食品微生物3-2-微生物的营养和生长(00001)课件.ppt

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1、3Chapter微生物的营养与生长1CONTENTS0102微生物的营养微生物的生长l微生物生长量的测定方法l微生物的群体生长规律l影响微生物生长的因素本节重点、难点掌握常用的微生物生长量的测定方法(比浊法和计数法)掌握微生物群体生长的基本规律及及应用用;掌握掌握影响影响微生物生微生物生长的因素的因素;1 微生物生长量的测定方法细菌总数直接测定法:微生物生长的测定:计数法重量法生理指标法活菌计数膜过滤法比浊法Direct Measurements间接测定法:Indirect Measurements41.2 活菌活菌计数数培养法培养法稀稀释涂布法涂布法CFU:colony forming un

2、it菌落形成单位61.2 活菌活菌计数数培养法培养法稀稀释涂布法涂布法测定定样品中的微生物数量品中的微生物数量7主要适用于只能主要适用于只能进行液体培养的微生行液体培养的微生物,或采用液体物,或采用液体鉴别培养基培养基进行直接行直接鉴定并定并计数的微生物。数的微生物。饮用水的用水的标准,准,细菌菌总数小于数小于100个个/ml;大大肠杆菌群数每杆菌群数每1000 ml 水中小于水中小于3个个液体培养法液体培养法(The most probable number method,最大可能数法最大可能数法)1.2 活菌活菌计数数培养法培养法81.3 比比浊法法1011快捷程度能否区分活菌数适用对象用

3、途特殊用途细菌总数计数快 3-5min部分固体/液体培养实验室常用活菌计数慢8-24h是固体/液体培养食品中有害微生物的检测部分可以用以菌体分离纯化比浊法快1-2 min/实时否液体培养发酵工业 或科研常用重量法中等10min-24h否液体培养发酵工业用生理指标法快实时否液体培养发酵工业13个体生长 个体繁殖 群体生长微生物生长 =个体生长 +个体繁殖15代时20min,24h后1个大肠杆菌变为272个,重4722t160生生 长生长速率死死 亡亡活/死细胞数、细菌的群体生长速率18各个阶段的菌体生长特征192.2 微生物的微生物的连续培养培养在微生物的整个培养期间,通过一定的方式使微生物能以

4、恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是实现微生物连续培养的实质。20 Turbidostat控制连续培养的方法恒浊培养恒化培养恒浊器Chemostat恒化器不断调节新鲜培养基的流入速而使细菌培养液浊度保持恒定;保持新鲜培养基流入速度与含菌培养物的流出速度速度相同;可以使菌体维持最高的生长速率,获得最大生长量。保持培养液流速不变,控制培养基中某种营养物质(生长限制性因子)浓度基本恒定的方式。211.恒浊连续培养一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵工业(连续发酵)连续发酵与单批发酵相比的优点:缩短发酵周期,提高设备利

5、用率;便于自动控制;降低动力消耗及体力劳动强度;产品质量较稳定;缺点:杂菌污染和菌种退化22恒化连续培养与恒浊连续培养的比较(1)在恒浊连续培养中,参量稀释速度在不断地变化;而恒化连续培养中,该参数为一恒定值。(2)在恒浊连续培养中,培养基中不存在生长限制因素。(3)恒浊连续培养在高稀释速度下运行最好,恒化连续培养在低稀释速度下最稳定有效。243 影响微生物生长的因素微生物生微生物生长的五大条件的五大条件pH氧气氧气水水/渗透渗透压营养养温度温度0402050103253.1 温度温度最低生长温度最适生长温度最高生长温度生长温度三基点:26最适生长温度:15,45-50,80-113微生物可生

6、长温度范围的广泛性嗜冷微生物嗜温微生物 嗜热微生物嗜高温微生物20-40,28微生物生长的温度范围微生物类型嗜冷微生物(Psychrophiles)兼性嗜冷微生物(Psychrotrophs)嗜温微生物(Mesophiles)嗜热微生物(Thermophiles)嗜高温微生物(Hyperthermophiles)最低0以下以下015-204565生长温度()最适1520-4020-4555-6580-90最高204045以上以上80100以上以上293.2 pH一般微生物生长的pH范围最低pH、微生物 最低pH 最适pH 最高pH最适pH、最高pH细菌酵母菌霉菌3-52-31-36.5-7.5

7、4.5-5.54.5-5.58-107-87-8Acidophiles:pH 3 最适Acid-tolerant:pH 4-9 最适,最低可以强酸Alkaliphiles:pH 9最适,最适,10还可生可生长alkali-tolerant:pH 7最适,最适,10还可生可生长或生存或生存绝大多数微生物细胞内环境pH接近中性,少数极端嗜酸、嗜碱微生物细胞内环境pH偏离中性。31嗜酸性:0-5.5嗜中性:5.58.0嗜碱性:8.0 11.5微生物可生长pH的广泛性pHpH对微生物生长的影响(1)不同生长阶段和不同的生理、生化过程具有不同的最适pH;如Aspergillus niger,pH=2.5

8、-6.5,菌体生长为主;pH=2.0-2.5,利于合成柠檬酸;pH=7.0,大量合成草酸。(2)微生物外环境pH变化较大,但胞内pH相对稳定,接近中性,有利于保护生物大分子以及细胞器的功能(如膜对H+的低透性,转运或缓冲作用)。(3)pH会影响细胞膜的透性和稳定性。(4)pH会影响营养物质的离子化程度,影响其吸收和运输。32微生物在其生长过程中,会改变外界环境的pH,起始pH不同于培养过程的pH有机物糖类脂肪有机酸蛋白质无机物 (NH4)2SO4NaNO3胺类H2SO4NaOH变酸变碱发酵工业中,发酵液pH值的调整能否用酸碱调节发酵液的pH值?333.3 氧气氧气专性好氧微好氧专性厌氧耐氧兼性

9、厌氧微生物与的关系专性好氧菌:需氧,正常大气压下呼吸产能;好氧菌兼性厌氧菌:呼吸产能为主,兼营发酵产能;呼吸产能为主,兼营无氧呼吸产能;微好氧菌:低氧分压下生活(0.01-0.03 Pa),呼吸产能;氧厌氧菌耐氧厌氧菌:不需要氧,只以发酵产能,但氧无毒害作用;严格厌氧菌:以发酵或者无氧呼吸产能,氧对其有毒害或者致死效应。3.3 氧气氧气35微生物类群超氧化物歧化严格好氧菌有兼性厌氧菌有耐氧厌氧菌有严格厌氧菌无微好氧菌有酶(SOD)过氧化氢酶有有无无有/无(触酶)备注低水平状态36氧对生物的毒害作用机制O2 在生物体内可由酶促或者非酶促反应产生:(1)超氧化物自由基:O2-(2)过氧化物,如 H2O2(3)强氧化性的羟基自由基:OH其共同的特性是:化学性质不稳定,反应能力极强,与生物大分子作用,形成生物大分子的活性氧化物,破坏其功能。3.3 氧气氧气37383.4 水水/渗透渗透压极端嗜盐嗜盐耐盐非嗜盐39谢谢大家YOURNAME4 有害微生物的控制3.12.6 辐射射2.5 化学化学药剂2.1 温度温度怎怎样控制控制/除除灭有害的微生物有害的微生物2.7 超声波超声波41

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