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1、第十章第十章 分枝杆菌属分枝杆菌属 Mycobacterium医学微生物与免疫学教研室医学微生物与免疫学教研室 董海艳董海艳分枝杆菌属特点分枝杆菌属特点形态：形态：形态：形态：细长略弯曲杆菌，生长时可形成分枝细长略弯曲杆菌，生长时可形成分枝细长略弯曲杆菌，生长时可形成分枝细长略弯曲杆菌，生长时可形成分枝菌体成份菌体成份菌体成份菌体成份：细胞壁含有大量：细胞壁含有大量：细胞壁含有大量：细胞壁含有大量脂类脂类脂类脂类染色染色染色染色：不易着色，加热后着色，不易脱色，能抵抗：不易着色，加热后着色，不易脱色，能抵抗：不易着色，加热后着色，不易脱色，能抵抗：不易着色，加热后着色，不易脱色，能抵抗盐酸酒精
2、的脱色，所以又被称为盐酸酒精的脱色，所以又被称为盐酸酒精的脱色，所以又被称为盐酸酒精的脱色，所以又被称为抗酸杆菌抗酸杆菌抗酸杆菌抗酸杆菌（acid-acid-acid-acid-fast bacilli)fast bacilli)fast bacilli)fast bacilli)种类种类种类种类：结核分枝杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌、牛分枝杆菌，、牛分枝杆菌，、牛分枝杆菌，、牛分枝杆菌，麻风杆菌，非结核杆菌麻风杆菌，非结核杆菌麻风杆菌，非结核杆菌麻风杆菌，非结核杆菌第一节第一节 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 M.tuberculosis 俗称结核杆菌（俗称结核杆菌（tubercle
3、bacillustubercle bacillus）是人类是人类结核病结核病的病原菌的病原菌一、生物学性状一、生物学性状形态形态：细长弯曲的杆菌细长弯曲的杆菌 分枝状分枝状 有荚膜有荚膜 染色：染色：胞壁含大量脂类胞壁含大量脂类 抗酸染色抗酸染色，染成红色，背景蓝色，染成红色，背景蓝色1 1、形态染色、形态染色mycobacteria结核杆菌结核杆菌acid-fast stain2 2、培养特性、培养特性专性需氧专性需氧培养培养:营养要求营养要求高高，罗氏培养基罗氏培养基 温度：温度：3737，PHPH：6.56.56.86.8生长生长：慢慢，2 24 4周，可见粟米大菌落周，可见粟米大菌落菌
4、落菌落：乳白色或黄色，干而粗糙，不透明，：乳白色或黄色，干而粗糙，不透明，呈呈菜花状菜花状 3 3、抵抗力、抵抗力三抗三抗 抗干燥抗干燥 抗酸碱抗酸碱 抗化学消毒剂抗化学消毒剂 三敏感三敏感：紫外线敏感紫外线敏感 70707575酒精敏感酒精敏感 湿热敏感湿热敏感4 4、变异性、变异性n n可以发生可以发生可以发生可以发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性的变异的变异的变异的变异n n如：如：如：如：毒力变异毒力变异毒力变异毒力变异 BCGBCGBCGBCG 耐药性变异：异烟肼、利福平耐药耐药
5、性变异：异烟肼、利福平耐药耐药性变异：异烟肼、利福平耐药耐药性变异：异烟肼、利福平耐药 L L L L型变异型变异型变异型变异卡介苗：卡介苗：卡介苗：卡介苗：1908190819081908年，年，年，年，Calmette and Guerin Calmette and Guerin Calmette and Guerin Calmette and Guerin 将将将将牛型牛型牛型牛型 结核杆菌结核杆菌结核杆菌结核杆菌经经经经13131313年传年传年传年传230230230230代，获得的对人无致代，获得的对人无致代，获得的对人无致代，获得的对人无致 病性和具有免疫原性的病性和具有免疫原性
6、的病性和具有免疫原性的病性和具有免疫原性的减毒活疫苗。减毒活疫苗。减毒活疫苗。减毒活疫苗。致病物质致病物质所致疾病所致疾病免疫性免疫性致病性致病性荚膜荚膜与细胞表面受体结合（粘附与入侵细胞）与细胞表面受体结合（粘附与入侵细胞）含多种酶（分解利用营养物质）含多种酶（分解利用营养物质）保护（防止有害物质的进入菌体）保护（防止有害物质的进入菌体）抑制吞噬体与溶酶体融合抑制吞噬体与溶酶体融合脂质脂质索状因子索状因子（破坏线粒体，抑制中性粒细胞破坏线粒体，抑制中性粒细胞,引起肉芽肿引起肉芽肿）蜡质蜡质D D（引起迟发性过敏反应）（引起迟发性过敏反应）硫酸脑苷脂硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）（抑制吞
7、噬体与溶酶体结合）蛋白质蛋白质即结核菌素，引起迟发性过敏反应即结核菌素，引起迟发性过敏反应致病物质致病物质磷脂磷脂（刺激单核细胞增生，形成结核结节）（刺激单核细胞增生，形成结核结节）入侵途径入侵途径 呼吸道、消化道、损伤的皮肤呼吸道、消化道、损伤的皮肤所致疾病所致疾病引起多种引起多种引起多种引起多种脏脏器器器器组织组织的的的的结结核病，核病，核病，核病，肺肺肺肺结结核核核核为为最多最多最多最多见见原原原原发发感染感染感染感染:儿童多儿童多儿童多儿童多见见，外源性感染，外源性感染，外源性感染，外源性感染 原原原原发综发综合征合征合征合征 ，纤维纤维化或化或化或化或钙钙化，少数病灶化，少数病灶化，
8、少数病灶化，少数病灶扩扩散，散，散，散，引起全身引起全身引起全身引起全身TBTBTBTB 原原原原发发后感染后感染后感染后感染：外或内源性感染，机体已有免疫力，外或内源性感染，机体已有免疫力，外或内源性感染，机体已有免疫力，外或内源性感染，机体已有免疫力，病灶局限，引起局部病灶局限，引起局部病灶局限，引起局部病灶局限，引起局部TBTBTBTB、开放性、开放性、开放性、开放性TBTBTBTB（反（反（反（反应剧应剧烈，干烈，干烈，干烈，干酪性坏死、空洞）酪性坏死、空洞）酪性坏死、空洞）酪性坏死、空洞）肺外感染肺外感染肺外感染肺外感染：结核性脑膜炎、肾结核、肠结核、结核性腹膜炎结核性脑膜炎、肾结核
9、、肠结核、结核性腹膜炎结核性脑膜炎、肾结核、肠结核、结核性腹膜炎结核性脑膜炎、肾结核、肠结核、结核性腹膜炎Chest X-ray of severe pulmonary tuberculosis patient 免疫性和变态反应免疫性和变态反应1 1、免疫性免疫性免疫性免疫性：带菌免疫或传染性免疫带菌免疫或传染性免疫带菌免疫或传染性免疫带菌免疫或传染性免疫指结核杆菌（或指结核杆菌（或指结核杆菌（或指结核杆菌（或BCGBCGBCGBCG）在体内存在时，机体对细菌再次入）在体内存在时，机体对细菌再次入）在体内存在时，机体对细菌再次入）在体内存在时，机体对细菌再次入侵有免疫力，而当细菌或其成分从体内
10、消失后机体的免疫侵有免疫力，而当细菌或其成分从体内消失后机体的免疫侵有免疫力，而当细菌或其成分从体内消失后机体的免疫侵有免疫力，而当细菌或其成分从体内消失后机体的免疫力也随之消失。力也随之消失。力也随之消失。力也随之消失。主要是主要是主要是主要是以以以以T T T T细胞为主的细胞免疫细胞为主的细胞免疫细胞为主的细胞免疫细胞为主的细胞免疫2 2 2 2、超敏反应、超敏反应、超敏反应、超敏反应细胞免疫为主细胞免疫为主细胞免疫为主细胞免疫为主也形成迟发型超敏反应也形成迟发型超敏反应也形成迟发型超敏反应也形成迟发型超敏反应 郭霍郭霍郭霍郭霍(koch)(koch)(koch)(koch)现象现象现象
11、现象以前感染过或免疫豚鼠以前感染过或免疫豚鼠正常豚鼠正常豚鼠24-48小时小时10-14天天局部红肿、浅溃疡局部红肿、浅溃疡局部红肿、溃疡局部红肿、溃疡 不扩散，不扩散，脱落后自行愈合脱落后自行愈合坏死，经久不愈坏死，经久不愈有毒有毒TB菌菌全身扩散全身扩散皮下皮下郭霍现象郭霍现象3 3、结核菌素试验、结核菌素试验概念：概念：是应用是应用是应用是应用结核菌素结核菌素结核菌素结核菌素进行皮肤试验来测定机体进行皮肤试验来测定机体进行皮肤试验来测定机体进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起对结核分枝杆菌是否能引起对结核分枝杆菌是否能引起对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反应迟发型超敏反应迟发
12、型超敏反应迟发型超敏反应（型变态反应）的一种试验型变态反应）的一种试验型变态反应）的一种试验型变态反应）的一种试验.n n方法方法：前臂皮内注射，前臂皮内注射，前臂皮内注射，前臂皮内注射，4872h4872h观察。注意局部观察。注意局部观察。注意局部观察。注意局部有无红肿有无红肿有无红肿有无红肿硬结硬结硬结硬结，不能单独以红晕为标准。，不能单独以红晕为标准。，不能单独以红晕为标准。，不能单独以红晕为标准。A TB skin test is typically performed on the forearm.After sterilizing the skin,a measured amoun
13、t of PPD is injected intracutaneously.结核菌素试验结果n n阳性阳性阳性阳性：硬结红肿直径：硬结红肿直径：硬结红肿直径：硬结红肿直径0.50.50.50.51.5cm1.5cm1.5cm1.5cm之间之间之间之间 表明机体表明机体表明机体表明机体曾感染过曾感染过曾感染过曾感染过结核，但不一定是结核病结核，但不一定是结核病结核，但不一定是结核病结核，但不一定是结核病 或机体接种或机体接种或机体接种或机体接种BCGBCGBCGBCG成功成功成功成功n n强阳性：强阳性：强阳性：强阳性：1.5cm1.5cm1.5cm1.5cm以上，表明以上，表明以上，表明以上，
14、表明可能有活动性结核可能有活动性结核可能有活动性结核可能有活动性结核，应应应应 进一步检查进一步检查进一步检查进一步检查n n阴性：阴性：阴性：阴性：0.5cm0.5cm0.5cm0.5cm,说明说明说明说明无结核杆菌感染无结核杆菌感染无结核杆菌感染无结核杆菌感染。但应考虑下述情况：但应考虑下述情况：但应考虑下述情况：但应考虑下述情况：原发感染的早期，尚未产生超敏反应；原发感染的早期，尚未产生超敏反应；原发感染的早期，尚未产生超敏反应；原发感染的早期，尚未产生超敏反应；正患严重结核病机体丧失反应能力；正患严重结核病机体丧失反应能力；正患严重结核病机体丧失反应能力；正患严重结核病机体丧失反应能力
15、；正患有其他传染病（如麻疹等）正患有其他传染病（如麻疹等）正患有其他传染病（如麻疹等）正患有其他传染病（如麻疹等）使用免疫抑制剂使用免疫抑制剂使用免疫抑制剂使用免疫抑制剂Within 48 to 72 hours,a positive TB skin test is marked by an area of reddish induration greater than 10 mm.It is the induration(firm bump)that is gently palpated that determines the size,not the area of redness.Thi
16、s reaction is slightly larger than the average positive test 17 mm in size.nTuberculin test with positive reaction 结核菌素试验的应用选择选择选择选择卡介苗接种对象及测定免疫效果。卡介苗接种对象及测定免疫效果。卡介苗接种对象及测定免疫效果。卡介苗接种对象及测定免疫效果。辅助诊断辅助诊断辅助诊断辅助诊断婴幼儿结核病。婴幼儿结核病。婴幼儿结核病。婴幼儿结核病。在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的在未接种卡介苗
17、的人群中作结核杆菌感染的流行病流行病流行病流行病学调查。学调查。学调查。学调查。可用于可用于可用于可用于测定测定测定测定肿瘤病人的肿瘤病人的肿瘤病人的肿瘤病人的细胞免疫功能细胞免疫功能细胞免疫功能细胞免疫功能。四、微生物学检查四、微生物学检查 1 1、标本取材标本取材标本取材标本取材：根据感染部位：根据感染部位：根据感染部位：根据感染部位 2 2 2 2、直接涂片检查直接涂片检查直接涂片检查直接涂片检查 标本直接涂片：抗酸染色标本直接涂片：抗酸染色标本直接涂片：抗酸染色标本直接涂片：抗酸染色 浓缩涂片浓缩涂片浓缩涂片浓缩涂片 3 3 3 3、分离培养分离培养分离培养分离培养：罗氏培养基上接种培
18、养：罗氏培养基上接种培养：罗氏培养基上接种培养：罗氏培养基上接种培养2 2 2 24 4 4 4周周周周 4 4 4 4、快速诊断快速诊断快速诊断快速诊断：PCRPCRPCRPCR 五、防治原则五、防治原则1、预防预防:接种卡介苗接种卡介苗 接种对象接种对象接种对象接种对象：新生儿及结核菌素试验阴性儿童新生儿及结核菌素试验阴性儿童新生儿及结核菌素试验阴性儿童新生儿及结核菌素试验阴性儿童 接种后可以维持接种后可以维持接种后可以维持接种后可以维持3 3 3 35 5 5 5年年年年2 2、治疗、治疗：早发现，早治疗，联合治疗早发现，早治疗，联合治疗 药物药物：链霉素、利福平、异烟肼：链霉素、利福平、异烟肼小小 结结n n结核杆菌的生物学性状特点结核杆菌的生物学性状特点n n结核杆菌的致病物质有哪些？结核杆菌的致病物质有哪些？n n结核菌素试验结核菌素试验