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1、微生物标本采集方法时间及注意事项第1页，本讲稿共20页微生物学及微生物学检验：是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴科学意义意义：及时准确的检验结果可以为临床感染性疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据第2页，本讲稿共20页标本采集重要性 重要性：重要性：微生物检验分析前质量控制的重微生物检验分析前质量控制的重要内容之一，即是对标本采取与处理的质要内容之一，即是对标本采取与处理的质量保证。正确的采取、处理与运送细菌培量保证。正确的采取、处理与运送细菌培养的标本是临床细菌检验成功的关键。如养的标本是临床细菌检验成功的关键。如标本采取或处理失当，造成污染，导致检标本采取或处理失
2、当，造成污染，导致检验结果给临床以误导，会延误对患者的正验结果给临床以误导，会延误对患者的正确治疗造成严重后果。确治疗造成严重后果。第3页，本讲稿共20页标本采集和运送基本原则发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级医院微生物标本送检率不应低于医院微生物标本送检率不应低于5050。标本容器必须无菌或清洁容器，盛标本容器须经灭菌处理，标本容器必须无菌或清洁容器，盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。但不得使用消毒剂。尽量在抗菌药物使用前采集标本。尽量在抗菌药物使用前采集标本。标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌
3、群标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。及其他杂菌污染。标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。送检标本应注明标本来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的送检标本应注明标本来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。第4页，本讲稿共20页无临床意义标本及建议 _ 标本类型 替代标本及建议 _ 烧伤、伤口拭子 重取组织或抽取物 褥疮拭子 重取组织或抽取物 静脉曲张溃疡拭子或坏疽损伤拭子 重取组织或
4、抽取物 牙周或直肠周围拭子 重取组织或抽取物 新生儿胃抽取物 不处理 呕吐物或恶露 不处理 结肠造口术排出物 不处理 _第5页，本讲稿共20页各类标本的采集第6页，本讲稿共20页血液标本的采集 多次采集多次采集：菌血症患者多数为间歇性发作，病原菌周期性出现于血液中（随之可为无病菌时期。不管临床症状的严重程度如何，其血液中病原菌浓度还是处于相当低的水平），因此须在不同部位最少采血2次以提高阳性率 血量：成人每次量8-10ml；儿童3-5ml；婴儿；1-2ml 第7页，本讲稿共20页采集时间频率：1、一般情况 发热初期或高峰期及抗生素应用前 应用抗生素的在下次用药前想、或血药浓度 最低时采集标本2
5、、特殊情况 布鲁菌感染：最佳时间是发热期，还可24小时以内采集3-4套 急性心内膜炎：抗生素治疗前1-2h不同部位采集三瓶 亚急性心内膜炎：第一天24h内相隔1h，三个部位采集三套采集方法：选择静脉和穿刺点，75%酒精从中心点向外旋转消毒皮肤，再用碘酊按同样方法消毒，待干后用用酒精棉球擦去碘迹 去除培养瓶封帽，用75%酒精棉球消毒橡皮塞，待干 用采血针采集需要血量注入瓶中 嘱病人用无菌棉签按压3min，75%酒精擦去血迹并消毒注意事项注意事项：瓶盖不可用碘酒消毒严格做好抽血部位的消毒和无菌操作 采集后立即送检不能送检的室温保存不可冷藏第8页，本讲稿共20页脑脊液标本的采集采集时间：怀疑脑膜炎病
6、人应在使用抗生素前采集脑脊液采集方法：由临床医师无菌操作穿刺采集（成人：3-4腰椎间隙；小儿：4-5腰椎间隙），抽取脑脊液2-3ml。如需细菌培养应立即注入血培养瓶送检，如需涂片检查注入无菌试管，加盖送检注意事项：注意事项：脑炎奈瑟、肺链、嗜血等细菌离体后及易死亡，故须做培养的15min内注入血瓶；如需图片染色的15min内送至实验室如不能及时送检不可冷藏保温，天气寒冷应注意保温送检一面病原菌死亡影响检出率第9页，本讲稿共20页痰及其他呼吸道标本的采集采集时间：抗生素使用前，一般以晨痰为好采集方法：自然咳痰法：告知患者留痰前用冷开水或生理盐水反复漱口（有假牙者取下），用力咳出深部痰液 诱导咳痰
7、：对无痰少痰或者不易咳出者可用45加温生理盐水雾化吸入诱导咳出；小儿可轻压胸骨柄注意事项:常规标本需2h内送检，疑为嗜血杆菌、肺链感染标本应立即送检标本内勿混入唾液及咽部分泌物第10页，本讲稿共20页咽拭子、鼻咽拭子标本的收集 采集时间：应用抗生素之前，以晨起后采集为宜 采集方法：咽拭子：嘱患者以清水漱口，将病人舌头向外拉使悬雍垂尽量向外牵引，用无菌拭子擦去溃疡或创面浅表分泌物，再用拭子穿越舌根到咽后壁或悬雍垂后侧反复涂抹数次，放入无菌容器及时送检 鼻咽拭子：嘱患者以清水漱口，用拭子深入鼻腔内约1cm，在鼻内灶边缘部分先用力旋转拭子停留10-15s放入容器即使送检 注意事项：鼻咽部标本不能用来
8、检测鼻窦感染病原体 鼻咽部拭子不建议做常规细菌检查 第11页，本讲稿共20页尿液标本的留取 采集时间：抗生素应用前中段晨尿，必要时无菌操作进行导尿术或膀胱穿刺采集采集方法：成人：先以肥皂水清洗外阴，再以灭菌水洗净，弃去前段尿，留取中段约10ml于无菌带盖容器中立即送检 小儿：以无菌生理盐水洗净外阴将无菌尿杯对准尿道口，用胶布固定，取后立即送检 置留导管：先夹住导尿管，以75%酒精消毒专门采集口用针筒抽取新鲜尿液5-10ml，置于无菌尿杯中及时送检注意事项：严格无菌操作 2h内送检不得添加防腐剂长期留置导尿管病人常规尿液细菌培养没有临床意义第12页，本讲稿共20页穿刺液标本的采集采集时间：抗生素
9、使用前停止用药1-2天后下 次用药前血药浓度较低时抽取采集方法：2%碘酊充分消毒皮肤，用注射器一无菌操作方法抽取或引流体内可疑感染部位的体液（胸腔积液、腹水胆汁、心包积液、关节液、鞘膜液），将取得的穿刺液以无菌操作直接注入血培养瓶或无菌容器中，即使送检胸腔积液及腹水抽取5-10ml，心包液关节液一般1-5ml注意事项：一般以原始状态送检，勿以拭子送检第13页，本讲稿共20页脓液、烧伤创伤感染分泌物的收集采集时间：使用抗生素前停止用药1-2d后下次用药前血药浓度较低时采集方法：烧伤创面分泌物、开放性脓肿和脓肿性分泌物：以无菌生理盐水或75%酒精拭去溃疡表面渗出物，抽取脓液至于无菌杯中送检；如为拭
10、子送检则用无菌棉签擦取溃疡基底部分泌物后放入无菌试管送检。封闭性脓肿：以碘酒消毒皮肤黏膜表面，穿刺中心部位抽取3-10ml注入无菌容器或血培养瓶送检 脓疱或水疱：75%乙醇消毒、干燥，用针头挑破拭子采集疱液和基地层细胞标本即使送检注意事项：烧伤创面、脓肿标本不应采集表面或表皮组织 不提倡采集动物咬伤12小时内的伤口，除非存在感染指征第14页，本讲稿共20页粪便标本的采集采集时间：腹泻病人在急性期用药前采集 胃肠炎在急性期6h内采集新鲜脓血便采集方法：自然排便法：挑取脓血、粘液便2-3g，液体便采集絮状物2-3ml，置于无菌杯中即使送检 直肠拭子法：将无菌拭子用生理盐水湿润后插入职场4-5cm处
11、（幼儿2-3cm）在肛门括约肌处柔和旋转，见到拭子上明显带有粪便插入无菌试管及时送检注意事项：除排便困难外，不推荐使用拭子 标本不能混入尿液，消毒剂或者化学药物 标本应于1h内送检 腹泻患者建议多次送检以确定致病菌第15页，本讲稿共20页生殖道标本采集采集时间：使用抗生素前停止用药1-2d后下次用药前血药浓度较低时采集方法：宫颈分泌物：无菌拭子插入宫颈口1-2cm并旋转一周，停留大约10s后取出，放回无菌试管即使送检 阴道分泌物：拭去过多分泌物，以无菌拭子采集，放入无菌试管即使送检 女性尿道分泌物：先拭去尿道口渗出物，以无菌拭子擦入尿道在耻骨联合处按摩尿道，放入无菌试管即使送检 男性尿道分泌物
12、：清洗尿道口，以无菌拭子插入尿道2-4cm旋转后停留20s，取出拭子放入无菌试管送检；也可用挤压方法从尿道口挤出渗出物，以拭子送检 第16页，本讲稿共20页 前列腺分泌物：以肥皂水和清水清洗尿道口及附近皮肤，直肠按压按列腺获取分泌物以无菌杯采集或用无菌拭子送检 盆腔感染标本：在后穹窿通过穿刺采集标本注意事项：恶露标本不作为培养标本 疑为淋病奈瑟菌感染，标本应于15min内送检 细菌性阴道炎不建议做细菌培养，推荐常规检查确定 第17页，本讲稿共20页组织标本的采集采集时间：浅表皮肤黏膜：使用抗生素前采集 深部组织：手术室后内窥镜检查时采集采集方法：无菌操作留取标本于无菌杯中送检注意事项：严格无菌操作，少量标本应低价无菌生理盐水保持湿润 活检组织标本应在15min内送检 甲醛固定标本不能用于微生物检查第18页，本讲稿共20页院感标本的采集采集方法：空气标本：琼脂平板沉降法采集，取9cm直径普通营养琼脂培养基至于离地面1m的地方静置5min送检。室内面积30m2采用五点采样，30m2采用三点采样 物体表面标本：将浸有无菌稀释液的无菌棉拭子在5X5cm的正方形区域内擦拭 消毒剂标本：采用稀释中和法，将被检消毒液混匀后无菌吸取1ml加入到相应稀释液中混匀送检第19页，本讲稿共20页第20页，本讲稿共20页