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1、核酸提取纯化试剂使用说明书【产品名称】细菌基因组DNA纯化试剂禽。英文名称：Surbiopurebacteria DNA Kit：【包装规格】10017盒、9617盒。【适用范围】各类革兰氏阴性曲和阳性菌等。【原 理】细菌样本经过消化液处理后与裂解结合镀冲液混合.使得细胞破碎并将 核酸棒放.在裂解缓冲液中纳米越珠颗粒通过表面修饰的功铺基团能与游理的基因 组DNA特异性的结合，形成磁珠-DNA复合物.在外磁场力的作用下，将超珠- DNA或合物转移到洗涤缓冲液中，洗去多余的杂垢。再在外磁场力的作用下转移到 洗脱缓冲液中，将DNA洗脱回收。【组成成份】注r若的买的是Sup4M1601请在使用前在Bu
2、ffer W A中加入30mL的无水乙静。在Buffer货号Sup-041601Sup-041602主要成分试剂盒规格I00T96T蛋白而K2inL2inL蛋白酶K溶液RNascA2mL2mL的溶液溶菌物2inL2mL酹溶液Buffer RS30mL30mL市忌溶液Buffer AVL50mL96孔预分装试剂 板6块强变性剂和Tris缓 冲液Buffer WA20mL高盐溶液Buffer WBx214mLx2低盐溶液Buffer DElOniLTris盐溶液磁珠1.5mL祗珠溶液研磨介质4.0g4.0g酸洗成陶球0.1-0.2mm）说明书11WB中加入56mL的无水乙除.无水乙静（分析纯）请用
3、户自备.【储存注意事项】1,蛋白酰K.溶菌怅.RNascA等酶溶液请于-20匕保存,若溶液RS中加入RNase A后，请于2-8匕保存：2、除梅以外其他试剂于室温 15-25 D 保存3、试剂盒有效期为12个月，请在有效期内使用.【适用设备与仪器】磁性分寓架、32通量全自动核酸提取仪、96通量全自动核酸提取仪。【样本要求】该试剂盒可以提取各类革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌,样本批不超过1x10。个细菌。【操作方法】一、样本前处理：1、取14nl过夜培养的菌液（视菌液浓度而定，若是容易长的的，如枯草芽胞杆菌,浓度 高，取hnl即可，否则样品容易翱化）,室温下13.000xg离心Imin收集的体，尽量
4、移除上 清.菌液较多时,可以通过多次离心收集曲体：a.革兰氏阳性菌处理:加入20HL溶菌悔溶液,震荡混匀，37C孵百30min-l h （水 浴锅孵育瓶每隔5 min顺倒混匀次）：b.革兰氏阴性菌处理:如果是大肠杆菌、变形杆的、痢疾杆的 肺炎杆菌、沙门民 菌、志贺氏菌、副流感杆菌、军团菌等，可以直接进行下一步：2、在处埋好的菌体，直接加入3001（ RS、40 mg酸洗玻璃珠、20 Proteinase K （20 ing/inL）.涡旋震荡5 min.海匀后于56 c水溶孵10 min：3、12.000 rpm离心10 min,取上清进行I：一步：二、若购买的是SuXMW”请按照如下手工操作
5、方法进行实验（用户自备磁性分离架）4,取第3步上清液到新的离心管里,加入504I601,以本公司32通量全自动核酸提取仪为例，请按照如下操作 方法进行。在96孔深孔板的第I、7列中各加入5（X）MLButfci RVL和125ML的异丙醉（用户自备，在 第2、8列中各加入50（MLBu曲WA （清确认已加无水乙醉）和15比破珠（注意：破珠在加 入前已经混合均匀）,在第3、4和9、10列中各加入lOOpLBuMrWB（请确认已加无水乙 券）,在第6、12列中各加入lOOpLBunbrDE.b.若购买的是SupQ41602,以本公司32通量全自动核酸提取仪为例，请按照如下操作 方法进行。将室温放置
6、的96孔试制板触倒3-5次，有条件的用户可以在去除塑封膜前在96孔板离心 机中短西离心，后没有离心机也可以手甩，避免挂液。小心撕去年封膜，确认板了的 方向（磁珠在2/8列）。2、在96孔板的第1、7列中各加入细菌样本处理后的上清液.3、将96孔板放入全自动核酸提取仪的指定位置中，装上磁棒护套.4,请按以卜程序进行实5乳注：裂解温度设置成80C,裂解加热终止步躲2,洗脱温度设置成70C,洗脱温度开始步ac(In Sm)及Woe容积 ul110:0010:000900快开启80c22混合0:000:0060200快关册31绐合0:0010:0060900快关闭42洗I0:002:0060500快关
7、闭53第洗20:002:0030700快关闭64*洗30:001:0030700快关闭76洗股2:0010:00120100快开启70匕84干燥0:000:300200快关闭骤65、仪器程序运行结束后.将第6、12列的Buft&DE转移至干净的无曲离心管子中备用.如不急需使用DNA,可以将其放入-20C冻存.【产品性能参考数值】纯化的 DNA OD260.OD280 比值：1.7-2.1.【产品的局限性】样本：样本量建议少于1x10”个细菌.结果就择：本试剂盒手工提取的效率可能会比仪器提取稍低，由于手工操作会有一定 的误差造成的，【注意事项】I,如果室温过低，BufferRS和Buf佞r AVL可能会有少许晶体析出或变浑浊，放入55c 的水浴中预热5-10min,确认溶液澄清后再使用,对提取效果无影响。2、上述的程序适用于本公司全自动核酸提取仪.如果用户使用其他品牌的核酸提取仪.需 根据实际使用的仪然性准进行调整程序.【基本信息】生产企业：广州赛百纯生物科技有限公司地址：漏3栋401单元联系方式：邮编：510000营销部：网址：