消毒灭菌技术及效果监测.pptx

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1、会计学1消毒灭菌技术及效果监测消毒灭菌技术及效果监测2n n灭菌杀灭或除去所有微生物的繁殖体和芽胞。n n消毒杀灭或除去病原微生物。n n防腐抑制微生物的生长与繁殖。抑菌剂或防腐剂。n n无菌不含有任何的活菌一消毒与灭菌技术一消毒与灭菌技术 基本概念基本概念第1页/共30页3二消毒与灭菌方法二消毒与灭菌方法 1 1物理灭菌法物理灭菌法n n热力灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌）n n辐射灭菌法（紫外线、电离幅射、微波）n n滤过除菌法（除菌滤器、适用物品）n n其他n n超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原）碎细胞、提取抗原）n n干燥与低温抑菌干燥与

2、低温抑菌第2页/共30页4热力灭菌法热力灭菌法n n原理n n使微生物蛋白质，酶变性凝固；使微生物蛋白质，酶变性凝固；n n膜结构破坏膜结构破坏n n微生物体内的微生物体内的DNADNA断裂，核蛋白解体。断裂，核蛋白解体。n n方法 干热灭菌法干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法热力灭菌法热力灭菌法第3页/共30页5焚烧焚烧-最彻底的灭菌方法最彻底的灭菌方法烧灼烧灼-直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法 如接种环、试管口、三角瓶口如接种环、试管口、三角瓶口干烤干烤-加热加热160-1160-170 2h70 2h 玻璃器皿、陶瓷玻璃器皿、陶瓷1 1、干热灭菌法、干热灭菌法灭菌效果：可杀死营养体和芽

3、胞灭菌效果：可杀死营养体和芽胞如尸体等如尸体等第4页/共30页62.2.湿热灭菌法湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法（高压蒸汽灭菌法（热压灭菌法）热压灭菌法）最有效的湿热灭菌法最有效的湿热灭菌法 121 121 15-20mim15-20mim（杀芽胞（杀芽胞)煮沸消毒法煮沸消毒法水煮水煮100 5100 5mim(mim(杀繁殖体杀繁殖体)-2)-2h h(杀芽胞杀芽胞)流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽水蒸汽100 15-30100 15-30mimmim(杀繁殖体杀繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）杀芽胞）较低

4、的温度较低的温度 61 3061 30mim/71 30smim/71 30s（杀致病菌）（杀致病菌）效果比干热好效果比干热好第5页/共30页7 利用化学药物（消毒防腐剂）破利用化学药物（消毒防腐剂）破坏微生物的化学组成、物理结构和生坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。理活动，达到防腐灭菌目的。消毒与灭菌方法消毒与灭菌方法 2 2化学消毒法化学消毒法第6页/共30页 三、医院消毒效果监测范围三、医院消毒效果监测范围 日日常常监监测测重重点点科科室室（手手术术室室、层层流流洁洁净净病病房房、ICUICU、产产房房、新新生生儿儿科科、母母婴婴同同室室病病房房、透透析析室室、血

5、血液液病病房房、烧烧伤伤病病房房、供供应应室室、内内镜镜室室、治治疗疗室室、换换药室药室 发发生生医医院院内内感感染染时时应应在在发发生生感感染染的的科科室室及及相相关关科科室室采采样样监测监测 第7页/共30页四、医院消毒效果监测分类四、医院消毒效果监测分类 消毒灭菌效果监测：消毒灭菌效果监测：消毒灭菌效果监测：消毒灭菌效果监测：使用中消毒液或无菌器械保存液使用中消毒液或无菌器械保存液使用中消毒液或无菌器械保存液使用中消毒液或无菌器械保存液 灭菌设备灭菌设备灭菌设备灭菌设备（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）（压力蒸汽灭菌器、

6、环氧乙烷灭菌器）紫外线灯紫外线灯紫外线灯紫外线灯 灭菌物品灭菌物品灭菌物品灭菌物品 环境卫生学监测：环境卫生学监测：环境卫生学监测：环境卫生学监测：空气空气空气空气 物表物表物表物表 医务人员手医务人员手医务人员手医务人员手 第8页/共30页1 1、空气消毒效果监测、空气消毒效果监测 1 1 1 1、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。2 2 2 2、布点及采样方法：、布点及采样方法：、布点及采样方法：、布点及采样方法：（1 1 1 1）类类类类环环环环境境境境布布布布点点

7、点点、采采采采样样样样方方方方法法法法：依依依依据据据据医医医医院院院院洁洁洁洁净净净净手手手手术术术术部部部部建建建建筑筑筑筑技术规范技术规范技术规范技术规范(GB50333-2002)10.3.13(GB50333-2002)10.3.13(GB50333-2002)10.3.13(GB50333-2002)10.3.13、手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。级级级级手手手手术术术术室室室室的的的的手手手手术术术术区区区区是是是是指指指指手手手手术术术术台台台

8、台两两两两侧侧侧侧边边边边至至至至少少少少各各各各外外外外推推推推0.9m0.9m0.9m0.9m、两两两两端至少各外推端至少各外推端至少各外推端至少各外推0.4m0.4m0.4m0.4m后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；级级级级手手手手术术术术室室室室的的的的手手手手术术术术区区区区是是是是指指指指手手手手术术术术台台台台两两两两侧侧侧侧边边边边至至至至少少少少各各各各外外外外推推推推0.6m0.6m0.6m0.6m、两两两两端至少各外推端至少各外推端至少各外推端至少各外推0.4m0.4m0.4m0.4m后后后后(包括手术台包括手

9、术台包括手术台包括手术台)的区域；的区域；的区域；的区域；级级级级手手手手术术术术室室室室的的的的手手手手术术术术区区区区是是是是指指指指手手手手术术术术台台台台四四四四边边边边至至至至少少少少各各各各外外外外推推推推0.4m0.4m0.4m0.4m后后后后（包包包包括手术台）的区域。括手术台）的区域。括手术台）的区域。括手术台）的区域。级手术室不分手术区和周边区。级手术室不分手术区和周边区。级手术室不分手术区和周边区。级手术室不分手术区和周边区。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。周边区：洁

10、净手术室内除去手术区以外的其他区域。第9页/共30页 类环境类环境采样采样方法方法 将普通营养琼脂平皿（直径为将普通营养琼脂平皿（直径为9cm9cm）放在室内手术区和周边区各）放在室内手术区和周边区各采样点处，采样高度离地面采样点处，采样高度离地面0.80.8米，采样时将平皿盖打开，扣放于米，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，平皿旁，暴露暴露30 30 分钟分钟，盖好，于，盖好，于3737培养培养2424小时小时，分别计数手术区，分别计数手术区和周边区的平均菌落数和周边区的平均菌落数。第10页/共30页、类环境布点、采样方法类环境布点、采样方法类环境布点、采样方法类环境布点、采样方法 依依依依

11、 据据据据 消消消消 毒毒毒毒 技技技技 术术术术 规规规规 范范范范 (卫卫卫卫 生生生生 部部部部 2002200220022002年年年年 版版版版)3.17.83.17.83.17.83.17.8。室室室室内内内内面面面面积积积积30M30M30M30M2 2 2 2，设设设设内内内内、中中中中、外外外外对对对对角角角角线线线线3 3 3 3点点点点，内内内内、外外外外点点点点布布布布点点点点部部部部位位位位距距距距墙墙墙墙壁壁壁壁1M1M1M1M处处处处；室室室室内内内内面面面面积积积积30 30 30 30 M M M M2 2 2 2，设设设设4 4 4 4角角角角及及及及中中中

12、中央央央央5 5 5 5点点点点（双双双双对对对对角角角角线线线线），4 4 4 4角角角角的的的的布布布布点点点点部部部部位位位位距距距距墙墙墙墙壁壁壁壁1M1M1M1M处。处。处。处。将将将将普普普普通通通通营营营营养养养养琼琼琼琼脂脂脂脂平平平平皿皿皿皿(直直直直径径径径为为为为9cm)9cm)9cm)9cm)放放放放在在在在室室室室内内内内各各各各采采采采样样样样点点点点处处处处，采采采采样样样样高高高高度度度度距距距距地地地地面面面面1.51.51.51.5米米米米（GB15982-1995GB15982-1995GB15982-1995GB15982-1995：0.80.80.80

13、.81.51.51.51.5米米米米），采采采采样样样样时时时时将将将将平平平平皿皿皿皿盖盖盖盖打打打打开开开开，扣扣扣扣放放放放于于于于平平平平皿皿皿皿旁旁旁旁，暴暴暴暴露露露露5 5 5 5分分分分钟钟钟钟，盖盖盖盖好好好好立立立立即即即即送送送送检检检检，于于于于37373737培培培培养养养养48484848小小小小时时时时，计数平板菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。计数平板菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。计数平板菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。计数平板菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。第11页/共30页空气采样时的注意事项空气采样时的注意事项 1 1 1 1、（消毒前）前提将放置

14、平皿的采样台准备好。、（消毒前）前提将放置平皿的采样台准备好。、（消毒前）前提将放置平皿的采样台准备好。、（消毒前）前提将放置平皿的采样台准备好。2 2 2 2、开门方式：自动门、开门方式：自动门、开门方式：自动门、开门方式：自动门,推拉式弹簧门推拉式弹簧门推拉式弹簧门推拉式弹簧门,有把手的门。有把手的门。有把手的门。有把手的门。3 3 3 3、行走路线（尽可能少、行走路线（尽可能少、行走路线（尽可能少、行走路线（尽可能少 在室内走动）在室内走动）在室内走动）在室内走动）动作要动作要动作要动作要 轻。先布皿轻。先布皿轻。先布皿轻。先布皿 后开盖。后开盖。后开盖。后开盖。4 4 4 4、动态环境

15、、动态环境、动态环境、动态环境 5 5 5 5、同一房间空气、物表、同一房间空气、物表、同一房间空气、物表、同一房间空气、物表 采样，先采空气，后采样，先采空气，后采样，先采空气，后采样，先采空气，后 采物表；最好由同一采物表；最好由同一采物表；最好由同一采物表；最好由同一 人操作人操作人操作人操作 。5 4 3 2 1第12页/共30页2 2、物体表面消毒效果监测、物体表面消毒效果监测 1 1、采采样样时时间间：消消毒毒处处理理后后进进行行采样。采样。2 2、采采样样方方法法：用用5cm5cm5cm5cm的的标标准准灭灭菌菌规规格格板板，放放在在被被检检物物体体表表面面，用用浸浸有有含含相相

16、应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液的的棉棉拭拭子子1 1支支，在在规规格格板板内内横横竖竖往往返返均均匀匀涂涂擦擦各各5 5次次，并并随随之之转转棉棉拭拭子子，连连续续采采样样4 4个个，剪剪去去手手接接触触部部位位后后，投投入入10ml10ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液试试管管内内，进进行行细细菌菌菌菌落总数和致病菌检测。落总数和致病菌检测。门门把把手手等等不不规规则则物物体体表表面面用用棉棉拭子直接涂擦采样拭子直接涂擦采样 第13页/共30页物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测 3 3 3 3、检测方法：、检测方法：、检测方法：、检测方法：（1 1 1 1）

17、细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数检检检检测测测测：检检检检测测测测方方方方法法法法按按按按消消消消毒毒毒毒技技技技术术术术规规规规范范范范3.17.6.3.17.6.3.17.6.3.17.6.3 3 3 3（1 1 1 1）执执执执行行行行。小小小小型型型型物物物物体体体体表表表表面面面面的的的的结结结结果果果果计计计计算，用算，用算，用算，用cfu/cfu/cfu/cfu/件。件。件。件。（2 2 2 2）致致致致病病病病菌菌菌菌检检检检测测测测：检检检检测测测测方方方方法法法法按按按按消消消消毒毒毒毒技技技技术术术术规规规规范范范范3.17.153.17.153.17.153.17.15

18、原则执行。原则执行。原则执行。原则执行。4 4 4 4、结果判定、结果判定、结果判定、结果判定 、类类类类区区区区域域域域：细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出致病菌为消毒合格。出致病菌为消毒合格。出致病菌为消毒合格。出致病菌为消毒合格。类类类类区区区区域域域域：细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出出出出致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。类类类类区区区区域域域域：

19、细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出出出出致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。第14页/共30页采样注意事项采样注意事项n n 1 1 1 1、空气、物表采样由同一人操作。、空气、物表采样由同一人操作。、空气、物表采样由同一人操作。、空气、物表采样由同一人操作。2 2 2 2、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右 3 3 3 3、母婴同室、血透室属、母婴

20、同室、血透室属、母婴同室、血透室属、母婴同室、血透室属类环境类环境类环境类环境 4 4 4 4、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整 改。改。改。改。5 5 5 5、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加溶血性链球菌（产房、新生

21、儿科、母婴同室加 测沙门氏菌）测沙门氏菌）测沙门氏菌）测沙门氏菌）6 6 6 6、采样棉签在现场要做空白对照。、采样棉签在现场要做空白对照。、采样棉签在现场要做空白对照。、采样棉签在现场要做空白对照。第15页/共30页3 3、手消毒效果监测、手消毒效果监测 1 1 1 1、采样时间：消毒后立即采样。、采样时间：消毒后立即采样。、采样时间：消毒后立即采样。、采样时间：消毒后立即采样。2 2 2 2、采采采采样样样样方方方方法法法法：被被被被检检检检人人人人五五五五指指指指并并并并拢拢拢拢，用用用用浸浸浸浸有有有有含含含含相相相相应应应应中中中中和和和和剂剂剂剂的的的的无无无无菌菌菌菌洗洗洗洗脱脱

22、脱脱液液液液的的的的棉棉棉棉拭拭拭拭子子子子在在在在双双双双手手手手指指指指屈屈屈屈面面面面从从从从指指指指根根根根到到到到指指指指端端端端往往往往返返返返涂涂涂涂擦擦擦擦2 2 2 2次次次次(一一一一只只只只手手手手涂涂涂涂擦擦擦擦面面面面积积积积约约约约30cm30cm30cm30cm2 2 2 2)，并并并并随随随随之之之之转转转转动动动动采采采采样样样样的的的的棉棉棉棉拭拭拭拭子子子子，剪剪剪剪去去去去操操操操作作作作者者者者手手手手接接接接触触触触部部部部位位位位，将将将将棉棉棉棉拭拭拭拭子子子子投投投投入入入入10ml10ml10ml10ml含含含含相相相相应应应应中中中中和和和

23、和剂剂剂剂的的的的无无无无菌菌菌菌洗洗洗洗脱脱脱脱液液液液试试试试管管管管内内内内，进进进进行行行行细细细细菌菌菌菌菌菌菌菌落落落落总总总总数数数数和致病菌检测。和致病菌检测。和致病菌检测。和致病菌检测。第16页/共30页手消毒效果监测检测方法手消毒效果监测检测方法 （1 1 1 1）细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数检检检检测测测测：将将将将采采采采样样样样管管管管在在在在混混混混匀匀匀匀器器器器上上上上振振振振荡荡荡荡20202020秒秒秒秒或或或或用用用用力力力力振振振振打打打打80808080次次次次，用用用用无无无无菌菌菌菌吸吸吸吸管管管管吸吸吸吸取取取取1.0ml1.0ml1.0ml

24、1.0ml待待待待检检检检样样样样品品品品接接接接种种种种于于于于灭灭灭灭菌菌菌菌平平平平皿皿皿皿，每每每每一一一一样样样样本本本本接接接接种种种种2 2 2 2个个个个平平平平皿皿皿皿，内内内内加加加加入入入入已已已已溶溶溶溶化化化化的的的的4545454548484848的的的的营营营营养养养养琼琼琼琼脂脂脂脂15ml15ml15ml15ml18 18 18 18 mlmlmlml，边边边边倾倾倾倾注注注注边边边边摇摇摇摇匀匀匀匀，待琼脂凝固，置待琼脂凝固，置待琼脂凝固，置待琼脂凝固，置363636361111温箱培养温箱培养温箱培养温箱培养48h48h48h48h，计数菌落数。，计数菌落

25、数。，计数菌落数。，计数菌落数。采样结果计算方法：采样结果计算方法：采样结果计算方法：采样结果计算方法：细菌总数（细菌总数（细菌总数（细菌总数（cfu/cmcfu/cmcfu/cmcfu/cm2 2 2 2）=（2 2 2 2）致致致致病病病病菌菌菌菌检检检检测测测测：按按按按消消消消毒毒毒毒技技技技术术术术规规规规范范范范3.17.153.17.153.17.153.17.15原原原原则执行。则执行。则执行。则执行。平板上菌落数平板上菌落数稀释倍数稀释倍数 采样面积（采样面积（cmcm2 2）第17页/共30页结果判定结果判定 、类类类类区区区区域域域域工工工工作作作作人人人人员员员员：细细

26、细细菌菌菌菌总总总总数数数数5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm5cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出出出出金金金金黄黄黄黄色色色色葡葡葡葡萄萄萄萄球球球球菌菌菌菌、大大大大肠肠肠肠杆杆杆杆菌菌菌菌、铜铜铜铜绿绿绿绿假假假假单单单单胞胞胞胞菌菌菌菌为消毒合格。为消毒合格。为消毒合格。为消毒合格。类类类类区区区区域域域域：细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm10cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出出出出金金金金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。

27、黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类类类类区区区区域域域域：细细细细菌菌菌菌总总总总数数数数15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm15cfu/cm2 2 2 2，并并并并未未未未检检检检出出出出金金金金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母母母母婴婴婴婴同同同同室室室室、婴婴婴婴儿儿儿儿室室室室、新新新新生生生生儿儿儿儿科科科科及及及及儿儿儿儿科科科科病病病病房房房房的的的的工工工工作作作作人人人人员员员员手手手手上上上上，不不不不得得得得检检检检出出出出沙沙沙沙门门门门氏氏氏氏菌菌菌

28、菌、大大大大肠肠肠肠杆杆杆杆菌菌菌菌、溶溶溶溶血血血血性性性性链链链链球菌、黄色葡萄球菌。球菌、黄色葡萄球菌。球菌、黄色葡萄球菌。球菌、黄色葡萄球菌。第18页/共30页 注意事项注意事项 1 1、分分清清普普通通卫卫生生洗洗手手和和外外科科洗手卫生手消毒。洗手卫生手消毒。外科洗手标准值外科洗手标准值?类类环环境境：金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、大大肠肠杆杆菌菌、铜铜绿绿假假单单胞胞菌菌(产产房房、母母婴婴同同室室、新新生生儿儿科科加加测测沙沙门门氏氏菌菌、溶血性链球菌溶血性链球菌)类类环环境境：金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、大肠杆菌大肠杆菌 第19页/共30页4 4 4 4、使用中消毒液或无菌

29、器械保存液监测、使用中消毒液或无菌器械保存液监测、使用中消毒液或无菌器械保存液监测、使用中消毒液或无菌器械保存液监测 1 1 1 1、使用中消毒液有效成分的测定、使用中消毒液有效成分的测定、使用中消毒液有效成分的测定、使用中消毒液有效成分的测定 2 2 2 2、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定 （1 1 1 1）涂抹法：）涂抹法：）涂抹法：）涂抹法：（2 2 2 2）倾倾倾倾注注注注法法法法：用用用用无无无无菌菌菌菌吸吸吸吸管管管管吸吸吸吸取取取取消消消消毒毒毒

30、毒液液液液1.0 1.0 1.0 1.0 mlmlmlml，加加加加入入入入到到到到9ml9ml9ml9ml含含含含相相相相应应应应中中中中和和和和剂剂剂剂的的的的无无无无菌菌菌菌生生生生理理理理盐盐盐盐水水水水采采采采样样样样管管管管中中中中混混混混匀匀匀匀，分分分分别别别别取取取取0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml放放放放入入入入2 2 2 2只只只只灭灭灭灭菌菌菌菌平平平平皿皿皿皿内内内内，加加加加入入入入已已已已溶溶溶溶化化化化的的的的4545454548484848的的的的营营营营养养养养琼琼琼琼脂脂脂脂15ml15ml15ml15ml18 18 18 18 mlmlmlml，

31、边边边边倾倾倾倾注注注注边边边边摇摇摇摇匀匀匀匀，待待待待琼琼琼琼脂脂脂脂凝凝凝凝固固固固，一一一一平平平平板板板板置置置置20202020培培培培养养养养7 7 7 7天天天天，观观观观察察察察霉霉霉霉菌菌菌菌生生生生长长长长情情情情况况况况；另另另另一一一一个个个个平平平平板板板板置置置置361361361361温温温温箱箱箱箱培培培培养养养养72h72h72h72h，计计计计数数数数菌菌菌菌落落落落数数数数。同同同同时时时时按按按按3.17.153.17.153.17.153.17.15检测致病菌。检测致病菌。检测致病菌。检测致病菌。使使使使用用用用中中中中消消消消毒毒毒毒液液液液或或或

32、或无无无无菌菌菌菌器器器器械械械械保保保保存存存存液液液液染染染染菌菌菌菌量量量量（cfu/mlcfu/mlcfu/mlcfu/ml）=每个平板上的菌落数每个平板上的菌落数每个平板上的菌落数每个平板上的菌落数20202020 结结结结果果果果判判判判定定定定：消消消消毒毒毒毒液液液液染染染染菌菌菌菌量量量量100cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml，并并并并未未未未检检检检出出出出致致致致病菌为合格。病菌为合格。病菌为合格。病菌为合格。第20页/共30页注意事项：注意事项：1 1、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。、必须是使

33、用中消毒液或无菌器械保存液。、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。2 2 2 2、要要要要求求求求采采采采样样样样后后后后1h1h1h1h内内内内检检检检测测测测，实实实实际际际际工工工工作作作作中中中中由由由由于于于于各各各各种种种种原原原原因因因因做做做做不不不不到到到到，采采采采5ml5ml5ml5ml样样样样品品品品放放放放在在在在灭灭灭灭菌菌菌菌试试试试管管管管中中中中（试试试试管管管管中中中中不不不不放中和剂）带回实验室。放中和剂）带回实验室。放中和剂）带回实验室。放中和剂）带回实验室。3 3 3 3、样样样样品品品品名名名名称称称称一一一一定定定定要要要要标标标标识识识识清清清清

34、楚楚楚楚，不不不不仅仅仅仅要要要要注注注注明明明明采采采采样样样样地地地地点点点点，而而而而且且且且要要要要注注注注明明明明消消消消毒毒毒毒液液液液的的的的名名名名称称称称、有有有有效效效效浓浓浓浓度度度度等等等等，例例例例：劲劲劲劲康康康康消消消消毒毒毒毒剂剂剂剂、0.1%0.1%0.1%0.1%健健健健之之之之素素素素消消消消毒毒毒毒液液液液、80%80%80%80%漂漂漂漂白白白白粉粉粉粉溶溶溶溶液液液液、0.5%0.5%0.5%0.5%洗必泰等洗必泰等洗必泰等洗必泰等标识标识标识标识都是不正确的。都是不正确的。都是不正确的。都是不正确的。4 4 4 4、消消消消毒毒毒毒液液液液细细细细

35、菌菌菌菌菌菌菌菌落落落落总总总总数数数数标标标标准准准准值值值值100cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml100cfu/ml，无无无无菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。5 5 5 5、致致致致病病病病菌菌菌菌检检检检测测测测包包包包括括括括金金金金黄黄黄黄色色色色葡葡葡葡萄萄萄萄球球球球菌菌菌菌、铜铜铜铜绿绿绿绿假假假假单单单单胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。第2

36、1页/共30页5 5、灭菌物品消毒效果监测、灭菌物品消毒效果监测 1 1 1 1、采采采采样样样样时时时时间间间间：在在在在灭灭灭灭菌菌菌菌处处处处理理理理后后后后，存存存存放放放放有有有有效效效效期期期期内内内内采样。采样。采样。采样。2 2 2 2、采采采采样样样样方方方方法法法法：按按按按消消消消毒毒毒毒技技技技术术术术规规规规范范范范3.17.5.23.17.5.23.17.5.23.17.5.2原则执行原则执行原则执行原则执行 3 3 3 3、结结结结果果果果判判判判定定定定：阳阳阳阳性性性性对对对对照照照照在在在在24242424小小小小时时时时内内内内应应应应有有有有菌菌菌菌生生

37、生生长长长长，阴阴阴阴性性性性对对对对照照照照在在在在培培培培养养养养期期期期间间间间应应应应无无无无菌菌菌菌生生生生长长长长,如如如如需需需需-厌厌厌厌氧氧氧氧菌菌菌菌及及及及霉霉霉霉菌菌菌菌培培培培养养养养管管管管内内内内均均均均为为为为澄澄澄澄清清清清或或或或虽虽虽虽显显显显浑浑浑浑浊浊浊浊但但但但经经经经证证证证明明明明并并并并非非非非有有有有菌菌菌菌生生生生长长长长，判判判判为为为为灭灭灭灭菌菌菌菌合合合合格格格格；如如如如需需需需-厌厌厌厌氧氧氧氧菌菌菌菌及及及及霉霉霉霉菌菌菌菌培培培培养养养养管管管管中中中中任任任任何何何何1 1 1 1管管管管显显显显浑浑浑浑浊浊浊浊并并并并证

38、证证证实实实实有有有有菌菌菌菌生生生生长长长长，应应应应重重重重新新新新取取取取样样样样，分分分分别别别别同同同同法法法法复复复复试试试试2 2 2 2次次次次，除除除除阳阳阳阳性性性性对对对对照照照照外外外外，其其其其他他他他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。第22页/共30页灭菌物品消毒效果监测注意事项灭菌物品消毒效果监测注意事项灭菌物品消毒效果监测注意事项灭菌物品消毒效果监测注意事项n n 1 1、无无菌菌检检验验应应在在洁洁净净度度为为100100级级单单向向流

39、流空空气气区区域域内内进进行行，最最好好把把灭灭菌菌包包带带回回在在百百级级实实验验室室打打开开。应应严严格格遵遵守守无无菌菌操作，避免微生物污染。操作，避免微生物污染。n n 2 2、应应采采有有效效期期内内的的样样品品（高高压压灭灭菌菌：一一般般是是两两周周；还还氧乙烷：两年）氧乙烷：两年）第23页/共30页6 6、灭菌器灭菌效果监测、灭菌器灭菌效果监测n n1 1 1 1、监测方法：、监测方法：、监测方法：、监测方法：n n 工艺监测工艺监测工艺监测工艺监测n n 化学监测（化学指示卡、指示胶带）化学监测（化学指示卡、指示胶带）化学监测（化学指示卡、指示胶带）化学监测（化学指示卡、指示胶

40、带）n n 生物监测生物监测生物监测生物监测n n2 2 2 2、常用灭菌器种类、常用灭菌器种类、常用灭菌器种类、常用灭菌器种类n n 压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器n n 环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器 n n3 3 3 3、生物指示物、生物指示物、生物指示物、生物指示物n n 嗜热脂肪杆菌芽胞（嗜热脂肪杆菌芽胞（嗜热脂肪杆菌芽胞（嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC7953ATCC7953ATCC7953ATCC7953）,压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器n n 枯枯枯枯草草草草杆杆杆杆菌菌菌菌黑黑黑黑色色色色变变变变种种种

41、种芽芽芽芽胞胞胞胞（ATCC9372ATCC9372ATCC9372ATCC9372）环环环环氧氧氧氧乙乙乙乙烷烷烷烷灭灭灭灭菌菌菌菌器器器器第24页/共30页7 7、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测检测方法检测方法 生物指示菌片布放方法（生物指示菌片布放方法（生物指示菌片布放方法（生物指示菌片布放方法（消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范消毒技术规范 ）（1 1 1 1）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。菌小纸袋内，置于标

42、准试验包中心部位。菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。（2 2 2 2）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包口上方放置一个标准试验包口上方放置一个标准试验包口上方放置一个标准试验包 预预预预真真真真空空空空和和和和脉脉脉脉动动动动真真真真空空空空压压压压力力力力蒸蒸蒸蒸汽汽汽汽灭灭灭灭菌菌菌菌器器器器灭灭灭灭菌菌菌菌柜柜柜柜室室室室内内内内，排气口上方放置一个标准试验包排气口上方放置一个标准试验包排气口上方放置一个标准试验

43、包排气口上方放置一个标准试验包 手手手手提提提提压压压压力力力力蒸蒸蒸蒸汽汽汽汽灭灭灭灭菌菌菌菌器器器器：通通通通用用用用贮贮贮贮物物物物盒盒盒盒代代代代替替替替标标标标准准准准试试试试验验验验包包包包，贮贮贮贮物物物物盒盒盒盒内内内内盛盛盛盛满满满满中中中中试试试试管管管管，指指指指示示示示菌菌菌菌片片片片放放放放于于于于中中中中心心心心部部部部位位位位的的的的两两两两支支支支灭灭灭灭菌菌菌菌试试试试管管管管内内内内，贮贮贮贮物物物物盒盒盒盒放放放放于于于于手手手手提提提提压压压压力力力力蒸蒸蒸蒸汽汽汽汽灭灭灭灭菌器底部。菌器底部。菌器底部。菌器底部。第25页/共30页8 8、环氧乙烷灭菌器

44、灭菌效果监测环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测n n 枯枯枯枯草草草草杆杆杆杆菌菌菌菌黑黑黑黑色色色色变变变变种种种种芽芽芽芽胞胞胞胞（ATCC9372ATCC9372ATCC9372ATCC9372）菌菌菌菌片片片片事事事事先先先先放放放放入入入入一一一一次次次次性性性性注注注注射射射射器器器器中中中中（每每每每个个个个注注注注射射射射器器器器中中中中放放放放1 1 1 1个个个个菌菌菌菌片片片片），然然然然后后后后封封封封装装装装在在在在一一一一剥剥剥剥离离离离式式式式包包包包装装装装袋袋袋袋内内内内。菌菌菌菌片片片片在在在在灭灭灭灭菌菌菌菌器器器器内内内内布布布布放放放放的的的的数数数数量量量量

45、应应应应足足足足够够够够多多多多，应应应应放放放放在在在在那那那那些些些些在在在在性性性性能能能能鉴鉴鉴鉴定定定定时时时时发发发发现现现现是是是是最最最最难难难难灭灭灭灭菌菌菌菌的的的的部部部部位位位位，并并并并均均均均匀匀匀匀分分分分布于整个灭菌物品中。布于整个灭菌物品中。布于整个灭菌物品中。布于整个灭菌物品中。n n 上上上上、中中中中、下下下下层层层层对对对对角角角角线线线线前前前前、中中中中、后后后后各各各各布布布布放放放放一一一一个个个个菌菌菌菌片片片片，排排排排气气气气口口口口上上上上方方方方放放放放置置置置一一一一个个个个菌菌菌菌片片片片，共共共共放放放放置置置置10101010

46、个菌片。个菌片。个菌片。个菌片。第26页/共30页注意事项注意事项1 1 1 1、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等 2 2 2 2、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌 器一定要满载。器一定要满载。器一定要满载。器一定要满载。3 3 3 3、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因、出现阳性结果

47、要进行工艺监测，分析原因4 4 4 4、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内 使用。使用。使用。使用。第27页/共30页9、紫外线消毒效果监测、紫外线消毒效果监测n n n n 紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外线辐照计测定法。开启紫外线灯线辐照计测定法。开启紫外线灯线辐照计测定法。开启紫外线灯线辐照计测定法。开启紫外线灯5 5 5 5分钟后，将测定

48、分钟后，将测定分钟后，将测定分钟后，将测定波长为波长为波长为波长为253.7nm253.7nm253.7nm253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外的紫外线辐照计探头置于被检紫外的紫外线辐照计探头置于被检紫外的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离线灯下垂直距离线灯下垂直距离线灯下垂直距离1m1m1m1m的中央处，待仪表稳定后，所的中央处，待仪表稳定后，所的中央处，待仪表稳定后，所的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照度值。示数据即为该紫外线灯的辐照度值。示数据即为该紫外线灯的辐照度值。示数据即为该紫外线灯的辐照度值。n n 结果判定：普通结果判定：普通结果判定：普通结果

49、判定：普通30W30W30W30W直管型紫外线灯，新灯辐直管型紫外线灯，新灯辐直管型紫外线灯，新灯辐直管型紫外线灯，新灯辐照强度照强度照强度照强度90 W/cm90 W/cm90 W/cm90 W/cm2 2 2 2为合格；使用中紫外线灯辐为合格；使用中紫外线灯辐为合格；使用中紫外线灯辐为合格；使用中紫外线灯辐照强度照强度照强度照强度70 W/cm70 W/cm70 W/cm70 W/cm2 2 2 2为合格；为合格；为合格；为合格；30W30W30W30W高强度紫外线灯高强度紫外线灯高强度紫外线灯高强度紫外线灯辐照强度辐照强度辐照强度辐照强度180 W/cm180 W/cm180 W/cm180 W/cm2 2 2 2为合格；为合格；为合格；为合格；第28页/共30页n n 注意事项：注意事项：n n 1 1、紫紫外外线线辐辐照照计计必必须须在在计计量量部部门门检检定定的的有有效效期期内内使使用用，如如有有校校正正系系数数，测测定定值值应用校正系数修正。应用校正系数修正。n n 2 2、监监测测人人员员做做好好自自我我防防护护，以以免免被被紫紫外线灼伤。外线灼伤。n n第29页/共30页