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1、血液凝固与影响血液血液凝固与影响血液凝固的因素凝固的因素目录目录1.实验目的实验目的2.实验原理实验原理3.实验材料实验材料4.实验步骤实验步骤5.本卷须知本卷须知6.实验结果实验结果7.结果分析结果分析8.实验小结实验小结一一.实验目的实验目的通过测定不同条件下的血液凝固通过测定不同条件下的血液凝固时间,加深理解影响血液凝固的时间,加深理解影响血液凝固的因素。因素。二二.实验原理实验原理1.分类分类内源性凝血内源性凝血外源性凝血外源性凝血有无有无血液血液外凝外凝血因血因子参子参与与启动因子为组织因子血液接触带负电荷的异物外表而启动无无有有三三.实验材料实验材料家兔、兔手术台、哺乳动物手术器械
2、一家兔、兔手术台、哺乳动物手术器械一套、动脉夹、细塑料管、套、动脉夹、细塑料管、20ml注射器、注射器、试管试管11支、小烧杯支、小烧杯2个、冰块、棉花、个、冰块、棉花、石蜡油、肝素、生理盐水、石蜡油、肝素、生理盐水、20%乌拉坦、乌拉坦、肺组织研磨液、血浆、血清、肺组织研磨液、血浆、血清、3%CaCl2、柠檬酸钠。柠檬酸钠。四四.实验步骤实验步骤1.手术操作手术操作 称重称重 耳缘静脉麻醉耳缘静脉麻醉(20%乌拉坦乌拉坦5ml/kg)固定固定(仰卧位仰卧位)剪毛剪毛(颈部颈部)作颈部正中切口作颈部正中切口(35厘米厘米)颈总动脉插管颈总动脉插管 放血放血钝性别离结缔组织肌肉,钝性别离结缔组织
3、肌肉,在气管两侧找到颈动脉鞘,在气管两侧找到颈动脉鞘,用玻璃分针别离一侧颈总用玻璃分针别离一侧颈总动脉,远心端用线结扎以动脉,远心端用线结扎以阻断血流,近心端上动脉阻断血流,近心端上动脉夹,在结扎线与动脉夹之夹,在结扎线与动脉夹之间剪一斜形小切口,向心间剪一斜形小切口,向心脏方向插入细塑料管,结脏方向插入细塑料管,结扎固定扎固定 2.实验工程实验工程(1)取试管取试管7支编号,按以下要求参加不同支编号,按以下要求参加不同的物品,最后每支试管参加血液的物品,最后每支试管参加血液1ml。放棉花少许加血放棉花少许加血 加柠檬酸钠加柠檬酸钠3mg加血后摇匀加血后摇匀加血后将试管置于加血后将试管置于37
4、水中水中 对照管只加血对照管只加血 加肝素加肝素8单位加血后摇匀单位加血后摇匀)用石蜡油润滑试管内外表加血用石蜡油润滑试管内外表加血 加血后将试管放在冰块间加血后将试管放在冰块间(2)记录凝血时间。记录凝血时间。每支试管加血后,即刻开始每支试管加血后,即刻开始记时,每隔记时,每隔30s将试管倾斜将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状,试管倾至血液成为凝胶状,试管倾斜时不流出时为止斜时不流出时为止(3)取试管取试管4支并编号,按下表要求在每支支并编号,按下表要求在每支试管内参加各种物品,其中试管内参加各种物品,其中3%CaCl2液须液须在最后参加并立即混匀,记
5、下时间。在最后参加并立即混匀,记下时间。表表1 实验工程实验工程 1234血浆(ml)0.50.50.5血清(ml)0.53%NaCl2滴0.9%NaCl2滴2滴肺组织研磨液2滴2滴3%CaCl22滴2滴2滴五五.本卷须知本卷须知1.记录凝血时间应力求准确。记录凝血时间应力求准确。2.每支试管口径大小及采血量要保持一致,不每支试管口径大小及采血量要保持一致,不可相差太大。可相差太大。3.判断凝血时间的标准要保持一致。一般以倾判断凝血时间的标准要保持一致。一般以倾斜试管斜试管45为宜,试管内血液不流动为准。为宜,试管内血液不流动为准。4.加强组织工作,合理分工,比照实验的采血加强组织工作,合理分
6、工,比照实验的采血时间要紧接着进行,不可耽误。时间要紧接着进行,不可耽误。六六.实验结果实验结果凝血时间比较凝血时间比较放棉花少许加血放棉花少许加血促进凝血促进凝血 加柠檬酸钠加柠檬酸钠3mg加血后摇匀加血后摇匀不凝血不凝血加血后将试管置于加血后将试管置于37水中水中促进凝血促进凝血 加肝素加肝素8单位加血后摇匀单位加血后摇匀)不凝血不凝血 用石蜡油润滑试管内外表加血用石蜡油润滑试管内外表加血延缓凝血延缓凝血 加血后将试管放在冰块间加血后将试管放在冰块间延缓凝血延缓凝血 1234血浆(ml)0.50.50.5血清(ml)0.53%NaCl2滴0.9%NaCl2滴2滴肺组织研磨液2滴2滴3%Ca
7、Cl22滴2滴2滴凝固时间正常较快快不凝表表2 2 不同因素对血液凝固的影响不同因素对血液凝固的影响 七七.结果分析结果分析粗糙外表粗糙外表PtPt解体解体血液凝血液凝固加快固加快光滑外表光滑外表适度加热适度加热(可可42)凝血酶活性增强凝血酶活性增强降低温度降低温度(10)血液凝血液凝固延迟固延迟抗凝血酶抗凝血酶(AT)凝血酶凝血酶AT凝血酶复合物凝血酶复合物凝血酶失活凝血酶失活肝素肝素加速柠檬酸钠柠檬酸钠Ca2+柠檬酸根柠檬酸根-Ca2+络和物络和物血血Ca2+减少减少凝血过程受阻凝血过程受阻血液不凝固血液不凝固体内外体内外均抗凝均抗凝仅体内抗仅体内抗凝凝反之反之,血血Ca2+增加增加,促进凝促进凝血血肺组织肺组织研磨液研磨液内含组内含组织因子织因子启动外启动外源性凝源性凝血途径血途径血液血液凝固凝固增快增快血清中血清中无纤维无纤维蛋白原蛋白原血浆中血浆中含纤维含纤维蛋白原蛋白原可凝固可凝固不凝固不凝固八八.实验小结实验小结1.凝血过程包括内源性和外源性凝血两凝血过程包括内源性和外源性凝血两种途径。种途径。2.某些理化因素可作用于内源性或外源某些理化因素可作用于内源性或外源性凝血途径性凝血途径,从而延缓或促进血液凝固。从而延缓或促进血液凝固。