溶血对生化检验结果的影响精选课件.ppt

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1、关于溶血对生化检验关于溶血对生化检验结果的影响结果的影响第一页,本课件共有29页一、溶血的定义一、溶血的定义溶溶血血是是红红细细胞胞破破坏坏,红红细细胞胞的的一一些些组组分分释释放放进进入入血血清清或或血血浆浆,导导致致实实验验样样品品出出现现特特有有的的红红色色增增加加。很很多多因因素素都都可可以以使使红红细细胞胞破破坏坏,发发生生溶溶血血,从从而而干干扰扰监监测测,使使检检验验结结果果失失去去真真实实性性和和准准确确性性,影响疾病的诊断和治疗。影响疾病的诊断和治疗。第二页,本课件共有29页溶溶血血是是临临床床生生化化检检验验中中最最常常见见的的一一种种干干扰扰和和影响因素。影响因素。溶溶血

2、血后后显显著著增增高高的的有有ASTAST、ALTALT、LDHLDH、K+K+、TBILTBIL、TPTP、ALBALB等;等;溶血后溶血后显著降低显著降低的项目有的项目有GLUGLU、CRCR等。等。第三页,本课件共有29页(一)溶血对肝功能测定的影响(一)溶血对肝功能测定的影响1.1.天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶(ASTAST)溶溶血血造造成成ASTAST升升高高可可能能是是由由以以下下两两个个方方面面的的原因引起原因引起(1)(1)人人类类红红细细胞胞中中ASTAST活活性性约约为为血血清清中中的的4040倍倍,当当标标本本溶溶血血时时红红细细胞胞破破裂裂后后释释放放AST

3、AST,势势必必引引起起血血清清ASTAST活活性性的的升升高高从从而而使使溶溶血血标标本本的的结结果果明明显显高高于于未溶血标本。未溶血标本。(2)(2)溶溶血血后后血血清清颜颜色色加加深深,致致使使测测得得的的吸吸光度值增高。光度值增高。第四页,本课件共有29页2 2、谷氨酸、谷氨酸-丙酮酸转氨酶(丙酮酸转氨酶(ALTALT)红红细细胞胞中中ALTALT活活性性约约是是血血清清中中7 71515倍倍。严严重重溶溶血血(HbHb约约6.5g/L6.5g/L)时时,可可使使血血清清ALTALT由由20U/L20U/L增增高高到到26.5U/L26.5U/L(增增加加约约27%27%)。因因此此

4、溶溶血血后后ALTALT含含量量测测定定的的增增高高主主要要来来源源于于细胞内细胞内ALTALT的大量释放。的大量释放。可见与可见与ASTAST相比,相比,ALTALT受溶血影响轻些。受溶血影响轻些。第五页,本课件共有29页3 3、乳酸脱氢酶(、乳酸脱氢酶(LDHLDH)红红细细胞胞和和血血小小板板中中含含有有丰丰富富的的LDHLDH,红红细细胞胞中中LDHLDH的的含含量量是是血血清清的的160160200200倍倍,故故受受溶溶血血影影响响最最大大。在在测测定定环环节节上上都都有有可可能能发发生生不不同同程程度度的的血血小小板板破破坏坏,而影响而影响LDHLDH测定,使其测定结果偏高。测定

5、,使其测定结果偏高。第六页,本课件共有29页4 4、谷氨酰转肽酶(谷氨酰转肽酶(GGTGGT)由由于于红红细细胞胞内内GGTGGT含含量量很很低低,轻轻微微溶溶血血对对其其测测定定结结果果影影响响不不大大,但但重重度度溶血则有影响溶血则有影响第七页,本课件共有29页5 5、总蛋白(总蛋白(TPTP)总总蛋蛋白白的的测测定定通通常常选选用用双双缩缩脲脲法法,主主波波长长540nm,540nm,而而血血红红蛋蛋白白在在555nm555nm有有吸吸收收峰峰,试试验验表表明明如如果果溶溶血血标标本本中中HbHb 0.5g0.5gL L时时无无干干扰扰;而而高高HbHb,会会使使结结果果偏偏高高,可以做

6、样品空白来消除影响。可以做样品空白来消除影响。第八页,本课件共有29页6 6、总胆红素(、总胆红素(TBILTBIL)重氮法测定重氮法测定TBILTBIL,最后生成红紫色的,最后生成红紫色的偶氮胆红素,主要在波长为偶氮胆红素,主要在波长为540nm540nm560nm560nm处有光吸收。而处有光吸收。而HbHb在波长在波长540nm540nm550nm550nm处处有光吸收,恰与偶氮胆红素的比色波长有光吸收,恰与偶氮胆红素的比色波长相近。因此溶血后细胞破裂时大量相近。因此溶血后细胞破裂时大量HbHb进进入血清入血清,势必造成势必造成TBILTBIL测定值的升高测定值的升高,是是TBILTBI

7、L测定的正向干扰因素。测定的正向干扰因素。第九页,本课件共有29页 此外,由于此外,由于HbHb重氮试剂反应形成的产物重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆红素,溶血对重氮法测定胆红可破坏偶氮胆红素,溶血对重氮法测定胆红素同时存在负向干扰,使测定结果偏低,但素同时存在负向干扰,使测定结果偏低,但该作用较轻微,因此溶血后由于该作用较轻微,因此溶血后由于HbHb对测定结对测定结果的干扰,果的干扰,TBILTBIL的测定结果往往偏高。的测定结果往往偏高。第十页,本课件共有29页(二)溶血对血脂测定的影响(二)溶血对血脂测定的影响1 1、总胆固醇(、总胆固醇(TCTC)试试验验表表明明如如果果溶溶血血标标

8、本本中中HbHb1.5g1.5gL L无无干干扰扰;而而高高浓浓度度时时因因HbHb的的固有颜色固有颜色干扰,会使结果偏高。干扰,会使结果偏高。第十一页,本课件共有29页2 2、甘油三酯(甘油三酯(TGTG)除除去去上上述述如如总总胆胆固固醇醇影影响响因因素素外外,目目前前所所用用甘甘油油磷磷酸酸氧氧化化酶酶过过氧氧化化物物酶酶法法和和乙乙酰酰丙丙醇醇显显色色法法都都以以测测量量甘甘油油为为基基础础,而而红红细细胞胞膜膜磷磷脂脂可可被被磷磷脂脂酶酶作作用用,产产生生游离甘油,所以溶血后测定结果偏高。游离甘油,所以溶血后测定结果偏高。第十二页,本课件共有29页3 3、载脂蛋白载脂蛋白A(APOA

9、)A(APOA)及载脂蛋及载脂蛋(APOB)(APOB)免疫透射比浊法使用最广泛,以抗免疫透射比浊法使用最广泛,以抗原抗体为基础,血红蛋白可使测定结果原抗体为基础,血红蛋白可使测定结果升高,故标本溶血后测定结果偏高。升高,故标本溶血后测定结果偏高。第十三页,本课件共有29页(三)溶血对肾功能测定的影响(三)溶血对肾功能测定的影响1 1、尿素(尿素(UREA)UREA)无无论论是是二二乙乙酰酰肟肟法法还还是是脲脲酶酶法法,溶溶血血均均可可导导致致光光谱谱蓝蓝色色部部分分吸吸光光度度值值升高对结果都有干扰,导致结果偏高。升高对结果都有干扰,导致结果偏高。第十四页,本课件共有29页2 2、尿酸、尿酸

10、(UA)(UA)试试 验验 表表 明明 如如 果果 溶溶 血血 标标 本本 中中HbHb1g1gL L会会干干扰扰;是是因因为为测测定定波波长长546mm546mm时时因因HbHb固固有有颜颜色色潜潜在在影影响响使使测测定定结结果偏高果偏高(比色法比色法)。第十五页,本课件共有29页3 3、肌酐(、肌酐(CreCre)苦味酸法测定苦味酸法测定CreCre的特异性较差,的特异性较差,易受其它还原性物质影响,主要是维生易受其它还原性物质影响,主要是维生素素C C、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰。假、酮体、丙酮酸等假肌酐干扰。假肌酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应,肌酐物质亦可与苦味酸形成颜色反应,导致测定值

11、发生偏差。这种假肌酐物质导致测定值发生偏差。这种假肌酐物质红细胞中最多,血清中较少,故溶血后红细胞中最多,血清中较少,故溶血后红细胞中假肌酐物质的释放是造成测定红细胞中假肌酐物质的释放是造成测定值发生偏差的主要原因。值发生偏差的主要原因。第十六页,本课件共有29页 溶血释放出的物质导致溶血释放出的物质导致JaffeJaffe反应反应 而致测定结果的升高。而致测定结果的升高。JaffeJaffe反应指血浆反应指血浆中的肌酐与碱性苦味酸盐反应,生成黄红中的肌酐与碱性苦味酸盐反应,生成黄红色的苦味酸肌酐复合物的反应。色的苦味酸肌酐复合物的反应。第十七页,本课件共有29页(四)溶血对电解质测定的影响(

12、四)溶血对电解质测定的影响1 1、钾(、钾(K K+)细细胞胞内内液液的的主主要要阳阳离离子子,约约9898的的钾钾存存于于细细胞胞内内,红红细细胞胞内内钾钾浓浓度度约约为为 105mmol/L105mmol/L,而而 血血 清清 中中 仅仅 有有3.5mmol/L3.5mmol/L5.4mmol/L5.4mmol/L,红红细细胞胞中中钾钾的的含含量量比比血血清清中中高高2323倍倍。因因此此溶溶血血造造成成血血清清钾钾明明显显升升高高,增增高高主主要来源于红细胞内钾的大量释放。要来源于红细胞内钾的大量释放。第十八页,本课件共有29页 有有报报道道表表明明血血清清游游离离血血红红蛋蛋白白在在2

13、.52.52.8g/L2.8g/L时时血血清清钾钾增增高高14%14%16%16%,血血清清游游离离血血红红蛋蛋白白达达6.6g/L6.6g/L时时血血清清钾钾增增高高可可达达41%41%,所所以以应应在在样样品品采采集集后后1h1h内内应应将将红红细细胞胞与与血血清清分分离离。并并且且在在分分析析血血清清钾钾的的结结果果时时应应引引起起高高度度注意。注意。第十九页,本课件共有29页2 2、氯(、氯(CLCL-)血浆中氯约为血浆中氯约为103mmol/L103mmol/L,红细,红细胞中氯约为胞中氯约为4954mmol/L4954mmol/L。溶血会导。溶血会导致细胞内的氯离子转移到血清中,从

14、致细胞内的氯离子转移到血清中,从而引起了血清氯离子测定值的升高而引起了血清氯离子测定值的升高第二十页,本课件共有29页3 3、磷(、磷(P P)实验表明如果溶血标本中实验表明如果溶血标本中HbHb1g/L1g/L影响很小,而在影响很小,而在HbHb等于等于2.8g2.8gL L时影响较大,所以应在采血后时影响较大,所以应在采血后30min30min内分离血细胞,否则会因磷酸酯内分离血细胞,否则会因磷酸酯从从RBCRBC中释放而会使结果偏高。中释放而会使结果偏高。第二十一页,本课件共有29页(五)溶血对葡萄糖测定的影响(五)溶血对葡萄糖测定的影响n葡萄糖葡萄糖(GLU)(GLU)葡葡萄萄糖糖氧氧

15、化化酶酶法法测测定定GLUGLU的的特特异异性性较较强强,干干扰扰物物较较少少,但但过过氧氧化化氢氢酶酶易易受受到到其其它它物物质质的的影影响响,如如维维生生素素C C、谷谷胱胱苷苷肽肽均均因因能能竞竞争争H H2 2O O2 2而而导导致致负负偏偏差差,样样品品中中某某些些强强的的酶酶会会促促使使GLUGLU降降解解而而导导致致测测定定值值明明显显下下降降的的。如如果果在在血血清清或或血血浆浆加加入入NaFNaF、KFKF作作为为酵酵解解抑抑制制剂剂样样品品收收集集后后立立即去蛋白时,溶血样品也可以用。即去蛋白时,溶血样品也可以用。第二十二页,本课件共有29页(六)溶血对心肌酶谱测定的影响(

16、六)溶血对心肌酶谱测定的影响 由于由于LDH LDH、HBDHHBDH在红细胞内的含量在红细胞内的含量皆明显高于胞外,故溶血后结果都升高,皆明显高于胞外,故溶血后结果都升高,虽然红细胞中不含虽然红细胞中不含CK CK,但含有大量的,但含有大量的腺苷酸激酶腺苷酸激酶(AK)(AK),可干扰测定,可干扰测定CK CK 的偶的偶联法的反应体系,人为地引起联法的反应体系,人为地引起CKCK结果的结果的升高。升高。第二十三页,本课件共有29页三、标本溶血的原因三、标本溶血的原因1 1、环环境境温温度度变变化化,气气温温较较低低时时血血清清不不易易分分离离,标标本本需需经经多多次次离离心心,离离心心后后容

17、容易易出现溶血现象。出现溶血现象。2 2、标标本本运运送送过过程程中中导导致致碰碰撞撞,从从而而使使离离心后也会出现溶血现象。心后也会出现溶血现象。3 3、采采血血量量不不足足,相相对对低低渗渗抗抗凝凝导导致致溶溶血。血。第二十四页,本课件共有29页4 4、特特殊殊人人群群如如肥肥胖胖者者、小小孩孩等等血血管管不不易易找找到到或或太太细细导导致致抽抽血血时时多多次次操操作作或或压压迫时间过长也会引起溶血现象。迫时间过长也会引起溶血现象。5 5、针针头头过过细细或或抽抽血血速速度度过过快快,负负压压太大,红细胞通过针尖时破坏而溶血。太大,红细胞通过针尖时破坏而溶血。第二十五页,本课件共有29页四

18、、溶血标本的处理四、溶血标本的处理1 1、主主动动与与临临床床联联系系,结结合合临临床床首首先先排排除除体体内内溶溶血血的的可可能能,若若不不是是体体内内溶溶血血,建建议议重重新新采采取取标标本本,否否则则应应在在检检验验报报告告单单上上注注明明“标标本本溶溶血血”,以以提提醒醒临临床床医生注意医生注意.2 2、利利用用溶溶血血指指数数变变化化值值,根根据据各各项项目目的的回回归归方方程程,对对易易受受溶溶血血影影响响的的ASTAST、CKCK、CK-MBCK-MB、LDH,LDH,K K+的的测测定定结结果果进进行行部部分分纠纠正正,尤尤其其对对轻轻中中度度溶溶血血效效果果较较好好,但对重度

19、溶血标本则应重新复查。但对重度溶血标本则应重新复查。第二十六页,本课件共有29页3 3、从从方方法法学学上上克克服服或或减减少少溶溶血血的的干干扰扰,如如通通过过设设置置样样品品空空白白或或改改用用双双波波长长比比色色、导导数数分分光光光光度度法法和和动动力力学学方方法法,对对参参与与分分析析法法化化学学反反应应的的溶血干扰,改进试剂组配溶血干扰,改进试剂组配第二十七页,本课件共有29页五、如何避免溶血五、如何避免溶血1 1、掌握采集血液标本的正确方法、掌握采集血液标本的正确方法2 2、颠颠倒倒混混匀匀采采血血管管时时动动作作应应轻轻柔柔,不要过分振荡。不要过分振荡。3 3、妥妥善善保保存存标标本本,血血液液标标本本不不可可存存放放于于冰冰箱箱冷冷冻冻室室,避避免免融融化化后后引引起起溶溶血。血。第二十八页,本课件共有29页感谢大家观看第二十九页,本课件共有29页

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