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1、付兑市石事阳光实验学校 1 下列有关微生物营养物质的叙述，正确的是()A是碳源的物质不可能同时是氮源B碳源都能提供能量C除水以外的无机物只能提供无机盐D无机氮源也能提供能量【解析】A、B 选项的表达不完整。有的碳源只能是碳源，如 CO2，有的碳源可以同时是氮源，如 NH4HCO3，有的碳源可以同时是能源，如葡萄糖，有的碳源可以同时是氮源和能源；如蛋白胨。C 选项中，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样，如 CO2为自养型微生物的碳源，NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐，而NaCl 则只能提供无机盐。D 选项中，无机氮源提供能量的情况是存在的，如 NH3可以为硝化细菌提供能量和氮源。【
2、答案】D2关于配制培养基的叙述中，正确的是()A制作固体培养基必须加入琼脂B加入青霉素可得到放线菌C培养自生固氮菌不需氮源D发酵工程一般用半固体培养基【解析】固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的，但不是唯一的，青霉素可抑制细菌和放线菌的生长，发酵工程一般用液体培养基。自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故配制培养基时不需加氮源。【答案】C3下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌中的操作步骤，其中正确的是()A培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后，直接补充蒸馏水至 100 mLB用 1 mol/L NaOH 调试 pH，使 pH 为 5.06.0C加压至 98 kPa 之前，要彻底排出锅内的冷空气D将接种环放
3、在酒精灯上灼烧，灭菌后立即伸入菌种试管内挑取少量菌种【解析】A 选项该先加水，后加热溶化，否则培养基会被烧焦；B 选项用1 mol/L NaOH 调试 pH 是正确的，但金黄色葡萄球菌是细菌，本把 pH 调 7.47.6；C 选项加压至 98 kPa 之前，要彻底排出锅内的冷空气，是为了使高压锅能够在很短的时间内达到较高的温度，使锅内充满水蒸气，并使水蒸气分子运动达到尽可能快的速度，穿透各微生物菌体及芽孢；D 选项接种环放在酒精灯上灼烧灭菌是该的，但不能立即伸入菌种试管内，这样会烫死菌种。【答案】C4某同学在 101、102、103倍稀释液的平均菌落数为 2 760、295 和 46，则菌落总
4、数(个/mL)为()A2.76104B2.95104C4.6104D3.775104【解析】菌落计数法，注意是计算不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在 30300 之间的，当只有一个稀释倍的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落乘以稀释倍数即为该样品的细菌总数；若有两个稀释倍的平均菌落数均在 30300 之间，则按两者菌落总数之比值来决，若比值小于 2 采取两者的平均数，若大于2，则取其中较小的菌落总数。本题295、46 在 30300之间，46103与 295102比值为 1.6。取二者平均数(46103295102)23.775104。若所有稀释倍数的菌落数均不在 30300 之间
5、，则以最接近 300或 30 的平均菌落乘以稀释倍数。【答案】D5产生菌落的最初数目和培养基分别是()A同种少数细菌，液体培养基B许多细菌，液体培养基C同种少数细菌，固体培养基D许多细菌，固体培养基【解析】在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是不可见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是不可见的。当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围时，肉眼可见。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较的形态，因为这许多细菌第一不可能是同一种细菌，第二不可能在
6、培养基的同一个点上。【答案】C6分离纤维素分解菌的过程中操作有误的是()A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B富集培养这一步可省略；但培养纤维素分解菌少C经稀释培养后，用刚果红染色D对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上【解析】经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色，设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。【答案】A7(质检)甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不
7、能。下列说法正确的是()粉状硫K2HPO44FeSO40.蔗糖(NH4)2SO4H2OMgSO4CaCl210 gg5 g10 g0.4 g100 mL9.25 g0.5 g注：“”表示培养基中加入了这种物质，“”表示培养基中没有加入这种物质。A甲、乙、丙都是异养型微生物B甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物C甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物D甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物【解析】培养基缺少 N 素，培养基缺少有机物，营养全面。N 是微生物生长的必需元素，每一种微生物正常生长都需要 N，但自己能够固氮的微生物可以生活在无氮培养基上。甲能在上生长繁殖，而
8、乙、丙都不能，说明甲是能够固氮的微生物；乙能在中生长繁殖，甲、丙不能，说明乙不需要培养基为它的正常生命活动提供能源物质，乙一为自养型微生物，甲、丙一都为异养型微生物。【答案】D8 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了。包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)对培养基进行灭菌，该采用的方法是_。(3)为了使该所得结果可靠，还该同时在另一平板上接种_作为对照进行。(4)培养 20 小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细
9、菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)如果要检测水中是否含有大肠杆菌，培养基中还加入_。【解析】(1)蛋白胨可提供氮源、碳源、维生素，而淀粉可提供碳源，除此之外，微生物的生长还需要无机盐和水。(2)对培养基的灭菌，在室内常用高压蒸汽灭菌法。(3)在的过程中，除变量以外其他各变量均适且相同，以利于更好地实现目的。(4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如形状、颜色、大小、隆起程度)。(5)培养基中加入某种试剂，以鉴别某种微生物是否存在，称为鉴别培养基。大肠杆菌用伊红美蓝鉴别。【答案】(1)氮源(碳源不作要求)碳源水无机盐(后两空顺序可颠倒)(2)高压蒸汽灭菌(3)无菌水(4)
10、多大(或严重)(5)伊红美蓝9纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而组成的高分子化合物，广泛存在于植物的根、叶、茎器官中，根据人们的需要，有时要对纤维素进行相处理。(1)在生产果汁时为了解决果肉出汁率低的问题，人们使用_、纤维素酶处理。(2)目前纤维素酶的主要来源是分解纤维素的微生物，菌株选育是纤维素酶的基础性工作，以下流程为纤维素分解菌的分离纯化过程：土壤取样选择培养梯度稀释将菌悬液涂布到有特选择作用的培养基上挑选单个细菌发酵培养大量纤维素分解菌。人们在筛选过程中常用的方法是_，原理是_。与分离尿素分解菌的培养基相比，分离纤维素分解菌的培养基中添加的主要成分是_、_。(3)为了使纤维素分解菌能反复利
11、用可以采用_技术，它与酶相比优点有：_。(4)下图中属于上述技术得到的菌是()(5)下图中表示纤维素酶活性与 pH 变化的关系，若 pH=m 表示最适，在下列甲丁中最可能表示结果的曲线图上标出“m”的位置。【答案】(1)果酶(2)刚果红染色法纤维素被分解后，就无法形成刚果红纤维素复合物，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈纤维素、刚果红(3)固化细胞成本低，易操作，可以反复利用(4)D(5)10富集培养是微生物强有力的技术手段之一，主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制环境条件，使仅适该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的
12、特微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的过程。(1)本所需培养基为_，碳源为_。(2)原理是_。(3)重复培养的目的是_。(4)菌落是降解_的微生物。(5)为_组，为_组，设置的目的是_。(6)采用_法接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染注意的事项是_。【解析】从混合物中分离某种微生物要用选择培养基，利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使其成为一种“加富”培养基，可使该微生
13、物大量繁殖，在数量上超过原有占优势的微生物，以达到富集培养的目的，用于“加富”的一些物质主要是一些特殊的碳源和氮源。【答案】(1)选择培养基对羟基苯甲酸(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，分离出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物(3)增大对羟基苯甲酸微生物的比例(4)对羟基苯甲酸(5)对照说明通过富集培养的确得到了能降解对羟基苯甲酸的微生物(6)单细胞挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物11(质检)根据各类微生物的形态结构特点和陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微
14、镜镜检以及菌落特征可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写横线上的内容：首先配制一不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。(1)利用无氮培养基可以筛选出_。(2)用不含有有机碳源的选择培养基可筛选_。法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的其他微生物的生长受到抑制，而分离对象却可借机大大增殖。【答案】(1)圆褐固氮菌(2)硝化细菌(3)青霉素(4)金黄色葡萄球菌金黄(5)
15、深紫大肠杆菌(6)大肠杆菌、乳酸菌、(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入_。(4)用含较高浓度食盐的培养基可选择出_；或者根据菌落的颜色呈现_色，将其挑取单独培养。(5)利用伊红美蓝培养基培养混合菌，菌落呈_色并带有金属光的是_，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红美蓝鉴别培养基培养来确。(6)在无氧环境下培养混合菌，_可以生长，加入一浓度的乳酸，使培养基的pH 充分降低，可抑制_的生长，利用菌落的特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出_。(7)利用只含纤维素为碳源的液体培养基可筛选_。(8)若筛选尿细菌，则配制的培养基的特点是_。【解析】从混合样品中获得某种微生物的方法，通常有两种：第一种方法可利用该分离对象对某一营养物质有专一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使它成为一种加富培养基。采用这类“投其所好”的策略即可使该微生物大大增殖，在数量上超过原有占优势的微生物，以达到富集培养的目的。用于加富的一些物质主要是一些特殊的碳源和氮源，如纤维素可被用来富集分解纤维素的微生物，甘露醇用来富集自生固氮菌。第二种方酵母菌大肠杆菌、酵母菌乳酸菌(7)纤维杆菌氮源只含尿素(8)