蛋白转化液中,混匀,血红蛋白转化液中,混匀,静置静置5分钟。分钟。b.用分光用分光(fn un)光度计比色。波长光度计比色。波长540nm,以空白,以空白转化液调零,测定吸光度转化液调零,测定吸光度“A”。第三十一页,共九十三页。5)计算)计算标准状态下的计算标准状态下的计算Hb(g/L)=A 251A 367.7其中,其中,A为测得的吸光度,为测得的吸光度,64458为为Hb的分子量,的分子量,251为测定为测定(cdng)时血液稀释倍数,时血液稀释倍数,44为为HiCN的毫摩的毫摩尔吸光系数,尔吸光系数,1000为换算成摩尔吸光系数。为换算成摩

17、尔吸光系数。64458441000第三十二页,共九十三页。非标准状态下的计算:求换算常数非标准状态下的计算:求换算常数(chngsh)K 标准液标定标准液标定Hb液浓度液浓度(标准值标准值)K=-本室测定标准液的本室测定标准液的“A”(测定值测定值)标本标本Hb g/L =标本测定值标本测定值A 第三十三页,共九十三页。举例:用不同浓度举例:用不同浓度(nngd)的的Hb的标准品:的标准品:50,100,150,200g/L测得的吸光度分别为测得的吸光度分别为0.13,0.27,0.41和和0.54。则。则K值为值为K=371.75若测定管吸光度为若测定管吸光度为0.32,则测定管,则测定管H

18、b浓度为浓度为Hb(g/L)=0.32371.75=118.96HbA50+100+150+2000.13+0.27+0.41+0.54第三十四页,共九十三页。6)结果报告结果报告(bogo)Hb g/L7)参考值参考值成年男性:成年男性:120-160 g/L 成年女性:成年女性:110-150 g/L新生儿:新生儿:170-200 g/L第三十五页,共九十三页。贫血分级:贫血分级:轻度:男性轻度:男性120g/L,女性女性110g/L 中度中度(zhn d):90g/L 重点:重点:60g/L 极重度:极重度:30109/L,重症黄疸,严重的,重症黄疸,严重的血管内溶血等。血管内溶血等。第

19、三十七页,共九十三页。2、方法学评价、方法学评价(pngji)1)HiCN法法:由国际血液学标准化委员会:由国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐,并经)推荐,并经WHO确认为血红蛋白测定确认为血红蛋白测定(cdng)的参考方法。的参考方法。优点优点:操作简单,结果稳定可靠,试剂容易保存操作简单,结果稳定可靠,试剂容易保存 能测定除能测定除SHb以外的所有血红蛋白,并易以外的所有血红蛋白,并易 于建立质控。于建立质控。第三十八页,共九十三页。缺点缺点(qudin):不能测定不能测定SHb。对对HbCO转化太慢,需要转化太慢,需要100分钟。分钟。高丙种球蛋白血症,变性高丙种球蛋白血症,变性Hb

20、血症,高白细血症,高白细胞的血可出现混浊,按胞的血可出现混浊,按15g/L(pH7.27.5)甚至)甚至50g/L(pH6.76.9)加入氯化钠可防止,高浓度有)加入氯化钠可防止,高浓度有核核RBC引起的混浊不能防止。引起的混浊不能防止。KCN为剧毒,需妥善保存。为剧毒,需妥善保存。第三十九页,共九十三页。2)SDS-Hb(十二(十二(sh r)烷基硫酸钠)法烷基硫酸钠)法优点优点:试剂无毒,结果:试剂无毒,结果(ji gu)准确,重复性好准确,重复性好缺点缺点:SDS纯度难保证;纯度难保证;依赖依赖HiCN法,间接得到结果;法,间接得到结果;试剂可破坏试剂可破坏WBC,不能与,不能与WBC同

21、时共用同时共用标本进行血细胞计数的自动分析。标本进行血细胞计数的自动分析。第四十页,共九十三页。3)叠氮高铁血红蛋白)叠氮高铁血红蛋白(xuhng dnbi)法(法(HiN3)优点优点:准确度、精密度较高:准确度、精密度较高缺点缺点:试剂:试剂(shj)仍有毒性,仍有毒性,HbCO转化慢转化慢本法与本法与HiCN法相似法相似第四十一页,共九十三页。4)碱羟血红蛋白)碱羟血红蛋白(xuhng dnbi)法(法(AHD575)优点优点:试剂简易,不含毒性,呈色稳定,准确性与:试剂简易,不含毒性,呈色稳定,准确性与精确性较高。精确性较高。缺点缺点(qudin):波峰位于波峰位于575nm处,溶液中碱

22、性较高,处,溶液中碱性较高,不适用于自动检测,不适用于自动检测,HbF不能转化。不能转化。第四十二页,共九十三页。5)CTAB法法优点优点:溶血性强且不破坏白细胞,适于血液:溶血性强且不破坏白细胞,适于血液(xuy)分析仪检测。分析仪检测。缺点缺点:精密度、准确度略低。:精密度、准确度略低。沙利法为传统血红蛋白沙利法为传统血红蛋白(xuhng dnbi)测定法,已淘汰。测定法,已淘汰。第四十三页,共九十三页。6)血液)血液(xuy)分析仪法分析仪法优点优点:简便、快速、多项。:简便、快速、多项。缺点缺点:仪器型号仪器型号(xngho)不同,使用的溶血剂不同,不同,使用的溶血剂不同,形成的形成的

23、Hb衍生物不同。衍生物不同。某些溶血剂形成的某些溶血剂形成的Hb衍生物稳定性较差,衍生物稳定性较差,因此要严格控制溶血剂的量及作用时间。因此要严格控制溶血剂的量及作用时间。第四十四页,共九十三页。对具有抗溶血剂作用的疾病(肝病、低色素性贫对具有抗溶血剂作用的疾病(肝病、低色素性贫血),溶血不完全而影响结果。血),溶血不完全而影响结果。有些溶血剂内虽加入有些溶血剂内虽加入(jir)了了KCN,但其衍生物并,但其衍生物并非非HiCN,而是氰化血红蛋白,仪器需经过,而是氰化血红蛋白,仪器需经过HiCN标准液校正后,才能进行标准液校正后,才能进行Hb测定。测定。第四十五页,共九十三页。(四)(四)Hb

24、与与RBC测定测定(cdng)的临床意义的临床意义参考值参考值 RBC Hb男性男性(nnxng)(4.05.5)1012/L 120160g/L女性女性 (3.55.0)1012/L 110150g/L新生儿新生儿 (6.07.0)1012/L 170200g/L70岁男性岁男性 94.2122.2g/L70岁女性岁女性 86.5111.8g/L第四十六页,共九十三页。(1)生理)生理(shngl)变化变化1)年龄与性别)年龄与性别新生儿新生儿6个月个月2岁婴儿岁婴儿 ,生长发育迅速,血容量,生长发育迅速,血容量(rngling)造血原料不足,引起生理性贫血。造血原料不足,引起生理性贫血。老

25、年人老年人 :对营养摄取、利用和造血功能减退,:对营养摄取、利用和造血功能减退,RBC、Hb比中青年人低。比中青年人低。男性男性女性:雄激素女性:雄激素第四十七页,共九十三页。2)精神因素)精神因素:情绪波动,使肾上腺素增多,:情绪波动,使肾上腺素增多,RBC、Hb 3)气压)气压:气压低(高山居民:气压低(高山居民(jmn)),红细胞代偿性),红细胞代偿性4)长期多次)长期多次献血献血者,红细胞代偿者,红细胞代偿5)妊娠期)妊娠期 :妊娠期血容量明显:妊娠期血容量明显 ,引起血液稀释,引起血液稀释,Hb常在常在100g/L以下,生理性贫血。以下,生理性贫血。第四十八页,共九十三页。(2)病理

26、变化)病理变化1)RBC和和Hb增多增多指单位容积血液中红细胞数值及血红蛋白含量指单位容积血液中红细胞数值及血红蛋白含量(hnling)高于正常值高限。高于正常值高限。男性男性 Hb 170g/L 女性女性 Hb 160g/L RBC 6.01012/L RBC 5.51012/L第四十九页,共九十三页。相对性增多相对性增多:由于大量失水、血浆量下降而使血:由于大量失水、血浆量下降而使血液浓缩所致,如呕吐、严重腹泻、大面积烧伤液浓缩所致,如呕吐、严重腹泻、大面积烧伤(shoshng)等。等。绝对性增多绝对性增多:见于慢性心肺疾病,真性红细胞增:见于慢性心肺疾病,真性红细胞增多症。多症。第五十页

27、,共九十三页。2)红细胞和)红细胞和Hb减少减少:贫血:贫血骨髓造血功能低下:如再障、白血病、恶性肿瘤骨髓造血功能低下:如再障、白血病、恶性肿瘤(xng zhng li)造血原料缺乏:如缺铁、叶酸、造血原料缺乏:如缺铁、叶酸、VB12等;等;红细胞破坏增加:如各种溶血性贫血;红细胞破坏增加:如各种溶血性贫血;红细胞丢失过多:如急、慢性失血;红细胞丢失过多:如急、慢性失血;促红细胞生成素减低症(肾性贫血)促红细胞生成素减低症(肾性贫血)Hb测定测定(cdng)与红细胞计数的临床意义相似,但对贫血与红细胞计数的临床意义相似,但对贫血程度判断的准确性优于红细胞计数。程度判断的准确性优于红细胞计数。第

28、五十一页,共九十三页。Hb含量含量(hnling)与与RBC数量的关系数量的关系 红细胞与血红蛋白的增减不一定成比例,如大细胞红细胞与血红蛋白的增减不一定成比例,如大细胞性贫血患者性贫血患者(hunzh)的的RBC往往较往往较Hb减少显著;而小减少显著;而小细胞性贫血患者则相反。细胞性贫血患者则相反。正色素性贫血:正色素性贫血:RBC、Hb成正比减少成正比减少低色素性贫血:低色素性贫血:RBC Hb第五十二页,共九十三页。四、红细胞的形态四、红细胞的形态(xngti)检查检查第五十三页,共九十三页。概述概述(i sh)各种原因可作用于红细胞生理进程的不同阶段,各种原因可作用于红细胞生理进程的不

29、同阶段,从而引起红细胞相应的病理变化,导致某些类型从而引起红细胞相应的病理变化,导致某些类型贫血的红细胞发生形态学变化,这些变化包括红贫血的红细胞发生形态学变化,这些变化包括红细胞的大小、形状、染色性质和内含物的异常,细胞的大小、形状、染色性质和内含物的异常,因此因此RBC形态检查常作为追踪贫血线索的一项重形态检查常作为追踪贫血线索的一项重要检查内容,对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的要检查内容,对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床临床(ln chun)价值。价值。第五十四页,共九十三页。【方法及评价】1.显微镜分析法:是仪器法校准的参考方法;2.计算机图像分析:能快速自动以正常红细胞形态为参考,按

30、红细胞形态特征做出类型和比例(bl)统计分析,可用于RBC形态变化相关疾病的辅助诊断;3.血液分析仪法:不能直接提供红细胞形态改变的确切信息,需用镜检血涂片核实。注意:如果血片制作不良和染色不佳,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。第五十五页,共九十三页。【质量控制】选择细胞分布均匀的区域(qy):红细胞堆积棒状穿钱状:细胞过于密集。但如果在血涂片较薄的区域出现,可能是红细胞外附有异型球蛋白注意完整的检查顺序。减少人为因素影响。第五十六页,共九十三页。人为原因人为原因(yunyn)造成红细胞形态异常造成红细胞形态异常1.涂片不当:出现棘形红细胞、邹缩涂片不当:出现棘形红细胞、邹缩RBC、红

31、细胞、红细胞缗钱状形成等。缗钱状形成等。2.使用非疏水性玻片:口型使用非疏水性玻片:口型RBC。3.染色不当:嗜多色染色不当:嗜多色RBC。4.抗凝剂抗凝剂EDTA过高,或长时间放置血液:锯齿状过高,或长时间放置血液:锯齿状RBC。5.涂片干燥过慢,或由于固定液中混有少许水分涂片干燥过慢,或由于固定液中混有少许水分:面面包圈形包圈形RBC。6.涂片末端涂片末端(m dun)附近:长轴方向一致的假椭圆形附近:长轴方向一致的假椭圆形RBC。第五十七页,共九十三页。(一)正常红细胞形态(一)正常红细胞形态(xngti)(染色后)(染色后)红细胞直径红细胞直径6.77.7um,平均直径为平均直径为7.

32、2um。桔红色,。桔红色,向心性淡染,中心向心性淡染,中心(zhngxn)苍白,淡染区约为红细苍白,淡染区约为红细胞直径的胞直径的1/3。意义:正常人、再障、白血病、急性失血可见正意义:正常人、再障、白血病、急性失血可见正常形态。常形态。第五十八页,共九十三页。(二)大小(二)大小(dxio)异常异常1.红细胞大小红细胞大小(dxio)不均(不均(anisocytosis)红细胞直径相差一倍以上,常见于各种重症增红细胞直径相差一倍以上,常见于各种重症增 生性贫血,尤其见于重症巨幼细胞贫血。生性贫血,尤其见于重症巨幼细胞贫血。第五十九页,共九十三页。2.小红细胞(小红细胞(microcyte)直

33、径小于直径小于6um者称为者称为(chn wi)小红细胞,正常人偶见。小红细胞,正常人偶见。提示血红蛋白合成障碍,可能由于缺铁和珠蛋白提示血红蛋白合成障碍,可能由于缺铁和珠蛋白代谢异常所致。见于缺铁性贫血和珠蛋白生成障代谢异常所致。见于缺铁性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血。常伴有中心浅染区扩大。碍性贫血。常伴有中心浅染区扩大。第六十页,共九十三页。3.大红细胞(大红细胞(macrocyte)直径大于直径大于10um,见于溶血性贫血(由于不全成熟,见于溶血性贫血(由于不全成熟的红细胞增多)及巨幼红细胞性贫血(是由于叶的红细胞增多)及巨幼红细胞性贫血(是由于叶酸酸(y sun)或维生素或维生素B12缺

34、乏,缺乏,DNA合成障碍,血红合成障碍,血红蛋白合成过剩,脱核后形成大红细胞或巨红细胞)蛋白合成过剩,脱核后形成大红细胞或巨红细胞)。第六十一页,共九十三页。红细胞大小不一第六十二页,共九十三页。红细胞大小不一第六十三页,共九十三页。4.巨红细胞(巨红细胞(megalocyte)直径大于直径大于15um,见于巨幼细胞贫血,见于巨幼细胞贫血(pnxu)。细胞中。细胞中心浅心浅染区消失。染区消失。第六十四页,共九十三页。第六十五页,共九十三页。第六十六页,共九十三页。小细胞低色素小细胞低色素(s s)多(缺铁、地贫)多(缺铁、地贫)单纯小红细胞单纯小红细胞microcytemegalocyte溶贫

35、、急性溶贫、急性(jxng)失血、巨幼贫失血、巨幼贫Macrocyte巨幼贫巨幼贫anisocytosis低色素性贫血低色素性贫血(pnxu)、溶贫、溶贫、失贫、巨幼贫失贫、巨幼贫等增生性贫血等增生性贫血(pnxu)。第六十七页,共九十三页。(三)形态(三)形态(xngti)异常异常1.球形红细胞(球形红细胞(spherocyte)球形红细胞直径小于正常,厚度增加常大于球形红细胞直径小于正常,厚度增加常大于2um,无中心,无中心(zhngxn)浅染区,似球形。常见于遗传性浅染区,似球形。常见于遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、新球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病及

36、红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等。生儿溶血病及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等。第六十八页,共九十三页。2.椭圆形红细胞(椭圆形红细胞(elliptocyte)椭圆形红细胞呈卵圆形、杆形,长度可大于宽度椭圆形红细胞呈卵圆形、杆形,长度可大于宽度3-4倍,是细胞倍,是细胞(xbo)膜缺陷所致,在遗传形椭圆形红膜缺陷所致,在遗传形椭圆形红细胞细胞(xbo)增多症病人血涂片中此细胞增多症病人血涂片中此细胞(xbo)可在可在25%以上。以上。第六十九页,共九十三页。3.靶形红细胞(靶形红细胞(target cell)中心区和细胞周缘染色中心区和细胞周缘染色(rns)深,其间为不染色深,其间为不染色(rns)的

37、苍白环。是由于的苍白环。是由于H b含量不足而且分布不均。见含量不足而且分布不均。见于低色素性贫血,尤其是珠蛋白生成障碍性贫血。于低色素性贫血,尤其是珠蛋白生成障碍性贫血。第七十页,共九十三页。4.棘形红细胞(棘形红细胞(acanthocyte)红细胞表面有刺状突起红细胞表面有刺状突起(tq),大小不一、形态各异。,大小不一、形态各异。常见于遗传性常见于遗传性脂蛋白缺乏症及脾切除、酒精中毒脂蛋白缺乏症及脾切除、酒精中毒性肝病、尿毒症。性肝病、尿毒症。第七十一页,共九十三页。5.镰形红细胞(镰形红细胞(sickle cell)红细胞形如镰刀状,由于红细胞内存在红细胞形如镰刀状,由于红细胞内存在H

38、bS所致。所致。主要主要(zhyo)见于镰形红细胞性贫血。见于镰形红细胞性贫血。第七十二页,共九十三页。6.口形红细胞(口形红细胞(stomatocyte)红细胞中心苍白区呈扁平状,形如一个红细胞中心苍白区呈扁平状,形如一个(y)微张开微张开的鱼口。的鱼口。DIC及酒精中毒时可见少量此类细胞。及酒精中毒时可见少量此类细胞。第七十三页,共九十三页。7.裂片细胞(裂片细胞(schistocyte)为红细胞破坏为红细胞破坏(phui)后的碎片,大小不一,形态各后的碎片,大小不一,形态各异,边缘不规则。在微血管病性溶血性贫血如异,边缘不规则。在微血管病性溶血性贫血如DIC时此类细胞增多。时此类细胞增多

39、。第七十四页,共九十三页。8.红细胞形态不齐(红细胞形态不齐(poikilocytosis):红细胞形态发生红细胞形态发生(fshng)多种明显该变,可呈梨形、多种明显该变,可呈梨形、泪滴形、新月形、三角形等。最常见于巨幼贫。泪滴形、新月形、三角形等。最常见于巨幼贫。第七十五页,共九十三页。第七十六页,共九十三页。第七十七页,共九十三页。(四)染色(四)染色(rns)异常异常1.低色素性(低色素性(hypochromatic)红细胞)红细胞:血红蛋:血红蛋白含量低,中心浅染区扩大。常见于缺铁性贫血、白含量低,中心浅染区扩大。常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成珠蛋白生成(shn chn)障碍性贫血、铁

40、粒幼细胞贫血。障碍性贫血、铁粒幼细胞贫血。第七十八页,共九十三页。2.高色素性红细胞(高色素性红细胞(hyperchromatic):):血红蛋白血红蛋白含量含量(hnling)高,染色深,中心浅染区缩小或消失。高,染色深,中心浅染区缩小或消失。见于巨幼细胞贫血和遗传性球形红细胞增多症。见于巨幼细胞贫血和遗传性球形红细胞增多症。第七十九页,共九十三页。(12)双相性红细胞第八十页,共九十三页。3.嗜多色性(嗜多色性(polychromatic)细胞)细胞:属于尚未完:属于尚未完全成熟的红细胞,细胞较大,由于全成熟的红细胞,细胞较大,由于(yuy)胞浆中含胞浆中含有多少不等的嗜碱性物质有多少不等

41、的嗜碱性物质RNA而被染成灰蓝色。而被染成灰蓝色。见于白血病、溶血性贫血。见于白血病、溶血性贫血。第八十一页,共九十三页。hypochromichyperchromicpolychromatic 缺铁、缺铁、地贫地贫红细胞呈淡灰兰色或紫色,体红细胞呈淡灰兰色或紫色,体 积较正常稍大,属于积较正常稍大,属于(shy)未完全熟未完全熟细胞。细胞。活体染色即网织红细胞活体染色即网织红细胞增增多,增生性贫血。多,增生性贫血。巨幼贫、球红巨幼贫、球红增多增多(zn du)症症第八十二页,共九十三页。(五)结构(五)结构(jigu)异常异常1.嗜碱性点彩红细胞(嗜碱性点彩红细胞(basophilic st

42、ippling cell):指在瑞氏染色下,胞浆内存在嗜碱性黑蓝色颗粒指在瑞氏染色下,胞浆内存在嗜碱性黑蓝色颗粒的红细胞,属于的红细胞,属于(shy)未完全成熟红细胞,颗粒大未完全成熟红细胞,颗粒大小不一、多少不均。常作为铅中毒诊断筛选指标。小不一、多少不均。常作为铅中毒诊断筛选指标。第八十三页,共九十三页。嗜碱性嗜碱性(jin xn)点彩红细胞点彩红细胞第八十四页,共九十三页。2.染色质小体(染色质小体(Howell-Jolly body):):位于成熟位于成熟(chngsh)或幼红细胞的胞浆中圆形,或幼红细胞的胞浆中圆形,1-2um,紫色,紫色,为核残余物,常见于巨幼细胞贫血、溶血性贫血为

43、核残余物,常见于巨幼细胞贫血、溶血性贫血等。等。第八十五页,共九十三页。3.卡波氏环(卡波氏环(Cabot ring):):在成熟或幼稚红细胞在成熟或幼稚红细胞胞质内,呈紫红色线圈状或胞质内,呈紫红色线圈状或8字形字形(z xn),可能是胞,可能是胞浆中脂蛋白变性,见于巨幼细胞性贫血和铅中毒。浆中脂蛋白变性,见于巨幼细胞性贫血和铅中毒。第八十六页,共九十三页。第八十七页,共九十三页。4.有核红细胞(有核红细胞(nucleated erythrocyte):):即幼稚即幼稚(yuzh)红细胞,出现在外周血为病理现象,见于各红细胞,出现在外周血为病理现象,见于各种溶血性贫血、白血病。种溶血性贫血、

44、白血病。第八十八页,共九十三页。有核红细胞有核红细胞第八十九页,共九十三页。(六)寄生虫:(六)寄生虫:疟原虫疟原虫(yun chn)、微丝蚴、杜微丝蚴、杜利什曼原虫利什曼原虫(yun chn)感染时感染时可见红细胞可见红细胞质内相应病质内相应病原体。原体。第九十页,共九十三页。第九十一页,共九十三页。谢谢(xi xie)第九十二页,共九十三页。内容(nirng)总结红细胞计数、红细胞形态检查、血红蛋白测定(cdng)。3.充池,静置2min后以低倍镜计数中间大方格内四角和中央5个中方格内的红细胞数。【校正】WBC100109/L时,需校正:。标准液标定Hb液浓度(标准值)。Hb(g/L)=0.32371.75=118.96。试剂可破坏WBC,不能与WBC同时共用标本进行血细胞计数的自动分析。对具有抗溶血剂作用的疾病(肝病、低色素性贫血),溶血不完全而影响结果。谢谢第九十三页,共九十三页。

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