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1、第二章 中药制剂的鉴别第一节 性状鉴别与物理常数的测定 第二节 显微鉴别第三节 理化鉴别第一节 性状鉴别与物理常数的测定一、性状鉴别二、物理常数的测定一、性状鉴别中药制剂的性状系指除去包装后的形状、大小、色泽、表面特征、气味等，有包衣的丸剂或片剂还应描述除去包衣后的丸心或片心的色泽及气味；硬胶囊剂应写明除去胶囊后内容物的性状。一种制剂的性状往往与投料的原料质量及生产工艺有关。原料质量保证、工艺恒定，成品的性状应基本一致。中药制剂的性状，能初步反映其质量状况，应与国家药品标准规定的性状相一致。一、性状鉴别的内容一、性状鉴别的内容1色泽色泽 系指在日光下观察的中药制剂的颜色及光泽度。常因制剂的品种
2、、原料的质量、所含成分、生产工艺、贮藏时间等有关，一般较为固定，为制剂质量的重要标志。色泽从单一色到组合色不等，描述时要准确，对于复方制剂要考虑到在贮藏期间颜色会变深，因此可根据实际观察情况规定幅度。制剂的色泽如以两种色调复合描述色泽时，应以后一种色调为主，如黄棕色，即以棕色为主；棕红色，即以红色为主。2形状或形态形状或形态 中药制剂组成复杂，制备工艺各异，剂型多样，其形态的描述也相当复杂，当药物形态发生改变时，可能是由于其质变、掺杂等引起。药物制剂的形状与设备模具有关，如栓剂可分为球形、鱼雷形、圆锥形、卵形、鸭嘴形等；液体可分粘稠液体、液体、澄清液体、澄明液体等。3气味气味 气是靠嗅闻获取药
3、物的特征信息。可分为香、芳香、清香、腥、臭、特异、羊膻气等。无特殊气存在，可用无臭或气微等词描述；当香气浓厚时用芳香浓郁来表示。味是靠口尝获取药物的特征信息。性状中的“味”与性味中的“味”不同。前者是口尝后的实际味感；后者是指药物的性能，与实际口尝的味感不一定相符。制剂的味感与其所含的成分密切相关，如含挥发油的制剂常有辛辣味，含鞣质的制剂常有涩味，含有机酸的制剂常有酸味，含糖类成分的制剂常有甜味，含无机盐的制剂多有咸味，含生物碱及苷类成分的制剂多有苦味，含有毒成分的制剂常有麻舌感等。味感的强弱是衡量药材质量的重要指标，味可分为酸、甜、苦、涩、辛、凉、咸、辣、麻等；也可用混合味如清凉、辛凉、麻辣
4、等进行描述。口尝制剂时应掌握舌各部位对味觉的敏感程度，一般地说，舌尖部只对甜味较敏感，舌根部对苦味较敏感，所以口尝时，要取少量有代表性的样品，咀嚼至少1min，使舌的各部位都充分与药液接触，这样才能准确地尝到药味。4其他其他 含有滑石的制剂，手捻有滑腻感；有些因工艺和药物组成的原因具有光泽感。二、物理常数的测定三、物理常数测定三、物理常数测定(一)相对密度测定法(二)熔点测定法(三)旋光度测定法(四)折光率测定法(五)凝点测定法(六)pH值测定法(一)相对密度测定法相对密度系指在相同的温度和压力条件下，待测物质的密度与参考物质(水)的密度之比。除另有规定外，均指20时的比值。某些药品具有一定的
5、相对密度，当其纯度变更，相对密度亦随之改变，因此，测定相对密度，可以区别或检查药品的纯度。相对密度测定法，只限于液体制剂。测定方法有两种，即比重瓶法和韦氏比重秤法。一般用比重瓶法，采用此法时的环境温度应略低于20。测定易挥发液体的相对密度时，宜采用韦氏比重秤法。（一）比重瓶法（一）比重瓶法图37 比重瓶(一)相对密度测定法1测定方法测定方法甲法：取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶(如图37)，装满供试品(温度应低于20或各药品项下规定的温度)后，装上温度计(瓶中应无气泡)，置20水浴中放置1020min，使内容物的温度达到20，用滤纸除去溢出侧管的液体，立即盖上罩。然后将比重瓶自水浴中取出，再
6、用滤纸将比重瓶的外面擦干，精密称定，减去比重瓶的重量，求得供试品的重量后，将供试品倾去，洗净比重瓶，装满新沸过的冷蒸馏水，再照上法测得同一温度时水的重量，按下式计算，即得。相对密度图38 比重瓶乙法：取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶(如图38)，装满供试品(温度应低于20或各药品项下规定的温度)后，置20(或各药品项下规定的温度)的水浴中，放置102Omin，插入中心有毛细孔的瓶塞，使过多的液体从塞孔溢出，并用滤纸将瓶塞顶端擦干，照上述甲法，自“然后将比重瓶自水浴中取出”起测定，即得。(一)相对密度测定法2注意事项注意事项(1)比重瓶必须洁净干燥，操作顺序为先称量空比重瓶重，再装供试品称重，
7、最后装水称重。(2)装过供试液的比重瓶必须冲洗干净，如供试液为油剂，测定后应尽量倾去，连同瓶塞先用石油醚和氯仿冲洗数次，待油完全洗去，再以乙醇、水冲洗干净，再依法测定水重。(3)供试液及水装瓶时，应小心沿壁倒入比重瓶内，避免产生气泡；如有气泡，应稍放置待气泡消失后再调温称重。供试液如为糖浆剂、甘油等粘稠液体，装瓶时更应缓慢沿壁倒入，以免产生气泡，影响测定结果。(4)调温度时先将供试品充满瓶内，不加瓶塞，将瓶放置水浴中调温，浸渍1020min使达20，水浴温度依气温而定，如在冬天，室温低，水浴温度可比规定温度高些，使放置后，温度可降到20，再维持一段时间使内外温度达到平衡；若在夏天，室温高，水浴
8、温度可低些，使放置后，温度可升至20。(一)相对密度测定法(5)室温如果高于规定温度20时，药典规定用韦氏比重秤测定，如无比重秤，仍可用比重瓶测定。可先将供试液调到略低于20，再注入比重瓶内依法调到20，这样可避免供试液因温度降低而体积缩小再补充时又要调温。称重时需迅速进行，以免液体膨胀从瓶塞毛细管溢出。称时可用一表面皿与比重瓶一起称，以免液体溢出污染天平，同时室温超过20往往使比重瓶在称重时有水蒸气冷凝于比重瓶外壁，故须迅速称重。(6)温度调好后，将瓶塞小心塞紧。瓶塞毛细管必须充满液体，瓶内应无气泡。用滤纸将瓶塞毛细管顶端溢出的液体拭干，再用洁布将瓶全部拭干，此时只能用手指拿住瓶颈，而不能拿
9、瓶肚，以免液体因手温影响致而体积膨胀外溢。(一)相对密度测定法（二）韦氏比重秤法（二）韦氏比重秤法易挥发的液体样品，若直接用比重瓶法测定，挥发性成分会损失，影响测定结果的准确，因此采用韦氏比重秤法测定其相对密度。1.原理：原理：根据阿基米德定律，一定体积的物体(如比重秤的玻璃锤)在各种液体中所受的浮力与该液体的相对密度呈正比。2.装置：装置：由玻璃沉锤、横梁、支柱、砝码与玻璃筒等五部分构成(图39)。根据玻璃锤体积大小不同，分为20时相对密度为1和4时相对密度为1的韦氏比重秤。图39 韦氏比重秤(一)相对密度测定法3.测定方法：测定方法：取20时相对密度为1的韦氏比重秤，用新沸过的冷蒸馏水将所
10、附玻璃圆筒装至八分满，置20(或各药品项下规定的温度)的水浴中，搅动玻璃圆筒内的水，调节温度至20(或各药品项下规定的温度)，将悬于秤端的玻璃锤浸入圆筒内的水中，秤臂右端悬挂游码于1.0000处，调节秤臂左端平衡用的螺旋使平衡，然后将玻璃圆筒内的水倾去，拭干，装入供试液至相同的高度，并用同法调节温度后，再把拭干的玻璃锤浸入供试液中，调节秤臂上游码的数量与位置使平衡，读取数值，即得供试品的相对密度。如该比重秤系在4时相对密度为1，则用蒸馏水校准时游码应悬挂于0.9982处，计算时，应将在20测得的供试品相对密度除以0.9982。4.注意事项：注意事项：韦氏比重秤应安装在固定平放的操作台上，避免受
11、热、冷、气流及震动的影响；玻璃圆筒应洁净，在装水及供试液时的高度应一致；玻璃锤应全部浸入液面内，使玻璃锤沉入液面的深度前后一致。(二)熔点测定法熔点系指一种物质按照规定方法测定由固相熔化成液相时的温度，是物质的一项物理常数。一般地，纯的固体物质都有一定的熔点，熔距在12；不纯的固体物质虽有一定的熔融范围，但熔距较长。因此，依法测定熔点，可以鉴别或检查药品的纯度。根据物质的性质不同，测定方法可分为三种。（一）易粉碎的固体药品的测定法（一）易粉碎的固体药品的测定法取供试品适量，研成细粉，除另有规定外，应按照各药品项下干燥失重的条件进行干燥。熔点在135以上、受热不分解的供试品，可采用105干燥；熔
12、点在135以下或受热分解的供试品，可在五氧化二磷干燥器中干燥过夜或用其他适宜的方法干燥，如恒温减压干燥。(二)熔点测定法取供试品适量，置于熔点测定用毛细管中，轻击管壁或借助长短适宜的洁净玻璃管，垂直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上，将毛细管自上口放入使自由落下，反复数次，使粉末紧密集结在毛细管的熔封端。装入供试品的高度为3mm。另将温度计放入盛装传温液的容器中，使温度计汞球部的底端与容器的底部距离2.5cm以上(用内加热的容器，温度计汞球与加热器上表面距离2.5cm以上)；加入传温液以使传温液受热后的液面适在温度计的分浸线处。将传温液加热，待温度上升至较规定的熔点低限尚低10时，将装有供试品的
13、毛细管浸入传温液，贴附在温度计上(可用橡皮圈或毛细管夹固定)，位置须使毛细管的内容物部分适在温度计汞球中部；继续加热，调节升温速率为每分钟上升1.01.5，加热时须不断搅拌使传温液温度保持均匀。供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴时的温度，作为初熔温度；供试品全部液化时的温度，作为全熔温度。记录供试品在初熔至全熔时的温度，重复测定3次，取其平均值，即得。(二)熔点测定法测定熔融同时分解的供试品时，方法如上述，但调节升温速率使每分钟上升2.53.0；供试品开始局部液化时(或开始产生气泡时)的温度作为初熔温度；供试品固相消失全部液化时的温度作为全熔温度。遇有固相消失不明显时，应以供试品分解物开
14、始膨胀上升时温度作为全熔温度。某些药品无法分辨其初熔、全熔时，以其发生突变时的温度作为熔点。(二)熔点测定法（二）不易粉碎的固体药品的测定法（二）不易粉碎的固体药品的测定法脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等供试品不易粉碎，不能直接用粉末装入毛细管中，可先把供试品低温熔融后装入毛细管，待其凝固后再测定。具体方法如下：取供试品，注意用尽可能低的温度熔融后，吸入两端开口的毛细管中，使高达约10mm。在10或10以下的冷处静置24h，或置冰上放冷不少于2h，凝固后用橡皮圈将毛细管紧缚在温度计上，使毛细管的内容物部分适在温度计汞球中部。照第一法将毛细管连同温度计浸入传温液中，供试品的上端应适在传温液液面下约1
15、0mm1mm处；小心加热，待温度上升至较规定的熔点低限尚低约5.00.5时，调节升温速率使每分钟上升不超过0.30.5，至供试品在毛细管中开始上升时，检读温度计上显示的温度，即得。(二)熔点测定法（三）凡士林或其他类似物质的测定法（三）凡士林或其他类似物质的测定法取供试品适量，缓缓搅拌并加热至温度达9092时，放入一平底耐热容器中，使供试品厚度达到12mm1mm，放冷至较规定的熔点上限高810；取刻度为0.2、水银球长1828mm、直径56mm的温度计(其上部预先套上软木塞，在塞子边缘开一小槽)，使冷至5后，擦干并小心地将温度计汞球部垂直插入上述熔融的供试品中，直至碰到容器的底部(浸没12mm
16、)，随即取出，直立悬置，待粘附在温度计球部的供试品表面浑浊，将温度计浸入16以下的水中5min，取出，再将温度计插入一外径约25mm、长150mm的试管中，塞紧，使温度计悬于其中，并使温度计球部的底端距试管底部约为15mm；将试管浸入约16的水浴中，调节试管的高度使温度计的分浸线同水面相平；加热水浴温度以每分钟2的速率升至38，再以每分钟1的速率升温至供试品的第一滴脱离温度计为止；检读温度计上显示的温度，即可作为供试品的近似熔点。再取供试品，照前法反复测定数次；如前后3次测得的熔点相差不超过1，可取3次的平均值作为供试品的熔点；如3次测得的熔点相差超过1时，可再测定2次，并取5次的平均值作为供
17、试品的熔点(二)熔点测定法（四）注意事项（四）注意事项1.供试品应完全干燥后再测，若含有水分加热后水会成为液滴，而不是供试品熔融。并且水分的存在，也影响供试品本身的熔点。2.测熔点用的毛细管应由中性硬质玻璃管制成，长9cm以上，内径0.91.1mm，壁厚0.100.15mm，洁净，一端熔封，底部封闭无孔隙。3.毛细管内装入供试品的量对熔点测点结果有影响，所以毛细管内装入供试品的高度以3mm为宜。同时供试品应研细装紧，无气泡，保证传热均匀，熔点变化明显，准确观察熔距。4.升温速度对熔点测定结果有影响，所以应严格控制升温速度。5.测定熔点过程中遇有“发毛”、“收缩”、“软化”及“出汗”等变化过程，
18、均不作初熔判断，在这几个过程后而形成的“软质柱状物”尚无液滴出现，亦不作初熔判断，只有在熔点测定管内开始局部液化(出现明显液滴)时的温度，才作为初熔温度，供试品全部液化(澄明)时的温度，作为全熔温度。供试品“发毛”、“收缩”及“软化”阶段时间长时，反映供试品质量较差，测定熔点至少应测3次，求其平均值。(二)熔点测定法上述用语的含义为：“发毛”指内容物受热后膨胀发松物面不平的现象；“收缩”指内容物在“发毛”后，向中心聚集紧缩或贴在某一边壁上的现象；“软化”指内容物在收缩同时或在收缩以后变软而形成软质柱状物，并向下弯塌的现象；“出汗”指内容物收缩后在毛细管内壁出现细微液滴，但尚未出现局部液化的明显
19、液滴和持续的熔融过程。6.对于易升华或易潮解的药品，可封闭在毛细管内，然后测定其熔点，易升华的药品应将毛细管全部浸入传温液内(可用白金丝将毛细管缚在温度计上)。7.供试品的熔点在80以下者，传温液用水；供试品的熔点在80以上者，传温液用硅油或液状石蜡。8.测定熔点所用的温度计应先进行校正。校正方法是将待校温度计用对照品按 中国药典规定方法细心测得各熔点3次，取平均值，并以待校温度计读数为横坐标，校正值为纵坐标，绘制校正曲线，以后该温度计的校正值即由此曲线查得。亦可用已知熔点的标准品与供试品同时测定，以校正温度计的误差。熔点测定校正温度常用标准品有:香草醛(83)、乙酰苯胺(116)、非那西汀(
20、136)、磺胺(166)、茴香酸(185)、磺胺二甲嘧啶(200)、双氰胺(210.5)、糖精(229)、咖啡因(237)、酚酞(263)。(三)旋光度测定法（一）原理（一）原理含有手性碳原子的有机化合物多具有旋光性，当平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。旋转的度数，称为旋光度。影响物质旋光度的因素很多，除化合物本身的特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。当偏振光通过长1dm、每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长和温度下，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以tD表示。比旋度是物质的物理常
21、数。因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯度。由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，因而还可以用来测定成分含量。(三)旋光度测定法（二）测定方法（二）测定方法旋光度用旋光仪测定，药典制定采用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm(如使用其他管长，应进行换算)，测定温度为20。旋光计的检定，可用标准石英旋光管进行，读数误差应符合规定。测定旋光度时，用读数至0.01o并经过检定的旋光计。将测定管用供试液体或溶液(取固体供试品，按各药品项下的方法制成)冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量(注意勿使发生气泡)，置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。使
22、偏振光向右旋转者(顺时针方向)为右旋，以“+”号表示；使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左旋，以“-”号表示。用同法读取旋光度3次，取3次的平均值，按下列公式计算，即得供试品的比旋度。液体供试品:t D固体供试品:t D式中:为比旋度，D为钠光谱的D线，t为测定时的温度()，L为测定管长度(dm)，为测得的旋光度，d为液体的相对密度，c为每100ml溶液中含有被测物质的重量(g，按干燥品或无水物计算)。(三)旋光度测定法（三）注意事项（三）注意事项1.温度对旋光度影响不大的供试品，可在室温下测定。对温度有严格要求的供试品，必须按规定执行，以免造成误差。2.钠光灯启辉后至少20min后发光才能稳
23、定，测定或读数时应在钠光灯稳定后读取，测定时钠光灯尽量使用直流电路供电。3.测定零点或停点时，必须按动复测按纽数次，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位，减少仪器的机械误差。同时通过观察左右复测数次的停点，检查仪器的重复性和稳定性，必要时也可用旋光标准石英管校正仪器的准确度。4.测定管若有气泡，应先使气泡浮于凸颈处或除去。透光面两端的玻璃应用软布擦干，测定管两端的螺帽应旋至适中位置，过紧容易产生应力，过松容易漏液。测定管旋转时应注意标记的位置和方向。读取零点或停点应重复3次。(三)旋光度测定法5.往测试管加入供试品溶液时，应反复用供试品溶液冲洗测试管数次，以免供试液浓度改变。6.浑浊或含有小颗粒
24、的溶液不能测定，应先将溶液离心或滤过，弃去初滤液后取滤液测定。7.有些化合物遇光后旋光度变化很大，应绝对避光操作，有些化合物对放置时间要求很严格，必须完全按照规定的时间测定读数。8.仪器的各个光学镜片应保持干燥清洁，防止灰尘和油污的污染，钠灯有一定的使用寿命，连续使用一般不超过4h，亦不可瞬间内反复开关。9.测定结束后测试管必须洗净晾干，以备下次再用。(四)折光率测定法（一）原理（一）原理光线自一种透明介质进入另一种透明介质时，由于两种介质的密度不同，光的传播速度发生变化，其进行方向也会改变，即发生折射现象。一般折光率系指光线在空气中进行的速度与在供试品中进行速度的比值。物质的折光率因温度或光
25、线波长的不同而异，透光物质的温度升高，折光率变小；光线的波长越短，折光率就越大。折光率以ntD表示，D为钠光谱的D线，t为测定时的温度。药典规定采用钠光谱的D线(589.3nm)测定供试品相对于空气的折光率(如用阿培氏折光计，可用白光光源)，除另有规定外，供试品温度为20。测定折光率可以区别不同的油类或检查某些药品的纯度。(四)折光率测定法（二）折光仪的要求和校正（二）折光仪的要求和校正测定用的折光计需能读数至0.0001，测量范围1.31.7，如用阿培氏折光计或与其相当的仪器，测量后可重复读数2次，测定前，折光计读数应用校正用棱镜或水进行校正，20时水的折光率为1.3330，25时为1.33
26、25，40时为1.3305。（三）折光仪的使用方法（三）折光仪的使用方法测定时应先将仪器置于有充足光线的平台上，但不可受日光直射，并装上温度计，置20恒温室中至少1h，或连接20恒温水浴至少30min，以保持稳定的温度，然后使折射棱镜上透光处朝向光源，将镜筒拉向观察者，使成一适当倾斜度，对准反射镜，使视野内光线最明亮为止。将下折射棱镜拉开，用玻棒或吸管蘸取供试品约12滴，滴于下棱镜面上，然后将上下棱镜关合并拉紧扳手。转动刻度尺调节钮，使读数在供试品折光率附近，旋转补偿旋钮，使视野内虹彩消失，并有清晰的明暗分界线。再转动刻度尺的调节钮，使视野的明暗分界线恰位于视野内十字交叉处，记下刻度尺上的读数
27、。投影式折光计在读数时眼睛应与读数垂直，测量后要求再重复读数2次，取3次读数的平均值，即为供试品的折光率。(四)折光率测定法（四）注意事项（四）注意事项1.大多数供试品的折光率受温度影响较大，一般是温度升高折光率降低，但不同物质升高或降低的值也不同，因此在测定时温度应恒定0.5h以上。2.上下棱镜必须清洁，勿用粗糙的纸或酸性乙醚擦拭棱镜，勿用折光计测试强酸性、强碱性或有腐蚀性的供试品。3.滴加供试品时注意棒或滴管尖不要触及棱镜，否则易造成棱镜划痕。加入量要适中，使在棱镜上生成一均匀的薄层。供试品过多，会流出棱镜外部；供试品太少，能使视野模糊不清，同时勿使气泡进入样品，以免影响折光率。4.读数时
28、视野中的黑白交叉线必须明显，且明确的位于十字交叉线上，除调节色散补偿旋钮外，还应调节下部反射镜或上棱镜透光处的光亮强度。5.测定挥发性液体时，可将上下棱镜关闭，将测定液沿棱镜进样孔流入，要随加随读；测固体样品或用标准玻片校正仪器时，只能将供试品或标准玻片置于测定棱镜上，而不能关闭上下棱镜。6.测定结束时，必须用能溶解供试品的溶剂，如水、乙醇或乙醚将上下棱镜擦拭干净，晾干。(五)凝点测定法(六)pH值测定法第二节 显微鉴别一、操作方法二、应用举例一、操作方法(一)处方分析(二)显微制片(三)显微观察(四)显微测量(五)显微化学鉴别(一)处方分析中药制剂的显微鉴别不同于单味药材的粉末鉴别，其多药味
29、的组成、各种加工手段及制备过程中加入的辅料都会对处方原料药材的显微特征产生干扰，使某些显微特征发生改变，甚至消失。因此，在进行中药制剂的显微鉴别时，不能简单地直接选用单味药材的鉴别特征，而必须进行处方分析。首先，根据处方组成及制备工艺，对制剂中含有的原药材粉末的显微特征逐一进行全面的观察和比较，排除类似的、易相互干扰或因加工而消失的特征，选取该药材在本制剂中易观察、专属性强的显微特征12个，作为能表明该药味存在的鉴别依据。若为两味或两味以上药材所共有的特征，则不应选为鉴别指标。其次，对处方组成中药味较多的中药制剂，一般不要求逐个进行鉴别。在鉴别药味的选择上，应首选主药、辅药、贵重药和毒性药，因
30、其短缺、价格昂贵或基于安全的考虑，在生产过程中，此类药物不投料、少投料或用其他药材替代投料的现象时有发生。对投料量少或缺少专属特征的药材可不作分析。国家药品标准规定的制剂中各药材的显微特征，都是经处方分析后选取的专属性鉴别特征，可直接依据规定进行显微鉴别。(二)显微制片显微制片是指在进行显微鉴别时，将样品制成适合镜检的显微标本片。显微标本片制作质量的好坏，直接影响观察效果。制片过程中，常需根据不同的剂型与观察内容，用不同的试液对样品进行适当的处理后再封片观察。（一）常用透明剂及显微化学定性试剂（一）常用透明剂及显微化学定性试剂1常用透明剂常用透明剂 中药制剂的显微鉴别常用的透明剂有水、稀甘油、
31、甘油醋酸液(斯氏液)、水合氯醛液等：水或稀甘油：常用于标本片的暂时封藏，为物理性的透明剂，可较快透入组织，形成良好的透光条件，适于观察细胞壁颜色，细胞内含有的淀粉粒、糊粉粒、油滴、树脂等。甘油醋酸液：多用于观察淀粉粒的形态，可使淀粉粒不膨胀变形，便于测量其大小。蒸馏水或5KOH液：可观察菌类药材的菌丝团块和菌丝。水合氯醛液：为最常用的透明剂，水合氯醛液加热透化装片，可溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿素、树脂、挥发油等，并能使已收缩的细胞膨胀，故有良好的透明作用，适于观察组织构造、细胞形状、草酸钙结晶等；水合氯醛液不加热装片(冷装)或用乙醇装片可观察菊糖、橙皮苷结晶等。水合氯醛试液透化装片时，易析出水合
32、氯醛结晶，影响观察，可在透化后加稀甘油或甘油乙醇试液12滴，以防止结晶析出。(二)显微制片2.常用显微化学定性试剂常用显微化学定性试剂 用于细胞壁及细胞内含物定性检查的试剂主要有：间苯三酚盐酸试液：可使木质化细胞壁显红色或紫红色，颜色的深浅视木化程度而异。氯化锌碘试液：能使纤维素细胞壁显蓝色或紫色，木质化细胞壁显黄棕色；还可使淀粉粒膨胀并变成蓝色。碘试液：可使淀粉粒显蓝色或紫色，蛋白质或糊粉粒显棕色或黄棕色。萘酚试液：与浓硫酸合用，可使菊糖显紫红色，并逐渐溶解。硝酸汞试液(米隆氏试液)：可使糊粉粒显砖红色。苏丹试液：可使木栓化、角质化细胞壁显红色，挥发油、脂肪油、树脂等显红色或淡红色。50硫酸
33、：可使草酸钙结晶溶解，生成硫酸钙针晶；碳酸钙结晶溶解，生成硫酸钙针晶，同时产生二氧化碳气泡。稀盐酸：可使草酸钙结晶溶解，碳酸钙结晶溶解并产生二氧化碳气泡。氢氟酸：可使硅质块溶解。钌红试液：可使多数粘液质、树胶显红色或粉红色。(二)显微制片（二）显微制片法（二）显微制片法显微制片的方法很多，如徒手切片法、整体封片法、粉末制片法、离析法、涂片法、磨片法等。中药制剂的显微鉴别主要采用粉末制片法和解离组织制片法。1粉末制片法粉末制片法(1)操作方法：操作方法：供试品粉末需过四号筛，采用下列三种方式制片：粉末冷装片：用解剖针挑取粉末少许，置载玻片中央偏右处，滴加适宜的透明剂12滴，搅匀，用左手食指与拇指
34、夹持盖玻片的边缘，使其左侧与药液层左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧，轻轻下放，使液体逐渐扩延充满盖玻片下方。若液体未充满盖玻片，应从空隙相对的边缘滴加液体，以防产生气泡；若液体过多，用滤纸吸去溢出的液体，即可镜检。水合氯醛液透化装片：挑取粉末少许，置载玻片中央偏右处，滴加水合氯醛试液12滴，搅匀，用试管夹执载玻片一端，保持水平置酒精灯火焰上方约12cm处加热，微沸后，离开火焰，再滴加水合氯醛试液，小火继续加热，如此反复操作至透化清晰。为避免析出水合氯醛结晶，放冷后滴加稀甘油12滴，封片镜检。混悬液装片：中药制剂中需检查的药味较多或含淀粉粒较多时，可取粉末适量，置试管或小烧杯中
35、，加入水合氯醛试液，加热透化后，用吸管吸取适量混悬液，再装片观察。(二)显微制片(2)注意事项：注意事项：透明剂的选用原则：在进行未知粉末装片时，一般先用水、稀甘油或甘油醋酸装片，观察记录后再用水合氯醛冷装或透化装片，最后可滴加其他理化试剂进行显微观察。装片用的液体如易挥发，装片后应立即观察；用水装片也较易蒸发而干涸，滴加少许甘油可延长保存时间。应注意防止制片时产生气泡，干扰观察：用水或稀甘油装片时，先加少量乙醇使其润湿，可避免或减少气泡的产生；反复将盖片沿一侧轻轻抬起，可使多数气泡逸出；用水合氯醛试液透化处理时，加热温度不易过高，以防水合氯醛试液沸腾，使组织中带入气泡；搅拌时产生的气泡可随时
36、用针将其移出；菌类中药粉末一般用蒸馏水装片，若用稀甘油装片，因其渗透性较差，粉末易成团并形成大量气泡。(二)显微制片2解离组织制片法解离组织制片法 若粉末粒度较大，木化组织较多，细胞彼此不易分离时，可用解离试液使组织中各细胞间的胞间质溶解，细胞分离，以观察细胞的完整形态。常用的解离方法有氢氧化钾法、硝铬酸法和氯酸钾法。如供试品中薄壁组织占大部分，木化组织较少或分散存在，可用氢氧化钾法；如供试品坚硬，木化组织较多或集成较大群束，可用硝铬酸法或氯酸钾法。(1)氢氧化钾法：氢氧化钾法：将供试品置试管中，加5氢氧化钾溶液适量，浸泡或加热至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去碱液，加水洗涤后，取少量置载玻片上，
37、用解剖针撕开，以稀甘油装片观察。(2)硝铬酸法：硝铬酸法：将供试品置小烧杯中，加硝铬酸试液适量，使之浸没供试品，浸泡或在水浴上微温，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少量置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油装片观察。(3)氯酸钾法：氯酸钾法：将供试品置试管中，加硝酸溶液(12)及氯酸钾少量，缓缓加热，待产生的气泡渐少时，再及时加入氯酸钾少量，以维持气泡稳定发生，至用玻璃棒挤压能离散为止，倾去酸液，加水洗涤后，取少量置载玻片上，用解剖针撕开，以稀甘油装片观察。(二)显微制片（三）中药制剂的取样与制片（三）中药制剂的取样与制片中药制剂的组成中，除有药材细粉外，还可能有药材提取物、辅料
38、或包衣，故显微鉴别时，应按剂型不同，采用不同的取样制片方法。取样要有代表性和适当的数量，应注意各部位的全面性。1.散剂、胶囊剂散剂、胶囊剂 可直接取粉末装片或透化装片。2.片剂片剂 可取23片研细后，混匀，再取粉末适量装片或透化装片。3.丸剂丸剂(1)水丸：水丸：可取数丸置乳钵中研细，混匀，再取适量粉末装片；或取粉末适量置小容器内，加水合氯醛透化(加适量甘油，以防水合氯醛结晶析出)，搅匀，用吸管吸取混悬液装片。若系包衣水丸可刮去包衣，将丸衣、丸心分别制片。(2)蜜丸：蜜丸：可将丸药沿正中切开，从切面由外至内刮取少许样品，置载玻片上，滴加适宜的透明剂，用玻棒搅匀，按粉末制片法装片；或将样品切碎放
39、入容器，加水搅拌洗涤，然后置离心管中离心沉淀，如此反复至蜜除尽，取沉淀装片；也可刮取少许样品用常用的解离试剂处理，使组织离解，再制片观察。4.含升华性成分的制剂含升华性成分的制剂 可取其粉末进行微量升华，收集升华物进行显微观察(三)显微观察显微观察时要根据处方分析的结果或药品标准的规定，有目的、按步骤地观察组成药物的显微特征，一般需观察5个以上显微标本片，根据能否观察到某药材的专属性特征，判断制剂中该药材是否存在。若观察不到该药材特征，可再用其他方法如理化鉴别、含量测定等做进一步分析。（一）显微观察要点（一）显微观察要点中药制剂的原料药材包括植物、动物和矿物三大类，来源于相同药用部位的药材，其
40、显微特征常具有一定的规律性，在进行显微鉴别时，应根据处方原料的来源，有重点的进行观察。现按药用部位简单介绍各类药材显微观察要点。(三)显微观察1.根类中药根类中药 可检出的特征主要有导管、石细胞、纤维、分泌组织、根被、木栓组织、淀粉粒、草酸钙结晶等。应注意导管的类型、直径、木化程度及穿孔板的类型；纤维和石细胞的形状、壁的增厚程度、孔沟的有无和疏密，是否存在晶纤维和含晶石细胞；分泌组织有乳管、粘液细胞、分泌腔、分泌道等，应注意其形状、分泌物的颜色；根被细胞的排列情况及是否有增厚的条纹；木栓细胞表面观多为多角形，排列紧密，应注意壁的增厚情况，是否含有色素；淀粉粒的形状、大小，层纹及脐点是否明显；菊
41、糖的有无和草酸钙结晶的类型等。另外，还应注意一些特殊的薄壁细胞及块状物，如当归的韧皮薄壁细胞呈纺锤形，表面有微细斜向交错的纹理，地黄的薄壁细胞中含棕色的核状物均是中药制剂中检出该药味是否存在的依据。(三)显微观察2.根茎类中药根茎类中药 蕨类植物根茎，可察见管胞、筛胞、鳞叶组织碎片、厚壁组织等特征。应注意管胞、筛胞的大小，纹孔类型及分布；鳞叶薄壁细胞、内皮层细胞的形状和排列方式，垂周壁平直还是弯曲，鳞叶边缘有无附属物等特征；下皮厚壁细胞一般为纤维状，具纹孔；分泌细胞较少，有的具间隙腺毛，如绵马贯众。双子叶植物根茎，其粉末特征与根类中药粉末特征相似，不同点：淀粉粒有时较大；有鳞叶组织，鳞叶表皮细
42、胞壁常呈波状弯曲，或不均匀增厚，如黄连。单子叶植物根茎，应注意鳞叶组织碎片、保护组织碎片的细胞层数，壁的特征，细胞的大小、形状及排列方式，有无毛状物；内皮层细胞壁增厚情况；草酸钙结晶以针晶较多，常存在于大形的粘液细胞中；淀粉粒众多；分泌组织有粘液细胞、油细胞、树脂道等。鳞茎的淀粉粒极多，应注意淀粉粒的多脐点现象；鳞茎粉末中有时可见到气孔，应注意气孔在表皮的分布密度，气孔类型等。(三)显微观察3.茎木类中药茎木类中药 茎木类中药的观察要点基本同根类中药。不同点：表皮细胞角质层一般较厚，应注意角质层的颜色、厚度、表面平滑与否及纹理的有无；纤维普遍存在，应注意纤维的形状、长短、直径、孔沟、壁厚度及木
43、化程度，有的纤维外围薄壁细胞中有方晶或硅质块；石细胞常见，一般较大，形状多样；草酸钙结晶一般以簇晶、方晶较多见；淀粉粒少见。4.皮类中药皮类中药 皮类中药粉末主要有筛管或筛胞、木栓细胞、韧皮纤维、石细胞、分泌组织、草酸钙结晶、淀粉粒等特征。应注意筛管或筛胞的大小，单筛板或复筛板，侧壁上有无筛域，筛域的形状、大小、数目及排列形式；木栓细胞的形状、大小、颜色及壁的增厚情况；韧皮纤维或石细胞的形状、壁厚，层纹、纹孔是否明显，有无内含物，有无分枝，还应注意有无晶纤维、嵌晶纤维、嵌晶石细胞等特征；分泌组织的类型、形状；草酸钙结晶多为方晶及簇晶，砂晶及针晶较少；淀粉粒的形状、大小，层纹、脐点是否明显等。皮
44、类中药的粉末中不应含有木质部的组织，如导管、管胞、木纤维等。(三)显微观察5.叶类中药叶类中药 应注意上下表皮细胞的形状，垂周壁的状况，角质层纹理；腺毛、非腺毛的颜色、形状、细胞数、壁厚度及表面有无壁疣或角质纹理；气孔的类型、分布密度、排列方式等。另外，厚壁组织、分泌组织及草酸钙结晶等也有鉴别意义。6.花类中药花类中药 以观察花萼、花冠的表皮细胞及其毛茸，雄蕊中的花粉粒、花粉囊内壁细胞，雌蕊的柱头表皮细胞为重点。其中花萼、花冠的特征与叶类似，应注意表皮上气孔、毛茸情况，花冠上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起；花粉粒形状多样，通常外壁有各种纹饰，应注意其形状、大小、萌发孔的类型及数目、花粉壁构造；
45、花粉囊内壁细胞的壁常不均匀增厚，呈网状、螺旋状、环状或点状等，并大多木化。雌蕊的柱头表皮细胞常呈乳头状突起或分化成绒毛状。此外，各部分常有草酸钙结晶、分泌组织、色素细胞等，极少数可见厚壁细胞。(三)显微观察7.果实种子类中药果实种子类中药 果实类中药粉末中可检出果皮表皮碎片、中果皮薄壁细胞、石细胞、纤维、导管、结晶、分泌组织等。另外，还可检出种子的结构特征。应注意果皮表皮碎片的细胞形状、壁增厚情况，有无细胞内含物，有无角质层纹理，气孔的有无及其轴式，毛茸的有无及其类型等；中果皮薄壁细胞的形状、壁增厚情况及有无结晶、淀粉粒、色素等；石细胞和纤维的形状、大小、壁厚薄及有无纹孔、孔沟，层纹是否明显；
46、草酸钙结晶以簇晶及方晶多见，有的含橙皮苷结晶；分泌组织的类型、形状、大小及分泌物颜色等。种子类中药粉末中主要可检出种皮表皮碎片、胚、胚乳薄壁细胞及其内含物等。种皮的构造常随植物的种类而异，因此，鉴别意义较大，应注意种皮表皮碎片是否有表皮毛、角质纹理；石细胞较为多见；胚及胚乳薄壁细胞的形状，应特别注意是否含有糊粉粒以及糊粉粒的特征。另应注意有无栅状细胞、分泌组织、结晶、色素细胞、网状细胞等。(三)显微观察8.菌类中药菌类中药 菌类中药粉末主要由菌丝及孢子组成。在鉴别时应注意菌丝的形状、颜色、大小、是否有分隔；孢子的形态、大小、表面有无刺状或疣状突起，有无尾尖，其内是否含油滴状物等。另外，团块状物
47、、草酸钙结晶也有一定鉴定意义。菌类中药中不应有淀粉粒、导管等高等植物的显微特征。9.动物类中药动物类中药 动物类中药细粉制成的中药制剂，常需在显微镜下观察其组织碎片的颜色、纹理，特别应注意其体壁、鳞片及毛的特征；分泌物的形状、颜色及结晶类型也具有鉴别价值。如大活络丹中检出麝香的依据为：不定形分泌物团块黄色或黄棕色，由多数颗粒状物聚集而成，埋有细小方形结晶，另有类圆形油滴；检出全蝎的依据为：体壁碎片黄棕色，有光泽，外表皮表面观具网格样纹理、细小圆孔口及类圆形毛窝，并密布细小颗粒。刚毛棕黄色，直径820m，壁具纵直纹理，髓腔细窄，基部稍宽。10.矿物类中药矿物类中药 多利用偏光显微镜观察其薄片和碎
48、屑的形态、光学特性和必要的物理常数。在中药制剂中，主要观察其粉末的形状、透明度和颜色等。有的药材在普通光学显微镜下有其专属性特征，如七厘散中以含有暗棕红色不规则细小颗粒，有光泽，边缘暗黑色，作为检出朱砂的依据。(四)显微测量显微测量是应用显微量尺在显微镜下测量被观察物体的长度、厚度、面积、数目和位置的一种显微定量方法。在中药制剂的显微观察中，常用来测量细胞及细胞内含物等的大小，以此作为鉴别某药材是否存在的依据。如药典在“一捻金”的显微鉴别项下规定：草酸钙簇晶大，直径60140m(大黄)；草酸钙簇晶直径2068m，棱角锐尖(人参)。即需用草酸钙簇晶的大小来判断人参与大黄的存在与否。由此可见，显微
49、测量也是中药制剂显微鉴别的重要手段。测量常用的量尺为目微尺与台微尺。1.目微尺目微尺 又称目镜量尺、目镜测微尺或目尺。它是放在目镜内的一种标尺，是一个直径1820mm圆形玻璃片，中央有一标尺，长约5mm(或10mm)，刻有精确等距离的平行线，常为50(或100)条(见图21)。目微尺是用以直接测量物体用的，但其刻度所代表的长度依显微镜放大倍数不同而改变，故使用前必须用台微尺来标化，以确定在使用该显微镜及其特定的物镜、目镜和镜筒长度时，目微尺每小格所代表的实际长度。(四)显微测量2.台微尺台微尺 又称镜台测微尺、载物台测微尺或台尺。它是一种特制的载玻片，中央粘有一小圆形玻片，其下封藏有一微型标尺
50、，全长1mm(或2mm)，上刻有精确等分为100(或200)小格的细线，每一小格长为10m。在标尺的外围有一黑环，以便能较容易找到标尺的位置(见图22)。台微尺并不直接测量物体的长度，而是用以标化目微尺。3.目微尺的标化目微尺的标化 将台微尺置于显微镜镜台上，按常规对光调焦，并移动测微尺物象于视野中央；从镜筒中取下目镜，旋下接目镜的目镜盖，将目微尺放入目镜筒中部的光栏上(有刻度的一面向下)，旋上目镜盖后返置镜筒上。这时，视野中可同时观察到台微尺和目微尺的刻度小格，移动台微尺和旋转目镜，使两种量尺的刻度平行。左边的“0”刻度重合，寻找第二条重合刻度。记录两刻度的读数，并根据两个量尺左右两条重合线