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1、 .下载可编辑.配制溶液的一般实验步骤 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例子：举例 1：配置 0.05mol/L，400mL NaOH 溶液的步骤：要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有 400 毫升的容量瓶，则选用 500 毫升的容量瓶。1.计算需要氢氧化钠的质量：0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克 2.称 1.000 克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500 毫升容量瓶里，分 3 次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到 0.05mol/L 的氢氧化钠溶液。如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量 4
2、00 毫升，称的时候只要称 0.8 克就可以了。举例 2：配置 1.5mol/L 的稀硫酸 200mL 步骤：第 1 步：计算：根据 C1V1=C2V2，计算需要浓硫酸的体积；第 2 步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第 3 步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第 4 步：转移,待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200mL 容量瓶中；第 5 步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，.下载可编辑.至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中；第 6 步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容；第 7 步：摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降也不可再加
3、水定容；第 8 步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例3：配制 500mL，0.1mol/L 碳酸钠溶液步骤及注意事项 所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤：第一步：计算：所需碳酸钠的质量=0.5*0.1*106=5.3 克；第二步：称量：在天平上称量 5.3克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中；第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入 500mL容量瓶中；第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯 23 次，并倒入容量瓶中；第六步：定容：倒水至刻度线 12cm 处改用胶头滴管滴到与凹液面平直；第七步
4、：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀；第八步：装瓶、贴签；误差分析：固体药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了；未洗涤烧杯和玻璃棒；用待配液润洗了容量瓶；定容时水加多了或加少了；定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓 .下载可编辑.度减小。市售盐酸密度 1.19，质量分数 36%38%以 37%计算：步骤：1.计算：假若需要 2mol/L 的硫酸 100mL，则需37%浓硫酸 16.6mL；计算过程如下：假设盐酸 VmL：（0.1L*2mol/L*
5、36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考虑到量筒的精确度 0.1mL，故取 16.6mL 即可。2.量取：16.6mL浓硫酸；3.溶解：把 16.6mL 浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌。4.转移：待溶液冷却后，将溶液沿玻璃棒倒入 100 毫升的容量瓶中。5.洗涤：再用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒 2-3 次，并将全部洗液移入容量瓶中。6.定容：向容量瓶内加蒸馏水，当液面接近刻度线 1-2 厘米处时，改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。7.摇匀：塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均匀，此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。完成配制过程
6、容量瓶的使用六忌：1.忌用容量瓶进行溶解（体积不准确）2.忌直接往容量瓶倒液（洒到外面）3.忌加水超过刻度线（浓度偏低）4.忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高）5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）6.忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）1 mol/L 的氢氧化钠溶液 250mL，完成下列步骤：用天平称取氢氧化钠固体/克。将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸馏水将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入 250mL 的容量瓶中。用少量蒸馏水冲洗 23 次，.下载可编辑.将冲洗液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会使溶液的浓度偏低。向容量瓶内加水至刻度线 12cm
7、 时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，若加水超过刻度线，会造成溶液浓度偏低应该重新配制。最后盖好瓶盖，摇匀，将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。常用贮液与溶液 1mol/L 亚精胺（Spermidine）：溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积为 10mL。分装成小份贮存于-20。1mol/L精胺（Spermine）：溶解 3.48g 精胺于足量的水中，使终体积为 10mL。分装成小份贮存于-20。10mol/L 乙酸胺（ammoniumacetate）：将 77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至 1L 后，用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。10mg/mL 牛血清蛋
8、白(BSA）：加 100mg 的牛血清蛋白（组分 V 或分子生物学试剂级，无 DNA 酶）于 9.5mL 水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。1mol/L 二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 32.4mL 水，分成小份贮存于-20，或转移 100mg 的二硫苏糖醇 至微量离心管，加 0.65mL 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。8mol/L 乙酸钾（potassiumacetate）：溶解 78.5g 乙酸钾于足量的水中，加水定容到
9、100mL。1mol/L 氯化钾（KCl）：.下载可编辑.溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100mL。3mol/L乙酸钠（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90mL水中，用冰乙酸调溶液的 pH 至 5.2，再加水定容到 100mL。0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L），混合后形成 EDTA 的三钠盐。或称取 186.1g的 Na2EDTA2H2O 和 20g 的 NaOH，并溶于水中，定容至 1L。1mol/L HEPES：将 23.8gHEPES 溶于约 90mL 的水中，用 NaOH调 pH（
10、6.88.2），然后用水定容至 100ml。1mol/L HCl：加 8.6ml 的浓盐酸至 91.4ml 的水中。25mg/ml IPGT：溶解250mg 的 IPGT（异丙基硫代-D-半乳糖苷）于 10ml 水中，分成小份贮存于-20。1mol/LMgCl2:溶解 20.3g MgCl2 6H2O 于足量的水中，定容到 100mL。100mmol/L PMSF：溶解 174mg 的 PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到 10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20。20mg/mL 蛋白酶 K（proteinase K）：将 200mg 的蛋白酶 L 加入到 9.5mL
11、水中，轻轻摇动，直至蛋白酶 K 完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到 10ml，然后分装成小份贮存于-20。10mg/mL R-nase（无 D-Nase）（D-NasefreeR-Nase）：溶解10mg 的胰蛋白 RNA 酶于 1mL 的 10mmol/L 的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸 15min，使 DNA 酶失活。用1mol/L 的 TrisHCl 调 pH 至 7.5，于-20贮存。（配制过程中要戴手套）5mol/L 氯化钠（NaCl）：溶解 29.2g 氯化钠 .下载可编辑.于足量的水中，定容至 100mL。10N 氢氧化钠（NaOH）：溶解 400g 氢氧化钠
12、颗粒于约 0.9L 水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L。10SDS（十二烷基硫酸钠）：称取 100gSDS 慢慢转移到约含 0.9L 的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L。2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解 36.4g 山梨（糖）醇于足量水中使终体积为 100mL。100三氯乙酸（TCA）：在装有 500gTCA 的试剂瓶中加入 100mL 水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）2.5Xgal（5-溴-4-氯-3-吲哚-半乳糖苷）：溶解 25mg 的 Xgal于 1ml 的二甲基甲酰胺（DMF），用铝箔包裹装液管，贮存于-20。100Denhardt 试剂（Denhardtsregent）成分及终浓度配制 100mL 溶液各成分用量 2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分 V）水 2g 2g 2g 加水至总体积为 100mL