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1、检测生物组织中的还原糖脂肪检测生物组织中的还原糖脂肪和蛋白质和蛋白质第1页，本讲稿共23页实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂质的鉴定脂质的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 第2页，本讲稿共23页（一）还原糖的鉴定（一）还原糖的鉴定1、实验原理、实验原理 NaOH +CuSO4 Cu(OH)2 蓝色沉淀蓝色沉淀 +Cu(OH)2+还原糖还原糖Cu 2 O 砖红色沉淀砖红色沉淀 +（水浴条件（水浴条件：50-6550-65）葡萄糖葡萄糖等还原糖
2、等还原糖分子中存在醛基等分子中存在醛基等还原性基团还原性基团能与能与斐林试剂斐林试剂作用生成砖红色沉淀。作用生成砖红色沉淀。斐林试剂斐林试剂 ：甲液：质量浓度为：甲液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/ml0.05g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液第3页，本讲稿共23页材料材料Text in hereText in hereText in here材料要含有丰富还原糖材料要含有丰富还原糖材料颜色材料颜色为白色或近于白色为白色或近于白色以免造成干扰以免造成干扰选材选材原则原则富含还原糖富含还原糖富含蔗糖富含蔗糖
3、含淀粉但还含淀粉但还原糖很少原糖很少颜色干扰颜色干扰富含蔗糖富含蔗糖富含还原糖富含还原糖第4页，本讲稿共23页2、实验步骤、实验步骤反应初始反应初始反应结束砖红色反应结束砖红色对照对照蓝蓝色色棕棕色色砖砖红红色色第5页，本讲稿共23页3、注意事项、注意事项要选择要选择含还原糖丰富含还原糖丰富，颜色为，颜色为白色或近于白色或近于白色白色的植物组织的植物组织斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙液来斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙液来分别配制、储存。分别配制、储存。使用时将甲液、乙液等使用时将甲液、乙液等量混合均匀，现配现用量混合均匀，现配现用1 1、材料选取、材料选取、材料选取、材料选取2 2、斐林试
4、剂、斐林试剂、斐林试剂、斐林试剂对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部；试管口不要朝向实验者触及烧杯底部；试管口不要朝向实验者 3、水浴加热、水浴加热第6页，本讲稿共23页实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定脂肪的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 第7页，本讲稿共23页（二）淀粉鉴定（二）淀粉鉴定1 1、实验原理、实验原理、实验原理、实验原理2 2、选材、选材、选材、选材选择淀粉含量高
5、，选择淀粉含量高，颜色近于白色的颜色近于白色的生物组织，如马生物组织，如马铃薯块茎研磨液铃薯块茎研磨液淀粉遇碘会淀粉遇碘会变成蓝色变成蓝色3 3、过程及结果、过程及结果向向2ml2ml组织样组织样液中加两滴液中加两滴碘液，摇匀碘液，摇匀后变成蓝色后变成蓝色第8页，本讲稿共23页（三）脂肪的鉴定（三）脂肪的鉴定1、实验原理脂肪可被脂肪可被 苏丹苏丹染成染成橘黄色橘黄色 苏丹苏丹染成染成红色红色苏丹苏丹第9页，本讲稿共23页材料材料 选择富含脂肪且比较大的选择富含脂肪且比较大的种子，成熟花生种子是最种子，成熟花生种子是最好的选择，实验前好的选择，实验前浸泡浸泡3 34 4小时小时时间过长时间过长：
6、组织太软，切下的薄：组织太软，切下的薄片，片，不易成形不易成形时间过短时间过短：不容易切片不容易切片第10页，本讲稿共23页2、实验步骤、实验步骤第11页，本讲稿共23页注意事项注意事项切片要尽可能薄，切片要尽可能薄，观察时要找最薄观察时要找最薄处，最好只有处，最好只有1 12 2层细胞层细胞 染色后一定染色后一定要用体积分数要用体积分数为为5050的酒的酒精溶液精溶液洗去洗去浮色浮色用苏丹用苏丹染色时染色时间不宜过长，间不宜过长，否则否则脂肪会溶脂肪会溶解在苏丹解在苏丹溶溶液中的酒精里液中的酒精里3、注意事项、注意事项第12页，本讲稿共23页实验实验还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定 脂肪的鉴定脂
7、肪的鉴定蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 Click to add title in here 4123检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质4淀粉的鉴定淀粉的鉴定 第13页，本讲稿共23页（四）蛋白质的鉴定（四）蛋白质的鉴定1、实验原理蛋白质与双缩脲具有相同的结构蛋白质与双缩脲具有相同的结构-肽肽键键，能在，能在碱性环境碱性环境下与双缩脲试剂中的下与双缩脲试剂中的CuCu2+2+产生产生紫色紫色络合物络合物双缩脲试剂双缩脲试剂A A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液：质量浓度为液：质量浓度为0.01g/ml0.
8、01g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液注：双缩脲与双缩脲试剂不同。第14页，本讲稿共23页材料：材料：浸泡浸泡1 12 2天的大豆种子（或豆浆）天的大豆种子（或豆浆）或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝提取液或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝提取液第15页，本讲稿共23页2、实验步骤、实验步骤第16页，本讲稿共23页3、注意事项、注意事项实验样液要留出一份作为实验样液要留出一份作为对照对照（还（还原糖、淀粉的鉴定也要留出样液原糖、淀粉的鉴定也要留出样液进行对照）进行对照）使用双缩脲试剂时，应使用双缩脲试剂时，应先加先加A A液造成碱性环境，再加液造成碱性环境，再加B B液液若使用蛋清，必须按要求若使用蛋清，必须
9、按要求稀释稀释，如果稀释不够会粘附于试管壁上，如果稀释不够会粘附于试管壁上，不易洗刷不易洗刷第17页，本讲稿共23页拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比 斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定成分鉴定成分还原糖还原糖蛋白质蛋白质鉴定原理鉴定原理还原糖中的醛基还原糖中的醛基在在加热条件加热条件下能将下能将Cu(OH)Cu(OH)2 2中的中的CuCu2+2+还原成还原成CuCu+，从而生成，从而生成砖红色砖红色CuCu2 2O O沉淀沉淀双缩脲在碱性溶液中能与双缩脲在碱性溶液中能与CuCu2+2+结结合生成紫色络合物，蛋白质分合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩
10、脲结构相似的子中含有与双缩脲结构相似的肽键，因而也能与肽键，因而也能与CuCu2+2+作用作用试剂浓度试剂浓度 甲液：质量浓度为甲液：质量浓度为0.1g/mol0.1g/mol的的NaOHNaOH溶液，溶液，乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/mol0.05g/mol的的CuSO4 CuSO4 溶液溶液A A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/ml0.1g/ml的的 NaOHNaOH溶液溶液B B液：质量浓度为液：质量浓度为0.01g/ml0.01g/ml的的CuSO4CuSO4溶液溶液使用方法使用方法甲液、乙液甲液、乙液等量混合均匀等量混合均匀后再加入样液后再加入样液先加先加A A
11、液造成碱性环境后，液造成碱性环境后，再加再加B B液液使用条件使用条件水浴加热（水浴加热（50-6550-65）不加热不加热实验现象实验现象浅蓝色浅蓝色 棕色棕色 砖红色砖红色紫色紫色 第18页，本讲稿共23页唯一用到显微镜的实验唯一用到显微镜的实验脂质的鉴定脂质的鉴定唯一需要加热的实验唯一需要加热的实验还原糖的鉴定还原糖的鉴定非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色而是蓝色而是蓝色第19页，本讲稿共23页典型例题分析：典型例题分析：1 1、在、在“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”的实验中提供了如下备选实验的实验中提供了如下
12、备选实验材料：材料：苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。【分析分析】实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：第20页，本讲稿共23页(1)(1)检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？提示：提示：白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；韭白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。(2)(2)检测脂肪时，为什么不选取核桃？检测脂肪时，为什么不选
13、取核桃？提示：提示：核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。(3)(3)如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检测如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检测蛋白质吗？蛋白质吗？提示：提示：不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。第21页，本讲稿共23页2.2.鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的化学试鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的化学试剂是剂是 ()()A.A.斐林试剂斐林试剂 B.B.苏丹苏丹染液染液C.C.双缩脲双缩脲 D
14、.D.甲基绿甲基绿【解析解析】选选D D。甲基绿是对。甲基绿是对DNADNA染色，染成绿色。染色，染成绿色。拓展：拓展：健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应的是（的是（）尿素尿素 胃液胃液 汗液汗液 唾液唾液第22页，本讲稿共23页3.3.以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作临时装以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作临时装片的正确步骤是片的正确步骤是()()盖盖玻片盖盖玻片 切子叶切子叶 苏丹苏丹染液染色染液染色滴加蒸馏水滴加蒸馏水 酒精洗去浮色酒精洗去浮色A.B.A.B.C.D.C.D.【解析解析】选选D D。制作临时装片的步骤包括切片、制。制作临时装片的步骤包括切片、制片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、滴加片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸馏水和盖盖玻片。蒸馏水和盖盖玻片。第23页，本讲稿共23页