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1、 茶叶中茶多酚类物质 提取与含量测定 系别：生物医药工程系 班级：食品科学与工程 一、目的要求 1、了解茶叶中茶多酚及茶多酚的组成及性状；2、掌握溶剂提取法提取茶多酚的原理及方法；3、掌握萃取法分离有机溶剂中的茶多酚的操作方法；二、茶多酚总述 1、组成：茶多酚是茶叶中酚类及其衍生物的总称，因此常称为多酚类。其主要成分是黄烷醇类、羟基-4-黄烷醇类、花色甘类、黄酮醇类和黄酮类。这些化合物都具有 2-苯基苯并吡喃的基本结构，故统称为类黄酮物质。茶叶中绿原酸、鸡鈉酸、咖啡酸等酚酸类化合物也是茶多酚的组分之一。在茶多酚各组分之一黄烷醇类为主，黄烷醇类优异儿茶素类物质为主。2、性状：茶多酚是介于淡黄色至
2、茶褐色之间的无定型粉末，味涩，略有吸湿性，易 溶于水，可溶于乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂，不溶于氯仿及苯等有 机溶剂。茶多酚具有较好的耐酸性，在 pH7 时则不稳定且氧化变色 加快，呈红色。3.茶多酚的提取方法 茶多酚提取工艺效果较好的是有机溶剂萃取法、离子沉淀提取法、树脂吸附分离法、超临界二氧化碳萃取法，其次是超声波浸提法、层析法、膜技术。4.贮存方法：贮存于阴凉通风干燥环境，并与有毒、有气味的物品隔离，避 免直接与三价铁离子及碱性物质接触。三、实验原理 有机溶剂萃取法：有机溶剂萃取法是传统的提取工艺。是利用茶叶中不同化合物在不同溶剂中的溶解度不同进行提取分离。在粗茶叶萃取溶
3、液中，除含有茶多酚以外，还含有咖啡碱、酯质、色素、植物多糖、有机酸、以及悬浮物，且茶多酚含量仅为 25%40%，所以大多数工艺用乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂反复萃取的方法进一步除杂、纯化、精制。茶水用氯仿萃取可得到水层和有机层，咖啡碱存在于有机层，而茶多酚则存在于水层中，根据萃取及过滤原理，将有机层和水层分别进行浓缩、萃取，即可得到相应粗产物。溶剂萃取法一般的工艺路线图所示 溶剂萃取法一般的工艺路线 粗茶多酚 水 溶剂层 氯仿 乙醇 茶 滤 滤 浸提3乙酸乙酯 水 有机相 乙酸乙酯 浓缩液 抽滤 本法的优点是：稳定、可靠；缺点是：有效成分的含量和提取率较低，通过以上工艺获得的茶多酚含量通常仅能达到
4、50%65%。四、仪器和药品 仪器：天平；分析天平；铁架台；抽滤装置；超级恒温水浴槽；长颈漏斗一个；滤纸若干张；分液漏斗一个；100 毫升的烧杯（三个）；玻璃棒一个；药品：1.乙醇水溶液（50）；2.干茶叶原料；3.氯仿（分析纯）；4.Na2So4 溶液馏水，五、实验步骤 1、温度设定:打开超级恒温水浴电源开关，使温度达到 90 2、称量：称取 30 克干茶叶，放在 100 毫升小烧杯中。3、溶解：用量筒量取 40 毫升 50乙醇水溶液，倒入小烧杯中，用玻璃棒轻轻搅拌，使干茶叶完全浸润在乙醇溶液中。4、加热：将干茶叶和乙醇水溶液的混合液置于超级恒温水浴槽中，加热 20分钟。5、过滤：将加热完毕
5、的混合液取出，冷却到室温；用长颈漏斗对混合液进行过滤，滤除茶叶残渣。再对残渣进行乙醇萃取.6、分离萃取：1)对分液漏斗进行试漏，调整好铁架台高度；2)用量筒量取 20 毫升氯仿，置于 100 毫升小烧杯中；将茶叶滤液倒入分液漏斗中，再将氯仿倒入其中，再倒入少量 Na2So4溶液，轻轻摇匀，使之混合充分，静置，分层，上层应为茶多酚水溶液，呈茶色，下层为氯仿乙醇混合液，为无色。3)将下层溶液小心放至小烧杯中，上层溶液从分液漏斗上口倒置 100毫升小烧杯中；7、抽滤浓缩：1)安装好减压抽滤装置；2)将布氏漏斗里的滤纸用少量茶多酚水溶液润湿，开启抽气阀，一边缓慢倒入液体，一边抽滤。3）抽滤完毕，关闭抽
6、气阀，干燥得到咖啡碱。8、萃取：1)水层用乙酸乙酯萃取得有机层。2)重复上步抽滤浓缩步骤，得茶多酚。9、称量：1)将布氏漏斗内的滤饼用玻璃棒小心刮出，置于洁净滤纸上；2)另取一张滤纸将粉末里的水分压干；3)用分析天平称量出茶多酚 注：向萃取体系中加入 Na2So4溶液，可增加有机相和水相的极性差别，缩短茶多酚的提取时间。六、数据处理 以计算茶多酚的含量为例：茶叶中茶多酚的百分含量计算公式为 W=(Mc/M)*100 式中：Mc是最后提取出的茶多酚的质量，单位为 g;M为最初称取的茶叶原料的质量，单位为 g。七、实验分析及注意事项：1、萃取时要严格控制下层液的流速，太快有可能使上层液损失，使测得的百分含量偏低；2、最后浓缩抽滤时，抽气阀不要开得太大，否则会使滤纸破损，导致产品损失；3、浓缩完毕后，要及时称量，否则由于茶多酚具有吸湿性，会使测得的结果偏高。4.使用的有机溶剂氯仿(CHCl3)有毒，使得产品和操作都不太安全；