“紫外-可见分光光度法测定药材的多糖含量”开放性实验的设计-.docx
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1、“紫外-可见分光光度法测定药材的多糖含量”开放性实验的设计*李燕,严万莉,曾紫微,肖竦,何彬(贵州医科大学,贵州 贵阳550025)近年来,国家高度重视创新型人才的教育和培养口。大学生毕业出 来是服务于社会,引领社会的发展的,所以国家一直致力于培养创新 型人才。但是不得不承认,许多高校的发展落后于社会的发展,在科 技技术不断进步的今天,各大企业有了更新的运营模式,更新的仪器 设备,而大多数高校仍然在传授多年前就很成熟的各种理论知识,而 本来就少的实验课也是“照葫芦画瓢”,只要跟着书本实验步骤做, 基本不会出错,从各方面来说,都是不利于社会的发展的2。特别 是药学专业的学生,不仅要求学生掌握扎实
2、的基础和较广的知识面, 还需要具备较强的创新意识,这样才能适应大学毕业以后,成为复合 型的高素质的药学人才,从事药学相关的研究开发、教育及质量控制 等方面的工作,服务于国家经济社会建设主战场。传统的教学模式虽然能达到教学的目的,但是“照本宣科”式的教学, 容易忽视学生分析问题、解决问题的能力和创新能力的培养3。虽 然,药学专业课程设置包括了众多科目的基本理论知识以及实验课程, 然而,大部分实验课程均为基本的单元操作实验,极少涉及综合性实 验或者自主创新实验;大部分实验也与社会实际工作内容相距甚远。 现有实验课程与药学专业学生的培养目标还有一定的差距和不足,有 必要进行一些新的实验教学改革和尝试
3、。为了提高药学教育的实验教 学质量,我们设置了不同类型的开放性实验,让学生自主学习、自主 操作的能力得到提高。本文提出针对多种中药材的多糖含量测定设计 开放性实验,以培养学生发现、分析、解决问题的能力。多糖通常指的是10个以上的单糖通过昔键共价连接的一类生物大分 子代谢物,在多种中药材中,都含有多糖。最初,人们认为多糖的活 性不强,在制备中药提取物的过程中,多糖常常作为杂质被除掉。20 世纪70年代以后,许多研究发现多糖广泛参与了细胞生命的生理调 节,在许多过程中都发挥了相当重要的作用:抗氧化损伤4-5、抗 癌抗菌6、抗炎7等。比如灵芝多糖就是灵芝中最有效的成分之一, 其具有多种药理活性,如提
4、高机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射等作用8; 铁皮石斛多糖同样是铁皮石斛的主要有效成分之一,其除了有免疫调 节功能、抗肿瘤功能,还具有降血糖、抗氧化、抗衰老的作用9。 所以,对于不少中药材来说,其多糖含量也是中药材质量控制的标准 之一。本文以灵芝多糖为例,以紫外-可见分光光度法来测定灵芝多 糖的含量10,开展开放性实验。1实验设计1实验目的(1)培养学生自主学习、自主查阅资料的能力。培养学生熟悉紫外-可见分光光度计的原理和操作。培养学生掌握紫外-可见分光光度计法测定不同药材的多糖含量。1.2 实验原理与方法(1)原理紫外-可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外-可见辐射 光后,发生了电子能级跃
5、迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各 自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也 就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线, 可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该 物质的含量11。硫酸;酮法是测定多糖含量的较为常用的方法,其原理是:多糖类在 浓硫酸的作用下水解为单糖,然后迅速脱水生成糠醛衍生物,其与意 酮结合成有色化合物,而且在适当波长下和一定浓度范围内其颜色深 度(吸光度值)与单糖含量成线性关系,从而可以通过比色测定其多糖 含量12T3。(2)方法本实验采用了灵芝粉末,运用紫外-分光光度法来测定多糖的总含量。 以不同浓度无水葡糖为对
6、照品溶液绘制标准曲线,将灵芝供试品溶液 所测吸光度代入标准曲线中,计算出灵芝多糖含量。(3)仪器UV-2700紫外分光光度计;石英比色皿;移液管;分液漏斗;水浴锅; 分析天平;滤纸;干燥箱;洗耳球;漏斗;圆底烧瓶;冷凝管;具塞 试管;容量瓶。1.3 实验内容(1)供试品的前处理对于未粉碎的供试品,小于500 g时全部用切片机切片,混匀,用四 分法缩分至约100 g;送检样品大于500 g,混匀,随机分取500 g, 切片,混匀,用四分法缩分至约100 go缩分的样品置60 C烘箱中 干燥4h,粉碎,全部过三号筛,封装于塑料自封袋中,干燥处保存。 对于粉末供试品,全部过三号筛,不通过部分,粉碎,
7、过三号筛,封 装于塑料自封袋中,干燥处保存。对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量,精密称重,加蒸镭水配成每1mL含0.12 mg的溶液。标准曲线的绘制精密量取对照品溶液0.2 mL. 0.4 mL. 0.6 mL、0.8矶、1.0 mL、1.2 mL,分别置于10 mL带塞试管中,然后加蒸播水至2.0 mL,迅 速精密加入硫酸;I酮溶液(精密称取意酮0. 1 g,加硫酸100 mL使溶 解,摇匀)6 mL,立即摇匀,放置15 min后,立即置冰浴中冷却15 min, 取出,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401), 在625 nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横
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- 关 键 词:
- 紫外 可见 分光光度法 测定 药材 多糖 含量 开放性 实验 设计
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