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1、电子显微镜技术电子显微镜技术及其在病理诊断上的应用及其在病理诊断上的应用一、电子显微镜技术：也称电子显微技术 或电子显微术 电子显微镜技术电子显微镜技术 电电 镜镜 样品制备样品制备 发明背景：发明背景：电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发明使用。行径，在上述理论的指导下发明使用。电子显微镜的类型：电子显微镜的类型：透射电子显微镜：观察样品内部超微结构。透射电子显微镜：观察样品内部超微结构。扫描电子显微镜：展示样品表面形貌。扫描电子显微镜：展示样品表面形貌。扫描电镜和透射电镜比较扫描电镜和透射电镜比较样品的制备样品的制备透射电镜
2、样品制备的常用方法：透射电镜样品制备的常用方法：包括超包括超薄切片、冷冻复型、负染色等。薄切片、冷冻复型、负染色等。扫描电镜样品制备：扫描电镜样品制备：除保存样品表面形除保存样品表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，貌结构外，只要求样品干燥并能导电，不需包埋和切片。不需包埋和切片。二、电子显微镜技术二、电子显微镜技术 在病理诊断上的应用在病理诊断上的应用神经内分泌颗粒：神经内分泌颗粒：神经内分泌肿瘤神经内分泌肿瘤黑色素小体：无色素性黑色素小体：无色素性黑色素瘤黑色素瘤LangerhansLangerhans细胞颗粒：细胞颗粒：组织细胞增生症组织细胞增生症Weibel-PaladeWeibel
3、-Palade小体：小体：血管内皮瘤及肉瘤血管内皮瘤及肉瘤肌微丝：肌微丝：肌源性肿瘤肌源性肿瘤细胞质内晶体：细胞质内晶体：腺泡状软组织肉瘤腺泡状软组织肉瘤板层小体：板层小体：肺泡细胞癌肺泡细胞癌成簇糖原颗粒：成簇糖原颗粒：EwingsEwings瘤瘤(一一)特异性超微结构特异性超微结构 Neurosecreting granulesSize and shape of melanosome of stage，Langerhans cell:rod-shaped and tennis-racket-shaped Alveolar soft part sarcoma:crystalloids （二）
4、细胞膜及其特化物（二）细胞膜及其特化物 细胞外形细胞外形 纤毛纤毛 微绒毛微绒毛 细胞连接细胞连接 基板和外板基板和外板Malignant pleural mesothelioma:microvilli Junction complexJunction complex Desmosomes Desmosomes粘粘液液颗颗粒粒：粘粘液液性性上上皮皮（单单位位膜膜包包低低、中中电电子子密密度度的的颗颗粒粒oror网网状状物物质质，偶偶见见电电子子密密度度的的核核心心“牛眼状牛眼状，bulls eye type”bulls eye type”）酶酶元元颗颗粒粒：腺腺泡泡细细胞胞来来源源（唾唾液液腺
5、腺癌癌、胰胰腺腺外外分泌腺癌、胃癌）单位膜包电子密度高分泌腺癌、胃癌）单位膜包电子密度高APUDAPUD颗粒（神经内分泌颗粒）：颗粒（神经内分泌颗粒）：ApudomaApudoma与溶酶体与溶酶体区别区别 溶酶体：大小、形状差异大溶酶体：大小、形状差异大 神经内分泌颗粒：较规则神经内分泌颗粒：较规则（三）细胞合成产物（三）细胞合成产物Mucous cystadenoma of ovary:bulls-eye granules Mucous cystadenoma of ovary:granules with reticular pattern Acinic cell carcinoma:zym
6、ogen granules例例1 1：男男,39,39岁岁,发现右侧颈部无痛肿物发现右侧颈部无痛肿物1 1年余年余,花生花生米大米大,取肿物做活检。光镜取肿物做活检。光镜:增大的淋巴结增大的淋巴结,结构紊结构紊乱乱,但仍残留滤泡与淋巴窦但仍残留滤泡与淋巴窦,窦腔及淋巴索充以大窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞量胞质丰富的嗜伊红细胞,直径约直径约20m20m。核圆。核圆,卵卵圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞及嗜酸性粒细圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞及嗜酸性粒细胞。电镜胞。电镜:大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广,见有似网球拍或柄的双膜结构见有似网球拍或柄的双膜结
7、构(Birbeck(Birbeck 颗粒颗粒),),证明光镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞证明光镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞 。病理诊断：病理诊断：淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增生症。生症。朗格汉斯细胞组织细胞增生症朗格汉斯细胞组织细胞增生症 双模构成的似网球拍状的双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。颗粒。EM 10 000 例例2 2：男男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大大,再次淋巴结再次淋巴结(颌下颌下)活检病理诊断为恶性淋巴活
8、检病理诊断为恶性淋巴瘤瘤(免疫母细胞型免疫母细胞型)。电镜。电镜:瘤细胞大、多边形或瘤细胞大、多边形或不规则形不规则形,核质比大核质比大,核膜弯曲核膜弯曲,不规则或奇特的内不规则或奇特的内陷陷,核常染色质丰富核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质突网栏状大核仁。少许胞质突,胞质内核糖体丰富胞质内核糖体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发其他细胞器稀少。质膜间见发育不良的桥粒样连接。育不良的桥粒样连接。病理诊断病理诊断:颌下淋巴结转移癌。随后临床发现颌下淋巴结转移癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。鼻咽癌原发灶。转移癌转移癌 瘤细胞大，胞核大，核膜不平滑瘤细胞大，胞核大，核膜不平滑，显著增大的核质比，质膜
9、间有桥粒样连接显著增大的核质比，质膜间有桥粒样连接，胞质含少许欠发达的细胞器胞质含少许欠发达的细胞器，网栏状大核仁。网栏状大核仁。EM 10 000 例例3 3：男男,30,30 岁岁,肝穿活检。光镜诊断肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽慢迁肝。虽未见典型碎屑样坏死未见典型碎屑样坏死,但不除外活动性变化。电镜但不除外活动性变化。电镜见肝细胞大见肝细胞大,疏松疏松,细胞周围间隙加大细胞周围间隙加大,有微绒毛化有微绒毛化,滑面内质网增生滑面内质网增生,内含管状体内含管状体,肝窦内充塞胶原纤肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶,周围有淋周围有淋巴细胞浸润。
10、巴细胞浸润。电镜诊断电镜诊断:慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻微慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻微活动。活动。慢性迁延性乙型病毒性肝炎慢性迁延性乙型病毒性肝炎滑面内质网增生滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。EM 8 000EM 8 000国内外对电镜诊断的价值国内外对电镜诊断的价值,在肿瘤应用方面在肿瘤应用方面报道较多报道较多,占占65%65%。涉及病原学的诊断涉及病原学的诊断,特别是怀疑病毒、支原特别是怀疑病毒、支原体、衣原体等微生物感染的标本应充分使体、衣原体等微生物感染的标本应充分使用电镜。用电镜。电镜标本要求尽可能活体取材电镜标本要求尽可能活体取材,立即投入预立即投入预冷的固定液中固定冷的固定液中固定,以利完好地保存细胞的以利完好地保存细胞的超微结构。超微结构。半薄切片选区定位要求准确。半薄切片选区定位要求准确。