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1、流式流式细胞胞仪在不孕在不孕诊断中的运用断中的运用你现在浏览的是第一页，共13页1.ICSI(intracytoplasmic sperm injection)卵母细胞单精子显微注射技术2.IUI(intrauterine insemination)3.IVF4.ART你现在浏览的是第二页，共13页主要内容主要内容1.SDFA1.SDFA（精子（精子DNADNA碎片率检测）碎片率检测）进一步的精液检查进一步的精液检查2.2.免疫性不孕免疫性不孕/流产病因学诊断流产病因学诊断自然杀伤细胞的检测自然杀伤细胞的检测3.3.自然杀伤细胞检测相关试剂自然杀伤细胞检测相关试剂你现在浏览的是第三页，共13页
2、SDFASDFA检测方法背景检测方法背景-自从生殖领域不孕诊疗的不断发展，精液检查一直是自从生殖领域不孕诊疗的不断发展，精液检查一直是 我们所关注的，但其评价的标准的确定，还尚未达成一致我们所关注的，但其评价的标准的确定，还尚未达成一致 -许多检测声称是更优越的，并能给临床医生提供更多信息许多检测声称是更优越的，并能给临床医生提供更多信息-我们仍然需要有统一的评价标准我们仍然需要有统一的评价标准精子精子DNADNA碎片检测碎片检测:1980开始当初声称能预测IUI,IVF,及 ICSI的成功率 之后，碎片率的检测一直未标准化 新的数据证明：碎片率的检测能提供 IUI 还是 IVF/ICSI助孕
3、方式选择的参考意见 你现在浏览的是第四页，共13页不孕患者初诊筛查流程不孕患者初诊筛查流程ART初诊患者初诊患者IUI患者患者不孕不孕患者患者精液常精液常规分析规分析已做碎片分析已做碎片分析未做碎片分析未做碎片分析80-90%第一次第一次IUI败败70-80%总是失败总是失败无精子碎片率检查无精子碎片率检查进行精子碎片分析进行精子碎片分析IUI失败后失败后放弃放弃ART更高的更高的IUI成功率成功率大部分人在失败大部分人在失败后不会尝试后不会尝试ART更多婴儿更多婴儿 出生出生IUI失败的病人失败的病人将行将行IVF/ICSI首次首次ART患者患者你现在浏览的是第五页，共13页什么是什么是SD
4、FA？SDFA通过评估精子的健康状况，帮助不孕患者选择更适合的助孕方式SDFA能评估精子的DNA损伤程度，而此异常有可能引起IUI助孕的失败你现在浏览的是第六页，共13页DNADNA碎片指数碎片指数-DFI-DFI精子经酸处理及染色后精子经酸处理及染色后1.DNA完整的细胞染色-绿色2.DNA受损的细胞染色-红色你现在浏览的是第七页，共13页DNA碎片指数碎片指数-DFI基于荧光强度的差异基于荧光强度的差异可用流式细胞仪分析可用流式细胞仪分析检测检测你现在浏览的是第八页，共13页DNA碎片指数碎片指数-DFI计算受损DNA细胞所占的比值即患者精液标本的DNA碎片率指数-DFI你现在浏览的是第九
5、页，共13页SDFASDFA检测文献支持检测文献支持-1-1大样本多中心临床研究结果证实大样本多中心临床研究结果证实SDFASDFA检测结果检测结果DFIDFI指数：指数：1.能指导辅助生殖助孕方式选择2.能预测辅助生殖助孕的成功率你现在浏览的是第十页，共13页SDFASDFA检测文献支持检测文献支持-2-2已发表的文献中已发表的文献中SDFA检测结果-DFI指数在不同人群中的异常发生率你现在浏览的是第十一页，共13页自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NK）的检测）的检测1.1.自然杀伤细胞是淋巴细胞的一种自然杀伤细胞是淋巴细胞的一种 其细胞表面表达其细胞表面表达CD56+CD56+等等2.2.在不
6、孕或反复自然流产患者，其在不孕或反复自然流产患者，其外周血或子宫内膜上外周血或子宫内膜上NKNK细胞活性增细胞活性增加加3.3.使用抗体荧光染色技术，通过使用抗体荧光染色技术，通过流式细胞仪可检测流式细胞仪可检测NKNK细胞细胞你现在浏览的是第十二页，共13页NKNK细胞检测相关抗体细胞检测相关抗体编号编号品名品名克隆克隆亚型亚型规格规格349041Mouse IgG1-FITCX40Mouse IgG1,k100ug349043Mouse IgG1-PEX40Mouse IgG1,k100ug347202Mouse IgG1-PerCP-Cy5.5X40Mouse IgG1,k50ug340
7、442Mouse IgG1-APC iiii100ug349044Mouse IgG-PerCPiiii100ug347747CD56-PEMY31Mouse IgG1,k100tests347617CD16-PEB73.1Mouse IgG1,k100tests349201/340542CD3-FITCSK7Mouse IgG1,k50/250tests347463CD45-FITC2D1Mouse IgG1,k100tests347493/347497/333945CD14-FITC/CD14-PE/CD14-APC-Cy7MOP9Mouse IgG1,k100tests340436CD14-APCiiii25ug340585CD14-PerCPiiii25ug340911/340912/340913BD Multi-Check Control你现在浏览的是第十三页，共13页