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1、酸性染料与碱性染料第1页,本讲稿共10页1.1.生物学染料的分类方法生物学染料的分类方法 生物学染料是用于配制生物生物学染料是用于配制生物染色剂的染料染色剂的染料:(1)(1)根据来源可分为根据来源可分为天然染料天然染料 和和人工合成染料人工合成染料;(2)(2)根据染色对象又可分为根据染色对象又可分为胞胞 核染料、胞浆染料核染料、胞浆染料和和脂肪脂肪 染染 料料。第2页,本讲稿共10页(3)(3)根据染料的化学性质而划根据染料的化学性质而划分的碱性染料、酸性染料和分的碱性染料、酸性染料和中性染料。中性染料。染料的酸碱性染料的酸碱性不是不是指染液中指染液中HH+和和OHOH-两种离子的平衡状两
2、种离子的平衡状态,而是指染料中的主要显色基态,而是指染料中的主要显色基团为团为阳离子还是阴离子阳离子还是阴离子.第3页,本讲稿共10页 碱性和酸性染料的划分碱性和酸性染料的划分依据在于依据在于染料分子电离后的染料分子电离后的主要有色成分是阳离子还是主要有色成分是阳离子还是阴离子阴离子.第4页,本讲稿共10页碱性染料碱性染料:若染料分子电离后,有色离子为若染料分子电离后,有色离子为阳离子阳离子即为即为碱性碱性染料。染料。酸性染料酸性染料:若若有色离子有色离子为为阴离子阴离子即为即为酸性酸性染染料。料。中性染料中性染料:由碱性染料和酸性染料混合后由碱性染料和酸性染料混合后配制的,也称复合染料。配制
3、的,也称复合染料。第5页,本讲稿共10页2.2.碱性染料及染色原理碱性染料及染色原理 一般能溶于水及酒精。通常一般能溶于水及酒精。通常能电离出能电离出Na+Na+或或OHOH-、Cl-Cl-等无等无色的阴离子和有色的阳离子,如色的阴离子和有色的阳离子,如龙胆紫、亚甲基蓝、美蓝等。碱龙胆紫、亚甲基蓝、美蓝等。碱性染料的阳离子为有色离子,它性染料的阳离子为有色离子,它可以与细胞中的带负电荷部分牢可以与细胞中的带负电荷部分牢固地结合。固地结合。第6页,本讲稿共10页 例如:细胞核中的染色质(体)例如:细胞核中的染色质(体)内含有脱氧核糖核酸,属酸性物质,内含有脱氧核糖核酸,属酸性物质,可电离出可电离
4、出HH+,而使自身带正电荷,而使自身带正电荷,所以它能和碱性染料(如龙胆紫或所以它能和碱性染料(如龙胆紫或亚甲基蓝)电离出的有色阳离子通亚甲基蓝)电离出的有色阳离子通过电荷间的引力作用牢固结合,从过电荷间的引力作用牢固结合,从而被染上颜色。而被染上颜色。第7页,本讲稿共10页3.3.酸性染料及染色原理酸性染料及染色原理 一般能溶于水及酒精。通常能电离一般能溶于水及酒精。通常能电离出出NaNa+或或HH+、K K+等一些无色的阳离子等一些无色的阳离子和有色的阴离子,如伊红、苦味酸等。和有色的阴离子,如伊红、苦味酸等。酸性染料中阴离子为有色离子,它可酸性染料中阴离子为有色离子,它可以与细胞中带正电
5、荷的部分牢固地结以与细胞中带正电荷的部分牢固地结合。细胞质中某些物质常带正电荷,合。细胞质中某些物质常带正电荷,所以可与酸性染料中的有色阴离子牢所以可与酸性染料中的有色阴离子牢固结合而被染上颜色。固结合而被染上颜色。第8页,本讲稿共10页 染色作用有时还随溶液的染色作用有时还随溶液的PHPH值值而变动。因细胞的主要成分是蛋白而变动。因细胞的主要成分是蛋白质,它含有氨基和羧基,在酸性溶质,它含有氨基和羧基,在酸性溶液中,当溶液的液中,当溶液的PHPH值小于该蛋白质值小于该蛋白质的等电点时,则蛋白质带正电荷,的等电点时,则蛋白质带正电荷,易被酸性染料染色。在碱性溶液中,易被酸性染料染色。在碱性溶液
6、中,当溶液的当溶液的PHPH值大于该蛋白质的等电值大于该蛋白质的等电点时,则蛋白质带负电荷,易被碱点时,则蛋白质带负电荷,易被碱性染料染色。性染料染色。第9页,本讲稿共10页解析与小结 生物制片所用的染料可分碱性染料、酸性染生物制片所用的染料可分碱性染料、酸性染料和中性染料。染料的酸碱性不是指染液中料和中性染料。染料的酸碱性不是指染液中H+H+和和OHOH两种离子的平衡状态,而是指染两种离子的平衡状态,而是指染料中的主要显色基团为阳离子还是阴离子,料中的主要显色基团为阳离子还是阴离子,若染料的显色基团为阳离子,则该染料为碱若染料的显色基团为阳离子,则该染料为碱性染料。若染料的显色基团为阴离子,则该性染料。若染料的显色基团为阴离子,则该染料为酸性染料。龙胆紫的显色基团均为阳染料为酸性染料。龙胆紫的显色基团均为阳离子,帮为碱性染料。染色体的主要成分为离子,帮为碱性染料。染色体的主要成分为DNADNA和蛋白质,它是酸性物质,染色体易和蛋白质,它是酸性物质,染色体易与含有阳离子的碱性染料发生亲合面结合,与含有阳离子的碱性染料发生亲合面结合,从而被染成深色物质。从而被染成深色物质。第10页,本讲稿共10页