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1、1 1、学习低温诱导植物染色体数目加倍的、学习低温诱导植物染色体数目加倍的 方法方法2 2、理解低温诱导植物细胞染色体数目加、理解低温诱导植物细胞染色体数目加 倍的作用机制倍的作用机制一一.实验目的实验目的 低温低温和秋水仙素相似,和秋水仙素相似,处理植物分生组织细胞,能处理植物分生组织细胞,能够够抑制纺锤体的形成抑制纺锤体的形成,导致,导致分裂后期染色体不能移向两分裂后期染色体不能移向两极,细胞加大而不分裂,着极,细胞加大而不分裂,着丝点分裂后的染色体仍在一丝点分裂后的染色体仍在一个细胞中,个细胞中,使细胞中的染色使细胞中的染色体数目加倍体数目加倍。二二.实验原理实验原理选怎样的材料进行该实
2、验?选怎样的材料进行该实验?对材料要进行怎样的处理?对材料要进行怎样的处理?思考?思考?三三.实验材料用具实验材料用具培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜,载玻片、盖玻片、冰箱,无水酒精,显微镜,载玻片、盖玻片、冰箱,无水酒精,冰醋酸,体积分数为冰醋酸,体积分数为1515的盐酸溶液,体积的盐酸溶液,体积分数为分数为9595的酒精溶液,改良苯酚品红染液的酒精溶液,改良苯酚品红染液注意:注意:盐酸有刺激性和腐蚀性,盐酸有刺激性和腐蚀性,应小心使用,避免与皮肤和眼应小心使用,避免与皮肤和眼睛接触。睛接触。实验用具实验用具一)根尖的培养一)根尖的培养 把洋
3、葱放在把洋葱放在盛满水的广口瓶上,让它的底盛满水的广口瓶上,让它的底部接触瓶内的水面,部接触瓶内的水面,室温培养室温培养3-5d3-5d。四四四四.实验过程实验过程实验过程实验过程二)低温诱导二)低温诱导 当根长到当根长到lcmlcm时,把数个装置连同时,把数个装置连同 材料分成材料分成3 3份:份:第一份放入冰箱内第一份放入冰箱内00低温下培养低温下培养 第二份放入冰箱内第二份放入冰箱内44低温下培养低温下培养 最后一份仍留在最后一份仍留在2525下培养下培养 各处理各处理36h36h三三)取材、固定根尖取材、固定根尖 剪取以上剪取以上3 3种处理的根尖,每个种处理的根尖,每个根尖为根尖为0
4、.51cm0.51cm,分别放入卡诺氏,分别放入卡诺氏固定液中浸泡固定液中浸泡151520min20min,然后用体,然后用体积分数积分数9595酒精冲洗酒精冲洗2 2次,贴好标签次,贴好标签卡诺氏固定液作用是什么?卡诺氏固定液作用是什么?杀死细胞,固定根尖形态,维持杀死细胞,固定根尖形态,维持染色体结构的完整性,使细胞分染色体结构的完整性,使细胞分裂固定在某一个时期。裂固定在某一个时期。四)制作装片四)制作装片取固定好的根尖,依次进行:取固定好的根尖,依次进行:1.1.解离:解离:滴加滴加3-43-4滴解离液进行滴解离液进行3-5min3-5min的解离的解离2.2.漂洗:漂洗:用清水在载玻
5、片上漂洗用清水在载玻片上漂洗5 5次,约次,约10min10min3.3.染色:染色:滴加滴加3-43-4滴改良苯酚品红染液进行滴改良苯酚品红染液进行3-5min3-5min4.4.制片:制片:加一滴清水在根尖上,盖上盖玻片加一滴清水在根尖上,盖上盖玻片注:染色时间注:染色时间要严格控制,不足时染色体要严格控制,不足时染色体看不清,染色过度,染色体一团糟,无法看不清,染色过度,染色体一团糟,无法分辨分辨五)观察装片五)观察装片 先先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相,用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相,再再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜,使物像清晰,仔细观察,辨认哪些镜,使物像清晰,仔细观察,辨认哪些细胞发生染色体数目变化细胞发生染色体数目变化设计实验表格:设计实验表格:五五.实验结果实验结果 1.1.体积分数为体积分数为15%15%的盐酸溶液在本实的盐酸溶液在本实验中起什么作用?体积分数为验中起什么作用?体积分数为95%95%的的酒精又起什么作用?酒精又起什么作用?2.2.秋水仙素与低温诱导染色体数目加秋水仙素与低温诱导染色体数目加倍,这两种方法在原理上有什么倍,这两种方法在原理上有什么 异异同?同?讨论:讨论: