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1、会计学1热带热带(rdi)兰的繁殖兰的繁殖第一页，共59页。第一节第一节 热带热带(rdi)兰无性繁殖兰无性繁殖n n分株繁殖n n将连接假鳞茎的匍匐茎分开或切断，然后分别(fnbi)繁殖的方法a.留用(li yn)三 a.留 用 三 条 茎 ,其 余 的 切 除b.一般的栽植法C.在盆底留 空洞栽植法石斛兰的分株繁殖第1页/共59页第二页，共59页。n n适用对象：复茎类热带兰n n繁殖时间：植物休眠期后，新芽形成但是没有伸展之前。多为春季。也可在花后新芽未长出时。n n分株操作：将匍匐茎切断，断面涂抹(tm)木炭粉或墨汁，防细菌感染。丛生类型的可以直接掰开。然后分别种植。第2页/共59页第
2、三页，共59页。n n注意点：n n兰头(假鳞茎)必须露出土面,不可埋在基质下,否则易烂头。n n栽培基质勿压得太紧。若基质间的空隙 太小,会引起烂根。n n由于根系较多,种植时切勿强行屈折根系,应顺其自然,把植株向同一方向旋转。n n换盆分株前基质宜稍干,以便脱盆,并可防止伤及根系。n n换盆后不应施肥，在盆底留空洞栽植法34 周后方(hufng)可施肥。n n分株用的刀具等应消毒。n n每节至少两个假鳞茎。第3页/共59页第四页，共59页。n n特点n n操作简单，成活率高，增株快，开花较早，确保品质特性(txng)等优点。n n繁殖系数小第4页/共59页第五页，共59页。扦插繁殖扦插繁殖
3、 适用大多数合轴型适用大多数合轴型或单轴型热带兰或单轴型热带兰 繁殖材料繁殖材料 花后的假鳞茎花后的假鳞茎(ln(ln jnjn)（如春石斛）（如春石斛）花凋谢后的花序梗花凋谢后的花序梗（如鹤顶兰属）（如鹤顶兰属）第5页/共59页第六页，共59页。n n特点n n方法简单(jindn)，成活率高，繁殖系数较高，开花较早，确保品质特性等优点。n n有一定限制，只适用于一些具有较长假鳞茎的种类。第6页/共59页第七页，共59页。n n切茎繁殖n n单轴型兰花，如万代兰、火焰兰、蜘蛛兰等n n将上部带叶茎段剪下另行栽植(zizh)，而留下的“无头”母株在基部叶腋处可以萌发新的植株n n特点n n简单
4、n n成活率高n n可保留原品系的优点n n繁殖系数低第7页/共59页第八页，共59页。高位芽繁殖高位芽繁殖 多用于石斛类多用于石斛类 当高位芽长出当高位芽长出新根和兰头时，新根和兰头时，可分割可分割(fng)(fng)下来种植。下来种植。蝴蝶兰花梗上蝴蝶兰花梗上具潜伏腋芽，具潜伏腋芽，适宜时也可产适宜时也可产生小苗。生小苗。高位(o wi)芽第8页/共59页第九页，共59页。n n蝴蝶兰的高位蝴蝶兰的高位(o wi)(o wi)芽诱导芽诱导n n花后的花梗节间上用刀刻伤，花后的花梗节间上用刀刻伤，n n涂生根粉或稀释涂生根粉或稀释1 1万倍的吲哚乙酸，万倍的吲哚乙酸，n n约半月后高位约半月
5、后高位(o wi)(o wi)芽出现，越到芽出现，越到8 8周后行成完周后行成完整芽。整芽。第9页/共59页第十页，共59页。第二节第二节 热带热带(rdi)兰组织微繁兰组织微繁n n热带兰组织培养历史n n1902年,德国植物学家G.Haberlandt发表植物细胞培养论文，提出植物细胞培养学说,认为单一细胞可以发育成为独立的个体;n n1922年,Kundson成功在含糖培养基上用种子培养出兰花幼苗,建立一套兰花种子无菌萌发的方法与培养基配方,此法为今后的杂交育种和兰花工业发展(fzhn)提供了必备的条件;n n1935年,Cappellati认为,维生素C是兰花种子发芽所必需的.他进一步
6、证实,兰花新鲜种子可以无菌萌发,但陈旧的种子需加入生长激素才能发芽;第10页/共59页第十一页，共59页。n n以上以上Hos Burgeff,Kundson,CappellatiHos Burgeff,Kundson,Cappellati等人的研等人的研究结果被总结为究结果被总结为:在适合在适合(shh)(shh)矿物质营养矿物质营养,可溶可溶性糖和适宜的性糖和适宜的PHPH条件下条件下,兰花种子可以无菌萌发兰花种子可以无菌萌发.第11页/共59页第十二页，共59页。19431943年年,White,White出版第一本组培专著植物组培培养手出版第一本组培专著植物组培培养手册册,组培技术进一
7、步普及组培技术进一步普及(p(p j);j);19481948年年,美国科学家美国科学家F.SkoogF.Skoog与崔澄发现腺嘌呤或腺苷与崔澄发现腺嘌呤或腺苷/生长素比例是控制芽和根形成的主要条件之一生长素比例是控制芽和根形成的主要条件之一,完善了完善了激素调控理论激素调控理论;19491949年年,Gavino Roter,Gavino Roter首先地兰花组织培养获得成功首先地兰花组织培养获得成功,他他将蝴蝶兰茎节接上于将蝴蝶兰茎节接上于Kundson CKundson C培养基上获得再生苗培养基上获得再生苗;19571957年年,Hans,Hans首次采用兰花茎尖为外植体培养获得成功首
8、次采用兰花茎尖为外植体培养获得成功,认为此法对兰花无性繁殖行之有效认为此法对兰花无性繁殖行之有效;19581958年年,Steward,Steward实验证实细胞全能性假说实验证实细胞全能性假说.植物组培技术植物组培技术进入实用阶段进入实用阶段;第12页/共59页第十三页，共59页。n n1960年,G.Morel 进行了兰属(Cymbidium)的茎尖离体培养,实现了去病毒与快繁的两个目的.此种通过茎尖PLB再生植株,称为PLB再生方式.这一方式(技术)很快被欧美东亚(Dng Y)许多国家的花卉生产企业所应用,实现了兰花工业化生产,形成了特有的兰花工业第13页/共59页第十四页，共59页。l
9、 l中国兰花组织培养历史回顾中国兰花组织培养历史回顾19601960年年,吴应祥开始研究兰花种子无菌萌发吴应祥开始研究兰花种子无菌萌发;19591959年迄今年迄今,徐锦堂等人用共生菌萌发法解徐锦堂等人用共生菌萌发法解决兰科植物天麻的人工种植决兰科植物天麻的人工种植,取得举世瞩目取得举世瞩目的成就的成就;19731973年年,王熊用建兰王熊用建兰,春兰春兰,蕙兰蕙兰,虎头兰等虎头兰等茎尖建立茎尖建立(jinl)(jinl)快繁无性系快繁无性系,获得再生植获得再生植株株,并首次报道诱导建兰根壮茎试管内开花并首次报道诱导建兰根壮茎试管内开花;19801980年以后年以后,国兰与洋兰的组培与快繁报道
10、国兰与洋兰的组培与快繁报道激增激增第14页/共59页第十五页，共59页。n n热带兰组织培养实验室设计与设备n n主要设备n n超净工作台n n高压灭菌(mi jn)锅n n组织培养架n n镊子、解剖刀等n n玻璃器皿n n其他，如天平、冰箱等超净工作台第15页/共59页第十六页，共59页。高压(goy)灭菌锅组织培养架第16页/共59页第十七页，共59页。n n实验室设计n n化学实验室：放置组培所需的设备与药品(yopn)，如冰箱、恒温箱、摇床等n n灭菌室n n接种室：超净工作台、紫外灯等n n培养室n n缓苗区第17页/共59页第十八页，共59页。灭菌(mi jn)室第18页/共59页
11、第十九页，共59页。接种(jizhng)室第19页/共59页第二十页，共59页。培养(piyng)室第20页/共59页第二十一页，共59页。n n热带组培主要概念n n外植体 explant：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官(qgun)叫做外植体n n愈伤组织 callus：指植物细胞在组织培养过程中形成的无一定结构的组织团块，在适宜的条件下，愈伤组织可再分化，形成芽、根，再生成植株。n n原球茎 PLB(protocorm-like body)：兰科植物种子萌发时不出现胚根,而是原胚的萌动和膨大,种皮一端破裂,突破种皮的胚呈小圆锥状,称为原球茎。在兰科的组织培养中也会出现类
12、似的结构。第21页/共59页第二十二页，共59页。石斛(sh h)原球茎第22页/共59页第二十三页，共59页。n n热带兰组织培养主要流程n n配制培养基n n灭菌n n外植体采取与消毒n n接种n n不定芽、愈伤组织、PLB的诱导n n愈伤组织、PLB分化(fnhu)n n增殖n n长根n n完整植株第23页/共59页第二十四页，共59页。n n培养基成分n n大量元素n n微量元素n n铁盐n n有机(yuj)成分n n碳水化合物n n植物生长调节剂n n琼脂或其他支撑物n n其他添加物，如活性炭、抗生素等第24页/共59页第二十五页，共59页。MS培养基成分(chng fn)第25页/
13、共59页第二十六页，共59页。n n培养基灭菌(mi jn)n n高压灭菌(mi jn)：121，20分钟n n过滤灭菌(mi jn)：滤膜、注射器n n培养基凝固第26页/共59页第二十七页，共59页。n n蝴蝶兰组织培养技术(jsh)n n茎尖和花梗组织培养花梗(hugng)腋芽或顶芽诱导(yudo)营养芽不定芽茎尖根尖嫩叶剥离茎尖增殖生根完整植株PLB诱导增殖生根完整植株PLB诱导增殖生根完整植株第27页/共59页第二十八页，共59页。第28页/共59页第二十九页，共59页。第29页/共59页第三十页，共59页。第30页/共59页第三十一页，共59页。第31页/共59页第三十二页，共59
14、页。第32页/共59页第三十三页，共59页。茎尖组织培养第33页/共59页第三十四页，共59页。第34页/共59页第三十五页，共59页。第35页/共59页第三十六页，共59页。n n叶片(ypin)组织培养第36页/共59页第三十七页，共59页。n n外植体n n最好是试管苗的叶片n n切取叶片上表面朝上放置n n叶基部比叶中部繁殖率高，叶尖不能繁殖n n培养条件(tiojin)n n初期1个月左右采用暗培养比较好n n培养基n nMS、kyoto、改良KC等第37页/共59页第三十八页，共59页。n n花梗节间(ji jin)培养第38页/共59页第三十九页，共59页。第39页/共59页第四
15、十页，共59页。第40页/共59页第四十一页，共59页。第41页/共59页第四十二页，共59页。第三节第三节 兰花兰花(lnhu)种子繁殖种子繁殖n n兰花兰花(lnhu)种子繁殖历史种子繁殖历史n n1838年年,德国植物学家德国植物学家Schleiden发表植物发表植物发生论论文，提出植物细胞学说发生论论文，提出植物细胞学说;n n1840年年,Link首先证实了兰科植物根部具有首先证实了兰科植物根部具有内生真菌内生真菌;n n1886年年,Wahrlich对来自世界各地的对来自世界各地的500多种多种兰花兰花(lnhu)进行研究进行研究,证实内生真菌普遍证实内生真菌普遍存在存在,并研究了
16、真菌在寄主细胞内的消解变并研究了真菌在寄主细胞内的消解变化化;第42页/共59页第四十三页，共59页。1899年,法国Bernard发现兰花种子萌发需要(xyo)真菌侵染,提出真菌共生萌发假说.并于1902-1909年,公布了这方面的成果,认为真菌能改进兰花种子和幼苗的营养状态,初步证实共生萌发假说.1900年,德国Hos Burgeff认为,真菌可侵染正常种子,他分离并命名了许多真菌,提出了真菌的消解是提供营养物质给兰花的重要途径的理论.他还研究了兰花根系被侵染的方式,指出多种兰科植物通过真菌获取碳源的增加与叶片面积减少是平行的,有时还伴有光合色素的减少;第43页/共59页第四十四页，共59
17、页。以上的研究结果,发展与完善了当时(dngsh)的种子繁殖兰花的共生萌发法,并在许多兰花中得到应用.1959年,Hos Burgeff出版发行兰花根菌专著;1922年,Kundson成功在含糖培养基上用种子培养出兰花幼苗,建立一套兰花种子无菌萌发的方法与培养基配方,此法为今后的杂交育种和兰花工业发展提供了必备的条件;第44页/共59页第四十五页，共59页。n n1935年,Cappellati认为,维生素C是兰花种子发芽所必需的.他进一步证实,兰花新鲜种子可以无菌萌发,但陈旧的种子需加入生长激素才能发芽;n n以上Hos Burgeff,Kundson,Cappellati等人的研究结果(j
18、i gu)被总结为:在适合 矿物质营养,可溶性糖和适宜的PH条件下,兰花种子可以无菌萌发.第45页/共59页第四十六页，共59页。n n兰花种子的特兰花种子的特点点n n小小n n数量极多数量极多n n由一百个细胞由一百个细胞所构成的一团所构成的一团(y tun)(y tun)未未分化的胚，分化的胚，它缺少一般种它缺少一般种子具备的胚乳子具备的胚乳或子叶等贮藏或子叶等贮藏养份的组织或养份的组织或器官，更缺少器官，更缺少已分化完成的已分化完成的幼根及芽顶等幼根及芽顶等n n自然条件下与自然条件下与真菌共生才能真菌共生才能萌发萌发第46页/共59页第四十七页，共59页。A万代(wndi)兰Vand
19、aB上须兰Epipogum untansC血叶兰Haemaria discolorD坛花兰Acanthophippium sylhetenseE通草兰Galeola lindleyanaF通草兰（另一种）G.altissimaG香荚兰Vanilla planifolia第47页/共59页第四十八页，共59页。n n无菌播种过程n n果荚消毒n n种子接种n n原球茎诱导n n原球茎增殖(zngzh)n n完整小苗n n出瓶第48页/共59页第四十九页，共59页。n n培养基n nMS,1/3MS,改良(giling)KCn n花宝培养基第49页/共59页第五十页，共59页。第50页/共59页第五十一页，共59页。第51页/共59页第五十二页，共59页。第52页/共59页第五十三页，共59页。第四节第四节 热带热带(rdi)兰工厂化生兰工厂化生产产n n工厂化要素(yo s)n n大规模接种室n n大面积组织培养室n n用于炼苗的栽培设施n n工厂化流程第53页/共59页第五十四页，共59页。第54页/共59页第五十五页，共59页。第55页/共59页第五十六页，共59页。第56页/共59页第五十七页，共59页。第57页/共59页第五十八页，共59页。第58页/共59页第五十九页，共59页。