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1、广东工业大学实验报告实验 二题目:沉降法检测空气中微生物数量第 16 周 星期 三 第 10-12 节(一)实验目的1学习并掌握用沉降法检测空气中的微生物2了解空气中微生物的分布状况(二)实验原理在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动,人和动物的活动等原因,仍有相当数量的微生物存在。当空气中个体微小的微生物落到适合于它们生长繁殖的固体培养基的表面时,在适温下培养一段时间后,每一个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落。观察大小、形态各异的菌落,就可大致鉴别空气个存在的微生物的种类。(三)
2、实验器材1、试剂牛肉蛋白胨培养基配方:牛肉膏1.0g,蛋白胨 2g,NaCl 1g,琼脂粉 4g水 200mL,pH 7.27.42、仪器及其他用品高压灭菌锅,操作工作台,三角瓶,培养皿,酒精灯,培养箱等(四)实验方法1、倒平板:按常法配置上述培养基,装于500mL 三角瓶中,高压灭菌备用。冷却至45-47左右,在超净工作台,倒 8 个平板备用。2、暴露取样在指定的地点各放 2 皿,将平板皿盖打开,在空气中暴露5min 和 10min,时间一到,立即合上皿盖。3、培养观察:细菌置于 37培养,培养 48h 计数平板上的菌落,观察各种菌落的形态、大小、颜色等特征。34、计算 1m 空气中微生物的
3、数目2奥梅染斯基()曾建议:如面积为100 的平板培养基,暴露在空气中5 分钟,置于 37培养 24 小时后所生长的菌落数,相当于10L 空气中的细菌数。X=3N N1001002r rX:每 m 空气中的细菌数N:平板暴露 5 分钟,置 37培养 24 小时后生长的菌落数r:平皿底半径()(五)实验结果1、列表比较不同放置地点空气菌落种类以及数量的差异?菌落平均数环境靠近室外室内5min10min5min细菌780010min32、用沉降法计算 1m 空气环境中所含菌数。X=N N100100 02r r(六)思考题1对沉降测定法的结果,进行分析。由于本次实验是在空调房中进行取样,又靠近教室的里端,可能是因为温度的关系,也可能是因为培养的时间不够长,故没有检测出菌落。(七)实验体会这次实验难度较小,但等待时间较长。培养基在配置的时候,特别是牛肉膏的重量,难以准确称重后转移。或许是水量不够的原因,最后配成的溶液底部有沉淀。在倒平板的时候,由于是一人倒 2 个,由于是培养基原本的温度已较低,且在灭菌中蒸发了一部分,4 个人一组,倒平板,至最后一人的时候培养基已开始部分凝结,故给倒平板造成一点困难,且培养基较薄。