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1、-1-区动物疫病监测与流行病学调查工作实施方案 为进一步强化动物疫病防控工作,推动全区动物疫病监测与流行病学调查工作有序开展,根据省、市相关工作要求,结合我区实际,制定本方案。一、总体要求 重点开展非洲猪瘟、口蹄疫、高致病性禽流感、小反刍兽疫、布鲁氏菌病、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、新城疫等优先防治病种及血吸虫病、狂犬病等人畜共患病的监测和流行病学调查工作,其他动物疫病按照相关动物疫病防治技术规范做好监测和流行病学调查工作。积极推进种畜禽场主要动物疫病监测净化工作,加强动物疫情风险分析评估,持续开展动物疫病净化场主要疫病监测。严格按照病原微生物实验室生物安全管理条例等相关规定和要求规范开展实验活动
2、,通过动物疫病监测与流行病学调查工作的实施,全面掌握我区动物疫病的分布状况和流行态势,为防控决策提供科学依据。二、基本原则(一)主动监测与被动监测相结合。区动物疫病预防控制中心要继续做好动物疫病主动监测,并获取相关数据。进一步加强被动监测,强化临床巡查和疫病报告,探索将动物诊疗单位和养殖企业执业兽医诊断报告信息纳入国家动物疫病监测体系。根据动物疫病流行特点、防控现状和畜禽生产实际,有针对性地开展监测分析,提高监测工作数据采集、分析和报告的规范性、系统性和科学性。(二)监测与流行病学调查相结合。进一步强化监测与流行病学-2-调查工作的协同性,监测发现下列情形的,要及时开展流行病学调查:一是发现非
3、洲猪瘟、口蹄疫、高致病性禽流感等重大动物疫病流行特点发生改变的;二是确诊发生外来动物疫病、新发动物疫病或已经消灭疫病的;三是发现猪瘟等主要动物疫病流行特点出现明显变化的;四是在较短时间出现大量动物发病或不明原因死亡,且蔓延较快的。(三)调查监测与区域化管理相结合。积极引导种畜禽场和规模养殖场主动开展主要动物疫病监测和流行病学调查工作,推动养殖场开展疫病净化,建设无疫小区;在非洲猪瘟等重大动物疫病分区防控中,要进一步强化对监测和流行病学调查数据的利用。(四)病原监测与抗体监测相结合。实行血清学和病原学监测并重,重点开展非洲猪瘟、口蹄疫(A 型、O 型)、禽流感(H5 亚型、H7亚型)的病原学监测
4、和布鲁氏菌病的血清学监测、家畜血吸虫病查治和小反刍兽疫监测,及时掌握病原分布状况,分析疫病流行趋势。同时,做好免疫效果监测与评价,如实记录疫苗生产企业、疫苗名称、疫苗批号、免疫时间等信息。三、职责分工(一)区动物疫病预防控制中心。负责组织实施年度动物疫病监测与流行病学调查工作。重点做好非洲猪瘟、口蹄疫、高致病性禽流感、布鲁氏菌病、小反刍兽疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪伪狂犬病、新城疫等疫病的监测与流行病学调查工作,兼顾其他流行疫病的监测,及时分析疫情发展趋势,为早期预警和应急处置提供支持。做好动物疫病净化场及无规定动物疫病小区的监测工作,及时做好动物疫病监测信息的汇总分析和报送工作。(二)镇(
5、街)畜牧兽医站。负责主要动物疫病血清学(病原学)-3-监测样品的采集、送检,积极开展高致病性禽流感、新城疫等血清学监测。建立健全监测采样管理制度,规范填写采样记录单,确保记录真实、准确、可追溯。协助区动物疫病预防控制中心做好流行病学调查、疫病净化及非洲猪瘟无疫小区建设等工作。四、结果报送和信息反馈(一)主要动物疫病监测结果报送和信息反馈 1.区疫控中心每月 25 日前通过中国兽医网“兽医卫生综合信息平台”,按要求将动物疫病监测结果和疫情信息报送至中国动物疫病预防控制中心。2.区疫控中心每半年报送动物疫病监测分析报告各一次。分别于 6月 30 日和 12 月 30 日前,报送半年和全年情况至市疫
6、控中心。3.区疫控中心严格疫情报告工作,发生非洲猪瘟、口蹄疫、高致病性禽流感等重大动物疫情时,应立即开展紧急监测工作,以快报方式逐级上报。在监测中发现非洲猪瘟、家禽 H5 和 H7 亚型流感、口蹄疫等病原学阳性的,及时将阳性样品逐级送国家兽医参考实验室进行分析。对其他病种,按农业农村部有关规定和相关动物疫病防治技术规范要求,及时上报、送检。区动物疫病预防控制中心在做好监测信息上报的同时,要将监测结果及时反馈给送样单位和相关的采样场点,以便各场点及时掌握畜禽健康状况并采取相应措施。(二)流行病学调查和外来疫病监测结果报送。区动物疫病预防控制中心实验室于 12 月 30 日前,上报一次全年主要动物
7、疫病流行病学调查报告至市疫控中心。发生非洲猪瘟、高致病性禽流感等重大动物疫病时,要立即开展紧急流行病学调查,并将流行病学调查表、现场调查评估报告等信息逐级报送至省动物疫病预防控制中心。-4-五、保障措施 区动物疫病预防控制中心要切实加强对动物疫病监测和流行病学调查工作的组织实施,明确责任,强化监督检查,保质保量完成各项工作任务。要认真做好经费支出执行工作,经费主要用于采样、检测、评估、分析、试剂耗材及仪器设备采购等相关工作,并配合有关部门加强专项经费监督管理。要按照中华人民共和国生物安全法规定,做好兽医实验室生物安全管理工作,规范开展实验活动。附件:1.主要动物疫病监测方案 2.紧急流行病学调
8、查方案 3.主要禽病专项调查方案 -5-附件 1-1:非洲猪瘟监测方案 一、监测目的 掌握非洲猪瘟感染和流行情况,分析病毒遗传变异特征,发现传播风险因素,为根除提供科学依据。二、监测范围 包括养殖场(户)、无害化处理收集点、农贸市场以及备案生猪运输车辆等。三、监测对象 猪,重点是出现疑似非洲猪瘟症状的死亡猪、发病猪,以及与确诊疫情或监测阳性场点有明确流行病学关联的猪群。四、监测时间 根据关于开展全区非洲猪瘟专项监测工作的通知(泰高疫控函20211 号)要求,做好监测工作。五、监测方法(一)被动监测。接到疑似疫情报告后,区动物疫病预防控制中心应及时采样检测,并按照非洲猪瘟疫情应急实施方案规范处置
9、和报告。(二)主动监测。镇(街)畜牧兽医站根据要求,组织做好辖区内猪的临床巡查和采样送检工作,区动物疫病预防控制中心要及时做好样品检测工作。六、监测数量 -6-根据关于开展全区非洲猪瘟专项监测工作的通知(泰高疫控函20211号)要求,确保年度内所有场点和环节采样监测全覆盖。七、检测方法(一)病原学检测。PCR、实时荧光 PCR、核酸等温 PCR(Lamp)方法。(二)血清学检测。竞争 ELISA 或间接 ELISA 方法。八、判定标准(一)监测阳性个体。采用PCR 方法或实时荧光PCR检测方法检测,结果为阳性。(二)确诊阳性个体。监测阳性个体经省动物疫病预防控制中心确诊为阳性。(三)确诊阳性群
10、体。群体内至少检测出1个确诊阳性个体。(四)临床病例。按照非洲猪瘟疫情应急实施方案处置。-7-附件 1-2:动物流感监测方案 一、监测目的 掌握动物流感病毒感染状况,重点监测 H5、H7 亚型流感病毒变异及流行状况,追踪动物流感病毒变异特点与趋势;评估养殖环节家禽免疫抗体水平,掌握群体免疫状况。二、监测对象 鸡、鸭、鹅和其它家禽,高风险区域内的猪,以及高风险区域环境样品。三、监测范围 禽类:商品禽场、散养户、活禽交易市场,候鸟主要栖息地。哺乳动物类:高风险区域内的养猪场(户)。散养户以一个自然村为一个监测采样的流行病学单元。四、监测时间 每半年进行一次集中监测,日常监测由区动物疫病预防控制中心
11、根据实际情况安排。五、监测方式(一)被动监测。任何单位和个人发现病死或不明原因死亡的家禽、野鸟、猪等,应及时向所在镇(街)畜牧兽医站(监督分所)或区动物疫病预防控制中心报告,区动物疫病预防控制中心应及时采样进行监测。(二)主动监测。一是病原监测。采用先抽取场群,再在场群内抽取个体的抽样方式开展监测采样。选择场群时要覆盖商品禽场、散养户、-8-活禽市场,同时兼顾不同禽类养殖场点的数量比例。二是抗体监测。选择场群时要覆盖商品禽场和散养户,同时兼顾不同禽类养殖场点的数量比例。六、监测内容和数量(一)集中监测。H5 和 H7 亚型流感监测相结合。在全区随机选择养殖场(点),每个场(点)至少采集样品 1
12、5 份(血清和拭子样品各15 份),兼顾商品禽场、散养户及活禽市场,兼顾鸡、鸭、鹅比例。10月 25 日前,将市级定点监测样品送至市疫控中心。(二)主动监测。参考场群内个体抗体监测抽样数量表(见附表 1)、场群内个体病原学监测抽样数量表(见附表 2)确定监测数量。(三)监测数量。全年病原学样品监测数不少于 50 份、血清学样品不少于 750 份。七、检测方法(一)病原检测。采集禽咽喉/泄殖腔拭子样品、猪鼻拭子样品,病料以及高风险区域环境样品,采用 RT-PCR 或实时 RT-PCR 方法进行检测。(二)抗体检测。采集血清样品,采用血凝抑制试验(HI)进行 H5、H7 亚型禽流感抗体检测。八、判
13、定标准(一)免疫合格个体。经血凝抑制试验(HI)检测,对灭活疫苗免疫的家禽,免疫 21 天后 HI 抗体效价24为免疫合格。(二)免疫合格群体。对弱毒疫苗免疫的商品代肉雏鸡,第二次免疫 14 天后免疫抗体转阳50%;对灭活疫苗免疫的家禽,免疫合格个体-9-数量占群体总数的 70%(含)以上。(三)监测阳性个体。采用国家推荐的 RT-PCR 或实时荧光 RT-PCR检测方法,结果为阳性。(四)确诊阳性个体。监测阳性个体经省动物疫病预防控制中心实验室确诊,结果为阳性。(五)确诊阳性群体。群体内至少检出 1 个确诊阳性个体。(六)临床病例。按照高致病性禽流感防治技术规范处置。-10-附件 1-3:口
14、蹄疫监测方案 一、监测目的 掌握口蹄疫病原感染分布情况,了解高风险区域和重点环节动物感染情况,跟踪监测病毒变异特点与趋势,查找传播风险因素。评估畜群免疫效果,掌握群体免疫状况。同时,开展猪塞内卡病毒 A 型(Seneca virus A,SVA)监测,评估危害性。二、监测对象 猪、牛、羊等偶蹄类动物。三、监测范围 对猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户等进行监测。四、监测时间 在全区进行春秋两次集中监测,日常监测由区动物疫病预防控制中心根据实际情况安排。五、监测方式(一)被动监测。任何单位和个人发现猪、牛、羊等偶蹄动物或野生偶蹄动物出现水泡、跛行、烂蹄等类似口蹄疫症状,应及时向所
15、在镇(街)畜牧兽医站(监督分所)或区动物疫病预防控制中心报告,区动物疫病预防控制中心应及时采样进行监测。(二)主动监测。一是病原监测。采用先抽取场群,在场群内再抽取个体的抽样方式开展采样监测。选择场群时要考虑猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户的比例。二是抗体监测。选择场-11-群时要综合考虑猪、牛、羊等偶蹄类动物的种畜场、规模饲养场、散养户的比例,以及不同种群动物的年龄和免疫次数的差异。六、监测内容和数量(一)集中监测。结合春、秋防集中行动,在全区随机选择养殖场(点),每个场(点)至少采集样品 15 份(血清和病原学样品各 15 份),兼顾猪(不少于 10 份)和羊的比例。10
16、 月 25 日前,将市级定点监测样品送至市疫控中心。(二)主动监测。参考场群内个体抗体监测抽样数量表(见附表 1)、场群内个体病原学监测抽样数量表(见附表 2)确定监测数量。(三)监测数量。全年病原学样品不少于 50 份,血清学样品监测数不少于 200 份。七、检测方法(一)病原检测。对牛羊食道咽部分泌物(O-P 液)、猪颌下淋巴结或扁桃体,采用 RT-PCR 方法或实时 RT-PCR 方法检测口蹄疫病原。(二)非结构蛋白抗体检测。采用非结构蛋白(NSP)抗体 ELISA方法进行检测。在免疫状况下,对 NSP 抗体检测阳性的,需进一步确认。可重复采样检测 NSP 抗体,根据抗体阳性率变化判断是
17、否感染病毒。具体方法是,在 NSP 首次监测 2-4 周后(期间不能进行免疫)进行二次采样检测(两次采样检测的动物要保持一致)。对 NSP 抗体阳性率等于或低于首次检测结果的,可排除感染。(三)免疫抗体检测。猪免疫 28 天后,其他畜免疫 21 天后,采集血清样品进行免疫效果监测。O 型口蹄疫抗体:液相阻断 ELISA 或正向间接血凝试验,合成肽疫苗采用 VP1 结构蛋白 ELISA 进行检测。A 型口蹄疫抗体(牛羊):液相阻断 ELISA。-12-(四)SVA 检测。血清检测:间接 ELISA 或竞争 ELISA 方法;病原检测:采用实时 RT-PCR 方法,结合病原分离及序列测定。八、判定
18、标准(一)免疫合格个体。液相阻断 ELISA:猪抗体效价26,牛、羊抗体效价27。VP1 结构蛋白抗体 ELISA:抗体效价25。(二)免疫合格群体。免疫合格个体数量占群体总数的 70%(含)以上。(三)可疑阳性个体。免疫家畜非结构蛋白抗体ELISA检测阳性的;未免疫家畜血清抗体检测阳性的。(四)可疑阳性群体。群体内至少检出 1 个可疑阳性个体。(五)监测阳性个体。牛羊的食道-咽部分泌物(O-P 液),猪的颌下淋巴结或扁桃体用 RT-PCR 或荧光 RT-PCR 检测,结果为阳性。(六)确诊阳性个体。监测阳性个体经省动物疫病预防控制中心实验室确诊,结果为阳性。(七)阳性群体。群体内至少检出 1
19、 个确诊阳性个体的。(八)临床病例。按照口蹄疫防治技术规范处置。-13-附件 1-4:布鲁氏菌病监测方案 一、监测目的 掌握牛、羊等易感动物布鲁氏菌病流行状况,了解布鲁氏菌病传播的风险因素。二、监测对象 牛、羊等布鲁氏菌病易感动物。重点选择有流产、死胎的牛、羊及同群畜。三、监测范围 对辖区内牛、羊等易感动物的种畜场、规模饲养场、散养户等场点进行监测。四、监测时间 每半年进行一次血清学监测。发现可疑病例,随时采样监测。五、监测内容和数量 每次对全区所有种用羊(包括羔羊)进行监测;对商品牛、羊、猪等其他易感动物进行抽样监测,抽样监测时每场群(自然村)采样量不少于 30 只。任何单位和个人发现牛羊出
20、现流产、死胎等临床异常情况且诊断为临床病例的,应及时向所在镇(街)畜牧兽医站(监督分所)或区动物疫病预防控制中心报告,区动物疫病预防控制中心应及时采样进行监测,采样时应做好生物安全防护。六、检测方法(一)凝集类试验。血清学检测方法主要包括虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和全乳环状凝集试验(MRT)。-14-(二)ELISA。包括间接 ELISA 和竞争 ELISA,适合高通量检测。(三)其他试验。主要包括补体结合试验(CFT)和荧光偏振试验(FPA)。初筛可采用虎红平板凝集试验(RBT)(GB/T18646),也可采用荧光偏振试验(FPA)和全乳环状试验(MRT)(GB/T1
21、8646)以及间接酶联免疫吸附试验(iELISA)。确诊可选用试管凝集试验(SAT)(GB/T18646)、补体结合试验(CFT)(GB/T18646)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)。(四)病原检测。病原等其他专项监测采用国家标准或OIE推荐的检测方法。七、判定标准(一)患病动物及健康动物个体确定。对于未免疫动物,血清学确诊为阳性的,判定为患病动物;若初筛诊断为阳性的,确诊诊断为阴性的,应在 30 天后重新采样检测,复检结果阳性的判定为患病动物,结果阴性的判定为健康动物。对于免疫动物,在免疫抗体消失后,血清学确诊为阳性的,或病原学检测方法结果为阳性的,判断为患病动物。(二)阳性群体。群
22、体内至少检出 1 个确诊患病动物的场群/群体。(三)临床病例。按照布鲁氏菌病防治技术规范处置。-15-附件 1-5:小反刍兽疫监测方案 一、监测目的 掌握小反刍兽疫病毒的分布范围和羊群免疫状况,科学评估疫情风险,规范开展监测与流行病学调查工作,推动实施小反刍兽疫消灭计划。二、监测对象 山羊、绵羊。三、监测范围 对有山羊、绵羊的种畜场、规模饲养场等进行监测。四、监测时间 每半年进行一次集中监测,日常监测由区动物疫病预防控制中心根据实际情况安排。五、监测方法(一)被动监测。接到疑似疫情报告后,区动物疫病预防控制中心应及时采样检测,规范处置,按规定报告。(二)主动监测。根据省、市监测计划时间安排,主
23、动开展监测工作。六、监测内容和数量(一)集中监测。在全区随机选择1个场(点),每个场点平行采集血清学样品和病原学样品(鼻腔或眼睛拭子)不少于15份。血清样品由区动物疫病预防控制中心监测,病原学样品于10月25日前送至市疫控中心。-16-(二)监测数量。全年血清学样品监测数不少于 100 份。七、检测方法(一)抗体检测。羊免疫 21 天后,采集血清样品进行免疫效果监测。采用竞争 ELISA、阻断 ELISA 方法。(二)病原检测。采集拭子或者组织样品,采用 RT-PCR 或者实时RT-PCR 方法进行检测。八、判定标准(一)免疫合格个体。活疫苗免疫 1-3 个月内,小反刍兽疫 ELISA抗体检测
24、阳性判定为合格。(二)免疫合格群体。群内抗体阳性率70%判定为合格。(三)监测阳性个体。采用国家标准中推荐的 RT-PCR 或实时RT-PCR 检测方法检测,结果为阳性。(四)确诊阳性个体。监测阳性个体经省级动物疫病预防控制机构实验室确诊,结果为阳性。(五)确诊阳性群体。群体内至少检测出1 个确诊阳性个体。(六)临床病例。按照小反刍兽疫防治技术规范处置。附件 1-6:-17-血吸虫病监测方案 一、监测目的 掌握家畜血吸虫病流行状况和分布状况,分析疫情动态、发展趋势及传播因素,及时发现和处置(治疗或淘汰)感染家畜,切实巩固家畜血吸虫病消除工作成果。二、监测对象 牛、羊、猪,重点为放牧牛、羊。没有
25、牛、羊、猪的,监测其他哺乳动物。三、监测范围 口岸街道、刁铺街道、永安洲镇。四、监测时间 5-6 月份开展一次家畜感染情况监测和野粪监测。五、监测内容 口岸街道和永安洲镇牲畜查病数各 30 头。同时,在刁铺街道采集一定数量的野粪进行监测,加强从湖南、湖北、江西、安徽、云南和四川等 6 个疫区省调运牛羊的监测,做好查治数据收集与分析。六、检测方法及判定标准(一)家畜监测。直接采用粪便毛蚴孵化法进行检测,或先用间接血凝方法(或 ELISA 方法、胶体金试纸条)检测,结果为阳性的,用粪便毛蚴孵化法复检。粪便毛蚴孵化法检测为阳性的确诊为阳性畜。(二)野粪监测。收集监测地块内所有新鲜野粪,按每一摊(堆)
26、为一个单位(散在的羊粪收集后每 20 克为一个单位)进行计数。对成-18-形的每一摊野粪称重后采样,其中牛粪每份采集 50 克样品,其他哺乳动物源野粪采集 20 克样品;不足分量的野粪全部采集。用粪便毛蚴孵化法进行检测,阳性者确诊为阳性野粪。对阳性野粪孵化出的毛蚴进行计数,分析主要风险因素。粪便毛蚴孵化法、间接血凝方法、肝脏虫卵毛蚴孵化检查法等检查方法参见中华人民共和国国家标准 家畜日本血吸虫病诊断技术(GB/T 18640-2017),ELISA 法和胶体金试纸条法检查的操作按生产厂家提供的说明书进行。附件 1-7:高致病性猪蓝耳病监测方案 一、监测目的 掌握高致病性猪蓝耳病流行情况,分析病
27、毒遗传变异特征和规律;-19-发现疫病传播风险因素;评估免疫效果,掌握群体免疫状况。二、监测对象 猪。三、监测范围 重点对中小规模饲养场进行监测。四、监测时间 每半年开展一次病原学监测和血清学免疫抗体集中监测。发现可疑病例,随时采样,及时检测。五、监测内容和数量(一)免疫抗体监测。参考 场群内个体抗体监测抽样数量表(见附表 1)确定监测数量。(二)病原监测。对重点区域、重点环节开展病原学监测,参考 场群内个体病原学监测抽样数量表(见附表 2)确定监测数量。(三)临床病例报告。任何单位和个人发现监测对象中出现临床异常情况且诊断为临床病例的,应及时按规定报告。(四)监测数量。全年病原学样品监测数不
28、少于 50 份,血清学样品不少于 200 份。六、检测方法(一)血清学检测。采集血清,采用 ELISA 方法进行检测。(二)病原学检测。活体采集全血或扁桃体,采用 RT-PCR 或实时RT-PCR 方法进行检测。屠宰场可采集猪扁桃体、肺脏、颌下淋巴结样品进行病原检测。七、判定标准(一)免疫合格个体。活疫苗免疫 28 天后,高致病性猪蓝耳病-20-ELISA 抗体检测阳性判定为合格。(二)确诊阳性个体。采用病原学方法检测,排除疫苗免疫阳性,结果为阳性。(三)阳性群体。排除疫苗免疫阳性,群体内至少检出 1 个确诊阳性个体。(四)临床病例。按照高致病性猪蓝耳病防治技术规范处置。-21-附件 1-8:
29、猪瘟监测方案 一、监测目的 掌握猪瘟流行情况,分析病毒遗传变异特征和规律;发现传播风险因素;评估免疫效果,掌握群体免疫状况。二、监测对象 猪。三、监测范围 重点对中小规模饲养场的猪进行监测。四、监测时间 每半年开展一次病原学监测和血清学免疫抗体集中监测。发现可疑病例,随时采样,及时检测。五、监测内容和数量(一)免疫抗体监测。可参考场群内个体抗体监测抽样数量表(见附表 1)确定监测数量。(二)病原监测。对重点区域、重点环节开展病原学监测,可参考场群内个体病原学监测抽样数量表(见附表 2)确定监测数量。(三)临床病例报告。任何单位和个人发现监测对象中出现临床异常情况且诊断为临床病例的,应及时按规定
30、报告。(四)监测数量。全年病原学样品监测数不少于 50 份,血清学样品不少于 200 份。六、检测方法 -22-(一)血清学检测。采集血清,采用抗体阻断 ELISA、抗体间接ELISA 方法进行检测。(二)病原学检测。采集扁桃体或颌下淋巴结,采用 RT-nPCR 或实时 RT-PCR 或免疫荧光抗体试验进行检测,病原学阳性样品及时送国家猪瘟参考实验室进行确认。七、判定标准(一)免疫合格个体。免疫 21 天后,抗体阻断 ELISA 方法和抗体间接 ELISA 方法检测,抗体阳性判定为合格。(二)确诊阳性个体。用病原学检测方法检测,结果为阳性。(三)阳性群体。群体内至少检出 1 个确诊阳性个体。(
31、四)临床病例。按照猪瘟防治技术规范处置。-23-附件 1-9:新城疫监测方案 一、监测目的 掌握新城疫流行情况,分析病毒遗传变异特征和规律;发现传播风险因素;评估免疫效果,掌握群体免疫状况。二、监测对象 鸡、鸭、鹅、鸽和鹌鹑等。三、监测范围 重点对商品禽场、活禽市场的家禽进行监测。四、监测时间 每半年开展一次免疫抗体监测。发现可疑病例,随时采样,及时检测。五、监测内容和数量(一)免疫抗体监测。可参考场群内个体抗体监测抽样数量表(见附表 1)确定监测数量。(二)病原监测。对重点区域、重点环节开展病原学监测,可参考场群内个体病原学监测抽样数量表(见附表 2)确定监测数量。(三)临床病例报告。任何单
32、位和个人发现监测对象中出现临床异常情况且诊断为临床病例的,应及时按规定报告。六、检测方法(一)血清学检测。采集血清,采用血凝抑制试验(HI)进行检测。(二)病原学检测。采集咽喉/泄殖腔拭子样品,采用 RT-PCR 或实-24-时 RT-PCR 方法进行检测。七、判定标准(一)免疫合格个体。免疫 21 天后,抗体效价25判定为合格。(二)确诊阳性个体。用病原学检测方法检测,结果为阳性。(三)阳性群体。群体内至少检出 1 个确诊阳性个体。(四)临床病例。按照鸡新城疫防治技术规范处置。-25-附件 1-10:狂犬病监测方案 一、监测目的 掌握狂犬病感染及分布流行情况,评估流行趋势和流行风险,指导狂犬
33、病的有效防控和消除。二、监测对象 犬、猫及其他易感动物。重点是具有异常攻击行为或不明原因死亡的犬科、猫科、鼬科等狂犬病传播宿主动物和高度疑似死于狂犬病的家畜及野生动物。三、监测范围 重点对农村犬、猫,城镇流浪犬、猫,以及动物医院就诊的犬、猫进行狂犬病监测。四、监测时间 每年开展一次血清学监测,病原学监测全年开展。接到疫情或疑似病例报告后应立即采取措施,采集脑组织样品,送狂犬病参考实验室确诊。五、监测内容和数量(一)免疫学监测。主要是对免疫犬进行抗体合格率抽查。免疫 1个月后采血,全区采集血清样品数量不少于 6 份,于 10 月 25 日前送市级,市级集中送省动物疫病预防控制中心检测。(二)病原
34、学监测。以被动监测为主,狂犬病参考实验室接受送检的疑似狂犬病发病、死亡犬、猫及其他家畜或野生动物的样品。症状表现不充分的疑似狂犬病动物在不适宜扑杀的情况下,可隔离观察10天。-26-所有疑似动物的确诊均需要采集脑组织进行检测。(三)临床病例报告。任何单位和个人发现临床表现异常或攻击行为或死亡的怀疑为狂犬病的动物,均应及时向所在镇(街)畜牧兽医站(监督分所)或区动物疫病预防控制中心报告,区动物疫病预防控制中心应及时采集脑组织样品送狂犬病参考实验室检测确诊。六、检测方法(一)血清学检测。血清抗体用ELISA方法或荧光抗体病毒中和试验(FAVN)进行检测。(二)病原学检测。用吸管法等采集脑组织,或者
35、采集动物整个头部,冷冻(或冷藏)条件下送狂犬病参考实验室进行检测和确诊。脑组织采用直接免疫荧光试验(DFA)进行确诊,也可先用 RT-PCR 或实时RT-PCR 进行检测,阳性样品再采用 DFA 进行确诊。七、判定标准(一)疑似患病动物。狂犬病流行区域哺乳动物具有咬人、攻击、兴奋或沉郁、异嗜等异常行为;狂犬病 RT-PCR 或实时 RT-PCR 检测结果阳性。(二)确诊患病动物。免疫荧光试验(DFA)检测结果为阳性的动物。(三)免疫合格。个体免疫:ELISA 检测判定为阳性或者 FAVN 检测抗体水平0.5 IU/mL 判定为免疫合格。群体免疫:免疫合格率大于 70%为有效免疫覆盖率。-27-
36、附件 1-11:牛结节性皮肤病监测方案 一、监测目的 掌握牛结节性皮肤病感染情况,及时评估疫情风险,规范开展监测与流行病学调查工作,为科学防控提供依据。二、监测对象 黄牛、水牛等家养牛科动物。三、监测范围 全区范围内。四、监测时间 发现可疑病例,随时采样,及时检测。五、监测方法(一)被动监测。接到疑似疫情报告后,区动物疫病预防控制机构应及时采样检测,规范处置,并按规定报告。(二)主动监测。根据监测计划时间安排,做好家养牛的临床巡查和采样检测工作。六、监测数量 发现可疑病例及时采样检测。七、检测方法 参考国家标准牛结节性皮肤病诊断技术(GB/T 39602-2020),采用 PCR、实时荧光 P
37、CR 检测。八、判定标准 -28-(一)监测阳性个体。采用PCR 或实时荧光PCR 检测,结果为阳性。(二)确诊阳性个体。监测阳性个体经省动物疫病预防控制机构确诊为阳性。(三)确诊阳性群体。群体内至少检测出 1 个确诊阳性个体。(四)临床病例处置。按照 牛结节性皮肤病防治技术规范 处置。附件 2:-29-紧急流行病学调查方案 一、调查目的(一)界定疫病发生情况,分析可能扩散范围,提出防控措施建议,提高突发动物疫情应急处置工作的针对性、有效性;(二)探寻病因及风险因素,分析疫情发展规律,预测疫病暴发或流行趋势,评估控制措施效果,提出政策措施建议。二、调查范围 怀疑或确认发生以下情况时,根据本方案
38、的要求启动紧急流行病学调查工作,并及时填报紧急疫情调查表:(一)非洲猪瘟、高致病性禽流感、口蹄疫、小反刍兽疫、高致病性猪蓝耳病、炭疽、狂犬病。(二)猪瘟、新城疫、布鲁氏菌病、结核病等主要动物疫病发病率或流行特征出现异常变化。(三)疯牛病、痒病、裂谷热等外来动物疫病。(四)牛瘟、牛肺疫等已消灭疫病再次发生。(五)较短时间内出现导致较大数量动物发病或死亡,且蔓延较快疫病,或怀疑为新发病。(六)其他需要开展紧急流行病学调查的情况。三、工作程序(一)区动物疫病预防控制中心接到疑似紧急疫情报告后,应立即核实信息,进行初步调查并按规定逐级报告疫情。(二)现场调查人员首先进一步核实情况,参照相应紧急流行病学
39、-30-调查表,采集有关信息,填写调查表。(三)现场调查人员应根据调查获取的信息,描述动物疫情现状(空间、时间和群间分布等),分析疫病来源,判断疫情发展趋势,提出控制措施建议,形成调查评估报告。怀疑疫情扩散时,应在高风险地区开展追踪调查。(四)现场调查人员形成的调查评估报告及其结论逐级报省级专家组审核。必要时,省级专家组报请中国动物卫生与流行病学中心,派出专家组开展现场流行病学调查,并组织开展经济损失和防控措施评估等工作。四、工作要求(一)省专家组对现场调查人员形成的调查评估报告及其结论进行审核,审核意见作为重大动物疫情封锁和解除封锁的重要依据。(二)疫情解除封锁前,省动物疫病预防控制中心将紧
40、急流行病学调查表、现场调查评估报告及省专家组的审核意见报农业农村部畜牧兽医局,并抄送中国动物卫生与流行病学中心备案。(三)区动物疫病预防控制中心要明确专人负责动物流行病学调查表填报工作。附件 3:主要禽病专项调查方案 -31-一、调查目的和范围 了解新城疫、禽流感和传染性支气管炎等主要禽群疫病的分布、流行现状、发展趋势和传播风险,掌握病原流行和变异情况,提出疫病动态预警及防控措施建议。二、调查方法与内容 于 911 月开展专项调查。具体采样时间、相关采样和调查要求以省级通知为准。三、承担单位 区动物疫病预防控制中心协助中国动物卫生与流行病学中心和省动物疫病预防控制中心进行样品采集和现场调查。-
41、32-附表 1:场群内个体抗体监测抽样数量表 场/群存栏数(头只)抽样数量(头只)可接受误差 5%6%7%8%9%10%50 37 33 30 26 24 21 100 59 49 42 36 30 26 150 72 59 48 40 34 29 200 82 65 53 43 36 30 250 90 70 56 45 37 31 300 95 73 58 46 38 32 350 100 76 59 47 39 32 400 103 78 60 48 39 32 450 106 80 61 49 39 33 500 109 81 62 49 40 33 550 111 82 63 50
42、40 33 600 113 83 64 50 40 33 650 115 84 64 50 41 33 700 116 85 65 51 41 33 750 117 86 65 51 41 34 00 118 86 65 51 41 34 850 119 87 66 51 41 34 900 120 87 66 51 41 34 950 121 88 66 52 41 34 1000 122 88 66 52 41 34 1100 123 89 67 52 42 34 1200 125 89 67 52 42 34 1300 125 90 67 52 42 34 1400 126 90 68
43、53 42 34 1500 127 91 68 53 42 34 1600 128 91 68 53 42 34 1700 128 91 68 53 42 34 1800 129 92 68 53 42 34 1900 129 92 69 53 42 34 2000 130 92 69 53 42 34 注:按照预期抗体合格率 90%,95%置信水平,不同可接受误差条件下、不同规模抽样数量。-33-附表 2:场群内个体病原学监测抽样数量表 场/群存栏数(头只)抽样数量(头只)可接受误差 1%2%3%4%5%50 49 46 41 35 30 100 95 83 67 54 43 150 139
44、 113 87 65 50 200 181 140 101 73 54 250 220 162 112 79 57 300 258 181 121 83 59 350 294 199 129 87 61 400 329 214 135 89 62 450 361 227 140 91 63 500 393 239 145 93 64 550 423 250 149 95 65 600 452 260 152 96 66 650 480 269 155 98 66 700 506 277 158 99 67 750 532 284 160 99 67 800 557 291 162 100 67
45、 850 580 297 164 101 68 900 603 303 166 102 68 950 625 309 168 102 68 1000 646 314 169 103 69 1100 687 323 172 104 69 1200 724 331 174 105 69 1300 760 338 176 105 70 1400 793 345 178 106 70 1500 824 350 179 106 70 1600 853 355 180 107 70 1700 881 360 182 107 70 1800 907 364 183 108 71 1900 931 368 184 108 71 2000 955 372 185 108 71 注:预期病原学阳性率5%,95%置信水平、100%试验敏感性条件下,不同可接受误差条件下,不同规模抽样数量。-34-