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1、第六章层析和离子交换设备第一页，本课件共有69页第二页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第三页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第四页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备 凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固定相的孔穴内扩散，
2、组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。比孔穴孔径定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出；完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出；第五页，本课件共有69页第六章 层析和离子
3、交换设备第一节第一节 层析设备层析设备利用流动相中溶质的分子量大小差异而进行分离的一种方法，称利用流动相中溶质的分子量大小差异而进行分离的一种方法，称之为排阻层析。之为排阻层析。第六页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第七页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第八页，本课件共有69页第九页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备 利用固定相球形介质表面活性利用固定相球形介质表面活性基团经化学键合方法，将具有基团经化学键合方法，将具有交换能力的离子基团在固定相交换能力的离子基团在固定相上面，这些离子基团可以与流上面
4、，这些离子基团可以与流动相中离子发生可逆性离子交动相中离子发生可逆性离子交换反应而进行分离的方法，称换反应而进行分离的方法，称之为离子交换层析。之为离子交换层析。第十页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备利用固定相载体上偶联的疏水性较强的配基，在一定非极性的溶剂利用固定相载体上偶联的疏水性较强的配基，在一定非极性的溶剂中能够与溶剂中的疏水分子发生作用，以非极性配基为固定相，极中能够与溶剂中的疏水分子发生作用，以非极性配基为固定相，极性溶剂为流动相来分离不同极性的物质的方法，称之为反相层析。性溶剂为流动相来分离不同极性的物质的方法，称之为反相层析。第十一页，
5、本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备利用固定相载体上偶联的疏水性利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离的方发生可逆性结合而进行分离的方法，称之为疏水层析。法，称之为疏水层析。第十二页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备在固定相载体表面偶联具有特殊亲和在固定相载体表面偶联具有特殊亲和作用的配基，这些配基可以与流动相作用的配基，这些配基可以与流动相中溶质分子发生可逆的特异性结合而中溶质分子发生可逆的特异性结合而进行分离的一种方法，称之为亲和层进行分离的一种
6、方法，称之为亲和层析。析。第十三页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第十四页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第十五页，本课件共有69页基基因因重重组组融融合合蛋蛋白白的的纯纯化化第十六页，本课件共有69页第十七页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第十八页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第十九页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第二十页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层
7、析设备层析设备第二十一页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备蠕动泵工作原理蠕动泵工作原理就象用手指夹挤一根充满流体的软管，随着手指向前滑动管内流体向前移动。就象用手指夹挤一根充满流体的软管，随着手指向前滑动管内流体向前移动。蠕动泵也是这个原理只是由滚轮取代了手指。通过对泵的弹性输送软管交替进行挤蠕动泵也是这个原理只是由滚轮取代了手指。通过对泵的弹性输送软管交替进行挤压和释放来泵送流体。就象用两根手指夹挤软管一样压和释放来泵送流体。就象用两根手指夹挤软管一样,随着手指的移动随着手指的移动,管内形成负管内形成负压压,液体随之流动液体随之流动.蠕动泵就是在两个转
8、辊子之间的一段泵管形成蠕动泵就是在两个转辊子之间的一段泵管形成“枕枕”形流体。形流体。“枕枕”的体积取决于泵管的内径和转子的几何特征。流量取决于泵头的转速与的体积取决于泵管的内径和转子的几何特征。流量取决于泵头的转速与“枕枕”的尺寸、转子每转一圈产生的的尺寸、转子每转一圈产生的“枕枕”的个数这三项参数之乘积。的个数这三项参数之乘积。“枕枕”的尺寸一般的尺寸一般为常量（泵送粘性特别大的流体时除外）。拿转子直径相同的泵相比较，产生较大为常量（泵送粘性特别大的流体时除外）。拿转子直径相同的泵相比较，产生较大“枕枕”体积的泵，其转子每转一圈所输送的流体体积也较大，但产生的脉动度也较体积的泵，其转子每转
9、一圈所输送的流体体积也较大，但产生的脉动度也较大。这与膜阀的情形相似。而产生较小大。这与膜阀的情形相似。而产生较小“枕枕”体积的泵，其转子每转一圈所输送的体积的泵，其转子每转一圈所输送的流体体积也较小；而且，快速、连续地形成的小流体体积也较小；而且，快速、连续地形成的小“枕枕”使流体的流动较为平稳。这使流体的流动较为平稳。这与齿轮泵的情形相似。与齿轮泵的情形相似。第二十二页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第二十三页，本课件共有69页第二十四页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第二十五页，本课件共有69页第六章 层
10、析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第二十六页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第二十七页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备层析柱通常是玻璃的。总的说来，长柱分辨好。层析柱通常是玻璃的。总的说来，长柱分辨好。但大量物质的处理则用粗的柱比较适宜。层析但大量物质的处理则用粗的柱比较适宜。层析柱的基本装置如图。柱的基本装置如图。第二十八页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备紫外检测仪是生物大分子液相色谱中常用的检紫外检测仪是生物大分子液相色谱中常用的检测仪器，可用于连续测量
11、液体流的紫外吸收，测仪器，可用于连续测量液体流的紫外吸收，用与其相连接的记录仪记录下吸光值的变化情用与其相连接的记录仪记录下吸光值的变化情况，广泛应用于生物大分子的分离纯化。况，广泛应用于生物大分子的分离纯化。第二十九页，本课件共有69页第三十页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第一节第一节 层析设备层析设备第三十一页，本课件共有69页第三十二页，本课件共有69页第三十三页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第三十四页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第三十五页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第三十六页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第三十七
12、页，本课件共有69页生物工业当中常用的离子交换剂：生物工业当中常用的离子交换剂：离子交换树脂离子交换树脂离子交换树脂分子可分成三部分：离子交换树脂分子可分成三部分：网络骨架网络骨架 功能基功能基 电荷离子电荷离子第六章 层析和离子交换设备第三十八页，本课件共有69页树树 脂脂 的的 网网 络络 骨骨 架架第三十九页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十一页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十二页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十三页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十四页，本课件共有69
13、页第六章 层析和离子交换设备第四十五页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十六页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十七页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十八页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第四十九页，本课件共有69页第五十页，本课件共有69页第五十一页，本课件共有69页第五十二页，本课件共有69页第五十三页，本课件共有69页第五十四页，本课件共有69页第五十五页，本课件共有69页第五十六页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备第五十七页，本课件共有69页第六章 层析和离子交换设备Q1=VMq*106VM第五十八页，本课件共有69页Q
14、2=V(c1-c2)*106=VF(c1-c2)*106VF第五十九页，本课件共有69页G=VM*103/xVM=V(c1-c2)/q=VF(c1-c2)/qGx=V/VF=V/VM a=VH/VM VFa第六十页，本课件共有69页2.第六十一页，本课件共有69页第六十二页，本课件共有69页3.第六十三页，本课件共有69页a=VF/VMVF1/VF2=VM1/VM2VM2=VM1VF2/VF1第六十四页，本课件共有69页VM2=mVM1VM1VM2VM2VM1第六十五页，本课件共有69页第六十六页，本课件共有69页VM2VF2/VF1VF1VF2VF第六十七页，本课件共有69页第六十八页，本课件共有69页The End第六十九页，本课件共有69页