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1、关于人感染HN禽流感病毒培训第一页，本课件共有30页H7N9禽流感病毒介绍第二页，本课件共有30页病原学特征p禽流感病毒属正粘病毒科p流感病毒按照病毒核蛋白（NP）和基质蛋白（MP）的差异可以分成甲、乙、丙型流感病毒p甲型流感根据病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的差异可以分成不同的亚型，目前可分为16个H亚型（H1H16）和9个N亚型（N1N9）。p禽甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3，此次报道的为H7N9禽流感病毒。该病毒为新型重配病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒。第三页，本
2、课件共有30页病原学特征p病毒基因组结构 甲、乙型病毒分为8节段 丙型病毒分为7个节段（缺少编码NA的节段）p单链、负链RNAp单纯的病毒RNA不具感染性第四页，本课件共有30页PB2PB1HANPNAMPNSPA6个内部片段来源于H9N2p最新的研究表明，该病毒可能是uH7N3（鸭）uH7N9（野禽）uH9N2u中国科学院研究显示，H7N9禽流感病毒基因来自于东亚地区野鸟和中国上海、浙江、江苏鸡群的基因重配。病毒基因组特征第五页，本课件共有30页理化特征p禽流感病毒普遍对热敏感，对低温抵抗力较强，65加热30分钟或煮沸（100）2分钟以上可灭活。病毒在较低温度粪便中可存活1周，在4水中可存活
3、1个月，对酸性环境有一定抵抗力，在pH4.0的条件下也具有一定的存活能力。在有甘油存在的情况下可保持活力1年以上。第六页，本课件共有30页人感染H7N9禽流感病毒标本采集运输及实验室检测第七页，本课件共有30页临床样本的选择p采样对象：不明原因肺炎、人禽流感待查病例 p最佳采集时间：发病后3天内，一般不超过7天p要有医院专家组的会诊记录第八页，本课件共有30页病例定义p不明原因肺炎病例应同时具备以下4条，不能明确诊断为其它疾病的肺炎病例：u发热（腋温38）；u具有肺炎的影像学特征；u发病早期白细胞总数降低或正常、淋巴细胞分类计数减少；u经规范抗菌药物治疗35天p监测病例（同时具备以下4项）：u
4、发热(腋下体温38)u具有肺炎的影像学特征u发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少u不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎 第九页，本课件共有30页病例定义p疑似病例：u符合临床症状及血常规/生化及胸部影像学特征u甲型流感病毒通用引物阳性并排除季节性流感u可以有流行病学接触史 p确诊病例：u符合疑似病例诊断标准u呼吸道标本中分离出H7N9禽流感病毒u呼吸道标本中H7N9禽流感病毒核酸检测阳性u动态检测双份血清H7N9禽流感病毒特异性抗体水平呈4倍或以上升高 第十页，本课件共有30页标本类型p上呼吸道标本u咽拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液等p下呼吸道标本u气管吸取
5、物、肺洗液、肺组织标本等p血清标本u急性期血清：发病7天内，尽量采集u恢复期血清：间隔2-4周的p尸检组织标本u肺组织、气管、支气管组织等第十一页，本课件共有30页采样液要求p常用的采样液有：普通肉汤（只用于鸡胚，对细胞有毒性），PH 7.4-7.6的Hanks液，Eagels培养液或水解乳蛋白溶液或不加抗菌素的生理盐水（漱口液）。u为防止采样液生长细菌和真菌，在采样液中需加入抗菌素，加入庆大霉素（终浓度0.1mg/ml可高至0.5mg/ml）、抗真菌药物（终浓度2ug/ml）。加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4，配制好的采样液，分装每个采样管3-4ml，-20冻存。p庆大霉素:80mg（万
6、单位）2ml 第十二页，本课件共有30页EagelsEagels基础培养基基础培养基基础培养基基础培养基第十三页，本课件共有30页咽拭子咽拭子 用灭菌棉签（最好用塑料柄、尼龙拭子，因为木头柄棉拭子会抑制PCR实验）擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签头部浸入3-4ml采集液中，尾部弃去第十四页，本课件共有30页第十五页，本课件共有30页采咽拭子的器材和容器采咽拭子的器材和容器第十六页，本课件共有30页第十七页，本课件共有30页标本采集要求p同时采集u呼吸道标本：34mlu血清标本：12mlp尽量采集u病例发病早期的呼吸道标本u特别是下呼吸道标本 p填写标本采集登记表u务必填写清楚，不要缺漏项目u复
7、印一份交收样单位，签字盖章第十八页，本课件共有30页第十九页，本课件共有30页第二十页，本课件共有30页标本送检p送检单位u县级疾控中心/临床医院p送检时限u在24小时内送达p接受单位u流感监测网络实验室（设区市疾控中心）第二十一页，本课件共有30页标本的运送要求标本的运送要求p新鲜的临床采集标本应在4条件下24小时内运送至全国流感监测网络实验室;未能24小时内送至实验室的，应置-70或以下保存 p冻存的临床采集标本应在冻存的条件下，低温送至实验室 第二十二页，本课件共有30页生物安全第二十三页，本课件共有30页传播风险及管理p病毒特征分析表明存在人间传染的风险p暂时按“高致病性禽流感病毒”类
8、型管理u参考人间传染的病原微生物名录p需重点考虑生物安全u标本采集u标本运输u实验室活动第二十四页，本课件共有30页标本采集和运输p标本采集u重点做好采样人员的个人防护u必须佩带N95口罩、防护服、手套等防护用品u采样后器材高压消毒p标本运输u经过行政审批u包装临床样品：B类，UN3373包装病毒分离物：A类，UN2814包装u专人专车运输并注意防护第二十五页，本课件共有30页感染性物质包装分类航空运输B类包装（UN号3373第二十六页，本课件共有30页A类、B类包装的区别 A类包装 B类包装 定义 对人或动物致死或永久致残 不符合列入A类标准的感染性物质 运输专用名称 感染性物质，可感染人的
9、 诊断标本或临床标本或生命物质B类 UN编号 UN2814 UN3373 运输对象 名录中规定的第一类、第二类病原微生物及其样本；第三类中包装分类为A类的病原微生物 名录中规定的第三类、第四类病原微生物及其样本 UN专用标记需要不需要主容器 防水，防穿刺，防泄漏 防破损、防泄漏 次级容器 防水，防穿刺，防泄漏 防破损、防泄漏 外包装 最小边长100mm 至少有一个表面 100mm100mm 危险品申报单 需要 不需要 标识 UN3373客机单包装主容器最大运输量 液体50mL，固体50g 液体1L，固体4kg 第二十七页，本课件共有30页检测活动p标本分装、灭活和核酸提取uBSL-2+生物安全柜p核酸扩增uBSL-2p病毒培养uBSL-3：细胞及鸡胚的接种uABSL-3：动物感染实验u活动需要行政审批、报备p个人防护uBSL-2：N95口罩、眼镜、防护服等uBSL-3：按相关要求第二十八页，本课件共有30页病原学检测p核酸检测uReal-time RT-PCRp病毒分离u从三个病例中分离到3株病毒uA/Shanghai/1/2013(H7N9)uA/Shanghai/2/2013(H7N9)uA/Anhui/1/2013(H7N9)p序列测定u完成全基因组测定第二十九页，本课件共有30页感感谢谢大大家家观观看看第三十页，本课件共有30页