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1、基本概念物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法消毒灭菌情景1-4基本概念杀死一切微生物，包括芽孢。灭菌分为杀菌：菌体尚存溶菌：菌体消失消毒：只杀死病源菌，未伤及芽孢防腐：暂时抑制微生物生长除菌：用冲洗、过滤等法，除去微生物是保证生产成功的重要手段返回本章物理消毒灭菌法一、热力灭菌二、紫外线灭菌返回本章一、热力灭菌（一）原理高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。（二）方法湿热灭菌干热灭菌返回本节器皿包装1601702h干燥箱使用注意70以下开箱取物勿超180随用随开包返回本节主要生产设备一、制培养基设备二、灭菌设备三、接种设备四、培养设备五、保藏设备六、菌种厂布局返回本章情景1-5一、制培养基设备（
2、一）原料处理设备切片粉碎两用机切片粉碎两用机铡草机粉碎机返回本节装袋机（二）培养基分装设备返回本节装瓶机挖瓶机返回本节菌种瓶返回本节常压返回本节密闭性好要求1.接种箱用法清洁、放物品消毒喷雾熏蒸紫外灯特点简易、利移动对人体低害效果好、工效低三、接种设备（一）接种环境返回本节2.接种室缓冲间：23m2接种间：56m2面积79m2高2.22.5m要求6个面平滑两门错开、平拉式顶装紫外灯清洁物品放缓冲间消毒移物至接种间喷消毒液10min后接种消毒液清洁使用返回本节返回本节返回本节使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的电器3.超净工作台双人单人返回本节要求:前端为导热性好的金属材料枪匙钩铲镊耙针环接种4
3、.接种工具返回本节四、菌种培养没备1.培养箱培养少量菌种的恒温电器（2040）返回本节2.培养室培养大量菌种的恒温房要求光线暗光线暗密闭好、通风性强密闭好、通风性强能升温、降温（空调机）能升温、降温（空调机）有培养架有培养架返回本节贮藏室远离污染源低温（48）干燥、通风、遮光用前要严格消毒杀虫地面常撒石灰粉保藏原种、栽培种：五、菌种保藏设备保藏母种：冰箱（4）左右返回本节1.黄毅.食用菌栽培.北京：高等教育出社，19982.中国食用菌菌种网1.栽培时为何不用母种作菌种？2.母种扩成原种的目的是什么？3.怎样使用接种箱？4.菌种的基本要求是什么？思考、讨论题课外学习资源返回本节参考资料1.中国食
4、用菌杂志.云南：中国食用菌编辑部2004.16，2005.162.杨新美.食用菌栽培学.第6章.北京：中国农业出版社，19963.张金霞.食用菌生产技术.第48章.北京：中国标准出版社，19994.黄毅.食用菌栽培.第二版.上册.第4章.北京：高等教育出版社，19985.张松.食用菌学.第6章.广州：华南理工大学出版社，20006.中国食用菌菌种网7.中国食用菌信息网返回本节（二）湿热灭菌特点 范围广、温度低、效果好、时间短热蒸气或热水热源方法高压蒸汽灭菌常压蒸汽灭菌巴氏消毒返回本节蛋白质凝固点与其含水量的关系蛋白质含水量(%)凝固温度()502518605674808090145160170
5、热蒸气穿透力大蛋白质凝固点随其含水量的增加而降低因为返回本节干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较加热方式传导介质温度（）加热时间（h）透过布层温度（）结果20层40层 100层干热 空气130140 486 7270以下灭菌不完全湿热 饱和蒸汽 105.3 3101 10l 10l灭菌完全返回本节1.高压蒸气灭菌概念利用高压产生的高蒸汽温度杀灭微生物的方法方法原理水沸点随热蒸汽压力的增加而升高密闭锅 蒸气多 压力高 沸点高返回本节返回本节步骤：装锅加热排气升压保压灭菌降压出锅关键：排净冷空气注意灭菌时间和压力因物而异升降压力要稳灭菌时间从保压时算起压力降至“0”才能开盖使用返回本节排气纯蒸气压力与温
6、度的关系1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕）=98Kpa（千帕）返回本节2.常压蒸汽灭菌概念利用常压产生的100蒸汽温度进行灭菌的方法特点设备简，成本低，灭温低，时间长用法 一次性灭菌（100，10余h)尽快达到100达到100时开始计时灭菌中勿降温，勿干锅返回本节返回本节灭菌池返回本节3.巴氏消毒概念利用低于100的温度杀灭有害微生物的方法培养料堆积发酵料温6070杀死有害微生物方法返回本节返回本节二、紫外线灭菌概念利用电子射过水银气体产生的紫外线而杀菌的方法杀菌机理直接：使蛋白质、酶等变性失活间接：空气中产生臭氧或过氧化氢使用有效距离：1.52.0m理想波长：265nm30w紫外灯照3
7、0min避光30min返回本节便携式返回本节透力很弱定期更换灯管只起辅助作用伤眼睛和皮肤特点返回本节化学消毒灭菌法概念与划分一、气雾消毒灭菌法二、液体消毒灭菌法返回本章利用化学药剂杀灭或抑制微生物的方法概念抑菌剂消毒剂灭菌剂浓度液态：喷雾、浸泡、洗刷等气态：加热、焚烧、氧化等状态划分返回本节一、气雾消毒灭菌法（一）要求密闭条件下保持一定时间（二）种类甲醛气雾盒返回本节机理：结合蛋白质氨基，使其变性。喷：5%熏：10ml/m3+1/2KMnO4用法1.甲醛有刺激性和腐蚀性返回本节2.气雾消毒盒粉末状刺激性小扩散力及渗透性强特点26g/m3点燃（熏30min以上）用法返回本节二、液体消毒法固体或液
8、体药品水药液（多现配现用）概念种类氧化剂熟石灰表面活性剂乙醇酚类新洁尔灭返回本节（一）氧化剂氧化菌体蛋白质的活性基团，使其变性。机理种类高锰酸钾过氧化氢漂白粉过氧乙酸返回本节1.高锰酸钾紫色针状结晶0.1%0.2%浸泡手、器具等。返回本节2.过氧化氢无色液体，属环保型消毒剂3%皮肤、伤口消毒6浸泡器皿30min返回本节3.漂白粉2%5%浓度洗刷、喷雾、浸泡湿处可干撒作用约30min使用注意原品密封随配随用对衣物有退色和腐蚀性返回本节4.过氧乙酸无色至微黄色液体，有刺激性、腐蚀性、挥发性。1.5%熏蒸7ml/m30.2%洗手0.5%浸泡0.5%喷雾使用返回本节（二）表面活性剂脱水剂脂溶剂蛋白质变
9、性剂1.乙醇7075效果最好皮肤、器皿擦拭或浸泡浓度高浓度效果差无水的无杀菌作用返回本节3.新洁尔灭0.25%消毒皮肤、浸泡器具0.5%喷雾2.酚类石炭酸：3%5%浸泡或喷雾来苏尔刺激性小效力比苯酚强4倍3%5%喷雾、擦洗2%消毒手返回本节（三）熟石灰提高pH、消毒破坏秸草表面的蜡质提供钙素养料作用使用1%2拌料5%10喷、浸、刷、喷干撒湿环境或霉染处返回本节药品及浓度的选择依据微生物特点物品的性质消毒目的环境影响标准性质稳定易溶于水杀菌力强抗菌谱广作用较快使用浓度低价格低廉没有毒腐性或很小返回本节主要内容一、物理消毒灭菌法1.热力灭菌干热（酒精灯、干燥箱）高压(排净冷空气）常压（攻头、控中、
10、保尾）湿热2.紫外线（使用方法、注意事项）二、化学消毒灭菌法常用酒精、甲醛、高锰酸钾来苏、新洁尔灭等返回本节1.高压灭菌与常压灭菌有哪些不同？2.高压灭菌应注意些什么？3.紫外线灭菌应注意些什么？4.为何不使用高浓度的酒精？思考题作业题1.为何湿热灭菌比干热灭菌效果好、时间短?2.来苏尔和石炭酸都是酚类，为何来苏尔的杀菌效力高？返回本节主要参考资料1.白毓谦.微生物实验技术.第3章.济南：山东大学出版社，19862.黄毅.食用菌栽培.第二版.上册.第8章.北京：高等教育出版社，19983.陈士瑜.食用菌生产大全.p8399.北京：中国农业出版社，19884.沈平等.微生物学实验.第6章.北京：高等教育出版社，20015.李顺鹏.微生物学实验指导.P16-24.北京：中国农业出版社，20036.周德庆.微生物学教程.第7章.北京：高等教育出版社，1999返回本节返回本章