体液检验的质量控制优秀课件.ppt

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1、体液检验的质量控制第1页,本讲稿共93页体液学检验范畴体液学检验包括:尿液、脑脊液、胸腹水等各种体液及粪便的常规检验及形态学检验等。第2页,本讲稿共93页体液检验质量控制的技术要求1 1、人员2 2、设施和环境:2.3、如使用尿干化学试条,其存放条件(如湿度)应符合要求。用以保存临床样品和试剂的设施应设置目标温度和允许范围,并记录。应有温湿度失控时的处理措施,并记录。2.6、应依据所用分析设备和实验过程的要求,制定环境温湿度控制要求并记录。应有温湿度失控时的处理措施并记录。第3页,本讲稿共93页3、实验室设备、试剂和耗材3.1.4 应按国家法规要求对强检设备进行检定。应进行外部校准的设备,如果

2、符合检测目的和要求,可按制造商校准程序进行。应至少对分析设备的加样系统、检测系统、温控系统进行校准(适用时)。分析设备和辅助设备的内部校准应符合CNAS-CL 31内部校准要求。尿液有形成分分析的水平离心机应有盖;应能提供400g的相对离心力(RCF)。应每12个月对离心机进行校准。第4页,本讲稿共93页实验室设备、试剂和耗材3.1.5 设备故障后,应首先分析故障原因,如果设备故障可能影响了方法学性能,故障修复后,可通过以下合适的方式进行相关的检测、验证:(a)可校准的项目实施校准验证,必要时,实施校准;(b)质控物检验;(c)与其他仪器或方法比对;(d)以前检验过的样品再检验。第5页,本讲稿

3、共93页4、检验前过程4.2、应针对不同类型的体液样品规定不同的采集方法和要求。-对自行采集样品的患者,实验室或相关医护人员应指导其正确采集样品。-有特殊采集要求的样品,应在医生或护士的协助下完成采集。4.5、所有体液样品应用密闭容器运送。第6页,本讲稿共93页5、检验过程5.1.2、尿液干化学分析仪性能验证的内容至少应包括阴性和阳性符合率;-尿液有形成分分析仪性能验证的内容至少应包括精密度、携带污染率和可报告范围。第7页,本讲稿共93页检验过程5.1.3、如可行,尿液样品应全部进行显微镜有形成分检查;如使用自动化仪器做有形成分筛检,实验室应制定尿液有形成分分析的显微镜复检程序,并进行确认:(

4、a)明确显微镜复检程序制定的依据、方法;(b)规定验证方法及标准,对复检程序进行验证,假阴性率应5%。5.5.2 5.5.2 应至少使用应至少使用2020份健康人尿样品验证尿液有份健康人尿样品验证尿液有形成分分析仪检验项目的生物参考区间。形成分分析仪检验项目的生物参考区间。第8页,本讲稿共93页6、检验结果质量的保证6.2.2、尿液有形成分分析仪红细胞、白细胞计数检验项目,可参照GB/T 20468-2006临床实验室定量测定室内质量控制指南进行室内质控。-应至少使用2 个浓度水平(正常和异常水平)的质控物,每检测日至少检测1次,应至少使用13s、22s失控规则。-定性体液学检验项目应至少使用

5、阴性和阳性质控物进行室内质控,每工作日至少检测1次,偏差不超过1个等级,且阴性不可为阳性,阳性不可为阴性。第9页,本讲稿共93页检验结果质量的保证6.3.1、应按照CNAS-RL02 能力验证规则的要求参加相应的能力验证/室间质评。应保留参加能力验证/室间质评活动的结果和证书。实验室负责人或指定人员应监控能力验证/室间质评的结果,并在结果报告上签字。第10页,本讲稿共93页检验结果质量的保证6.3.2、通过与其他实验室(如已获认可的实验室或其它使用相同检测方法的同级别或高级别实验室)比对的方式确定检验结果的可接受性时,应满足如下要求:(a)规定比对实验室的选择原则;(b)样品数量:至少5份,包

6、括正常和异常水平;(c)频率:至少每年2次;(d)判定标准:应有80%的结果符合要求。第11页,本讲稿共93页检验结果质量的保证6.4、实验室内部结果比对应符合如下要求:(a)检验同一项目的不同方法、不同检测系统应至少6个月进行结果的比对:尿液分析仪的比对应在确认分析系统的有效性及其性能指标符合要求后,至少使用5份临床样品(含正常和异常水平)进行比对;-定性检测偏差应不超过1个等级,且阴性不可为阳性,阳性不可为阴性;-尿液干化学分析仪、尿液有形成分分析仪如型号不同,则不宜比对;第12页,本讲稿共93页检验结果质量的保证(b)对于尿液中有形成分检查,尿液干化学分析仪、尿液有形成分分析仪、尿液沉渣

7、显微镜检查之间不宜进行比对;(c)应定期(至少每6个月1次,每次至少5份临床样品)进行形态学检验人员的结果比对、考核并记录;(d)比对记录应由实验室负责人审核并签字,并应保留至少2年。第13页,本讲稿共93页尿液检验质量控制尿液检验质量控制 分析前质量控制分析前质量控制 分析中质量控制分析中质量控制 分析后质量控制分析后质量控制 第14页,本讲稿共93页 分前质量控制分前质量控制 病人准备病人准备 标本采集标本采集 标本运送标本运送 检验流程的确定检验流程的确定 质量监管质量监管第15页,本讲稿共93页 标本采集前病人的准备标本采集前病人的准备 告知病人检测时间和方法告知病人检测时间和方法 1

8、 1。留尿时间。留尿时间:清晨第一次尿为宜。清晨第一次尿为宜。急诊病人可随时留尿急诊病人可随时留尿 2 2。留尿方法:清洗外阴,弃去前段尿,留中。留尿方法:清洗外阴,弃去前段尿,留中 段尿,避免经血,白带,粪便等混入段尿,避免经血,白带,粪便等混入 3 3。食物对结果的影响。食物对结果的影响 过量饮水过量饮水尿液稀释,致假阴性尿液稀释,致假阴性 高蛋白饮食高蛋白饮食PHPH降低、降低、NITNIT假阴性假阴性 提醒病人注意控制提醒病人注意控制第16页,本讲稿共93页药物的影响:化验单应注明药物对部分结果的影响药物的影响:化验单应注明药物对部分结果的影响 PH PH:碳酸氢钠、乙酰唑胺等:碳酸氢

9、钠、乙酰唑胺等 糖:皮质醇、阿司匹林、对氨基水杨酸等致假阳性;糖:皮质醇、阿司匹林、对氨基水杨酸等致假阳性;Vit CVit C、左旋多巴、非那宗吡啶等致假阴性。、左旋多巴、非那宗吡啶等致假阴性。酮体:水杨酸盐、苯乙双胍等致假阳性。酮体:水杨酸盐、苯乙双胍等致假阳性。蛋白:奎宁、等致假阳性、大量青霉素致假阴性。蛋白:奎宁、等致假阳性、大量青霉素致假阴性。隐血:大量隐血:大量Vit CVit C致假阴性。致假阴性。白细胞:呋喃妥因白细胞:呋喃妥因,庆大,头孢氨苄等致假阳性;庆大,头孢氨苄等致假阳性;管型:影响肾功能的抗生素、抗结核药、抗肿瘤药、管型:影响肾功能的抗生素、抗结核药、抗肿瘤药、麻醉药

10、、疫苗、类毒素、免疫血清等均可能引麻醉药、疫苗、类毒素、免疫血清等均可能引 起假阳性。起假阳性。第17页,本讲稿共93页尿液标本的收集尿液标本的收集 留尿容器的要求 1 新鲜的尿是分析的质量保证 2 收集标本的容器要求干净 3 标本容器上应有标签:姓名、科室、病床、收集的时间等 4 容器应为一次性用品 5 容器应为50ml以上第18页,本讲稿共93页容器要求:一次性洁净容器,容积50ml,圆形口直径4.0cm,底部较宽易于开启的密封装置第19页,本讲稿共93页不同方式所采尿标本的检测应用范围不同方式所采尿标本的检测应用范围尿标本采尿的方式适用范围不适用范围中段尿第一次晨尿细菌检验试带过筛亚硝酸

11、盐试验尿沉渣镜检蛋白检验临床化学检验中段尿第二次晨尿试带过筛亚硝酸盐还原试验葡萄糖,蛋白定量随意尿餐后尿:测尿糖尿细菌检查膀胱穿刺尿细菌学检查尿沉渣镜检定量标本定时尿,3h,12h,24h尿沉渣人工定量尿细菌检查临床化学检验来源:Roche 尿液基础与实验诊断 2003版,P9.德文 Peter Hagemann,Horet Kimling,Bernd Zawta 等,顾可梁 翻译第20页,本讲稿共93页男性患者尿标本采集男性患者尿标本采集1、留尿前先洗手2、指导未行包皮切除的患者褪上包皮,露出尿道口 用消毒清洁的小布巾清洁阴茎头,从尿道口开始向 上清洁3、前段尿去掉,采集中段尿到容器中,后段

12、排掉4、避免前列腺液或精液混入。第21页,本讲稿共93页女性患者尿标本采集女性患者尿标本采集1 1、留尿前先洗手、留尿前先洗手 2、采用蹲式 3、用消毒清洁的小布巾清洁尿道口和周围处 4、前段尿去掉,采集中段尿到容器中,后段排掉 避开月经期,防止阴道分泌物混入尿内第22页,本讲稿共93页婴幼儿尿标本采集婴幼儿尿标本采集 国外推荐用尿标本采集袋国外推荐用尿标本采集袋 分开儿童的双腿 保证会阴部清洁、干燥、无黏液、勿施粉、油等 移去防护纸,拉紧皮肤,将采集袋紧贴于会阴/阴茎处 定时(如每15min)察看容器 将无污染尿液倒入采集杯中送检第23页,本讲稿共93页 尿液标本的种类尿液标本的种类 1 1

13、、晨尿:清晨第一次尿为晨尿,这种尿标本、晨尿:清晨第一次尿为晨尿,这种尿标本较为浓缩,可用于肾脏浓缩能力评价,有利于较为浓缩,可用于肾脏浓缩能力评价,有利于尿液形态学和化学成分分析。尿液形态学和化学成分分析。2 2、随机尿:即随时留取的尿,标本新鲜,适、随机尿:即随时留取的尿,标本新鲜,适合门诊急诊患者的尿液检查。但此尿液易受多合门诊急诊患者的尿液检查。但此尿液易受多种因素影响,使尿检成分浓度减低或增高,造种因素影响,使尿检成分浓度减低或增高,造成结果对比的混乱。成结果对比的混乱。3 3、负荷尿:为特殊需要检查一定负荷后的尿、负荷尿:为特殊需要检查一定负荷后的尿如葡萄糖负荷后的糖耐量试验,运动

14、负荷后的如葡萄糖负荷后的糖耐量试验,运动负荷后的运动后血尿,起立活动后的直立性蛋白尿等。运动后血尿,起立活动后的直立性蛋白尿等。第24页,本讲稿共93页 4 4、餐后尿:通常收集午餐后至下午、餐后尿:通常收集午餐后至下午2 2时的尿,时的尿,有利于检出病理性糖尿,蛋白尿,或尿胆有利于检出病理性糖尿,蛋白尿,或尿胆 元元 5 5、餐前尿:餐前半小时至一小时排尿弃去,、餐前尿:餐前半小时至一小时排尿弃去,进餐前再留尿检测尿糖。尿糖浓度反映餐进餐前再留尿检测尿糖。尿糖浓度反映餐 前空腹血糖平均水平,用于糖尿病治疗和前空腹血糖平均水平,用于糖尿病治疗和 监测监测 6 6 计时尿计时尿:一般根据临床诊断

15、或疾病观擦的需一般根据临床诊断或疾病观擦的需 要要,按特定的时间采集尿液标本按特定的时间采集尿液标本第25页,本讲稿共93页 7 7、3 3小时尿;收集上午小时尿;收集上午6-96-9时时段内的尿液,时时段内的尿液,检查尿液有形成分排泄率检查尿液有形成分排泄率 8 8、1212小时尿:晚小时尿:晚8 8时至次晨时至次晨8 8时之内的时之内的1212小时小时 全部尿液,用于爱迪氏计数全部尿液,用于爱迪氏计数 9 9、2424小时尿:患者上午小时尿:患者上午8 8时排尿,此后收集各时排尿,此后收集各 次排出的尿液,至次日上午次排出的尿液,至次日上午8 8时最后一次排时最后一次排 尿的全部尿液尿的全

16、部尿液第26页,本讲稿共93页 特殊试验尿特殊试验尿 1 1、中段尿:适用于尿培养。先用肥皂和清水、中段尿:适用于尿培养。先用肥皂和清水 清洗外阴及尿道口,无菌纱布擦干,在不清洗外阴及尿道口,无菌纱布擦干,在不 间断排尿过程中弃去前段尿,以无菌带盖间断排尿过程中弃去前段尿,以无菌带盖 杯留取中段尿杯留取中段尿 2 2、导管尿:患者发生尿潴留或排尿困难时,、导管尿:患者发生尿潴留或排尿困难时,由医护人员用导尿管取尿由医护人员用导尿管取尿 3 3、病情需要膀胱穿刺取尿、病情需要膀胱穿刺取尿 第27页,本讲稿共93页 注意事项注意事项 1 1、最好使用一次性尿杯、最好使用一次性尿杯 2 2、留尿后、

17、留尿后2 2小时内检验,否则应冷藏,小时内检验,否则应冷藏,测试前需复温。测试前需复温。3 3、2424小时尿测尿酸,肌酐,蛋白,钾钠小时尿测尿酸,肌酐,蛋白,钾钠 氯等成分按氯等成分按5 5毫升毫升/升的尿量加入甲苯升的尿量加入甲苯 4 4、测肾上腺皮质激素,香草扁桃酸,钙、测肾上腺皮质激素,香草扁桃酸,钙 磷等成分按磷等成分按1 1毫升毫升/升尿加入浓盐酸。升尿加入浓盐酸。第28页,本讲稿共93页 1 1、室温下尿液成分随着时间的延长而改变、室温下尿液成分随着时间的延长而改变 红细胞减少,皱缩红细胞减少,皱缩,破碎破碎,消失消失 白细胞减少白细胞减少 上皮细胞成为裸核上皮细胞成为裸核 细菌

18、增加细菌增加 PHPH增高加速红细胞溶解增高加速红细胞溶解 2 2、冷藏影响、冷藏影响 结晶和无定型物质增加,影响有形成分检测结晶和无定型物质增加,影响有形成分检测 尿液标本的存放时间尿液标本的存放时间标本送检:立即 2小时内检测第29页,本讲稿共93页尿液分析流程尿液分析流程(1)(1)手工方法手工方法 尿液样本尿液干化学离心 镜检所有样本第30页,本讲稿共93页方法学优点:方法学优点:1 1、尿液分析流程完整、尿液分析流程完整2 2、尿有形成分分析方法符合标准化要求、尿有形成分分析方法符合标准化要求3 3、方法容易普及、方法容易普及方法学缺点:方法学缺点:1 1、工作效率低、工作效率低2

19、2、无法满足高峰时或较大样本的检测需求、无法满足高峰时或较大样本的检测需求3 3 干化学法存在较多假阳性,假阴性干化学法存在较多假阳性,假阴性第31页,本讲稿共93页尿液分析流程尿液分析流程(2 2)尿液样本自动尿液干化学分析仪离心 镜检计数板 阳性阴性第32页,本讲稿共93页方法学优点:方法学优点:1 1、快速筛选后,缩短了报告时间、快速筛选后,缩短了报告时间2 2、方法比较容易普及、方法比较容易普及方法学缺点:方法学缺点:1 1、干化学有形成分的检测存在缺陷、干化学有形成分的检测存在缺陷2 2、干化学作为筛选方法,假阳性、假阴性过高、干化学作为筛选方法,假阳性、假阴性过高3 3、复检率高,

20、同时又容易漏检、复检率高,同时又容易漏检第33页,本讲稿共93页尿液分析流程尿液分析流程(3 3)全自动尿液干化学尿有形成分图像识别系统图像浏览,修正结果DataData报告第34页,本讲稿共93页方法学优点方法学优点图像易于保存、方法比较容易普及图像易于保存、方法比较容易普及方法学缺点方法学缺点检测流程不标准检测流程不标准显微摄像镜头只能随机地采到流动样本中通过该焦点的细胞,显微摄像镜头只能随机地采到流动样本中通过该焦点的细胞,能对所有目标采集清晰图像进行形态学识别分析,定量不准能对所有目标采集清晰图像进行形态学识别分析,定量不准确,随意性大确,随意性大变形、破碎、不同角度通过的细胞不能识别

21、变形、破碎、不同角度通过的细胞不能识别筛选速度慢、无质控筛选速度慢、无质控第35页,本讲稿共93页尿液分析流程尿液分析流程(4 4)全自动尿液干化学全自动尿有形成分UF显微镜确认LISDataDataDataOrder报告第36页,本讲稿共93页方法学优点方法学优点1、符合标准化检测流程,规范实验室操作2、检测效率高3、有效筛选,防止漏检4、质控体系(室内质控室间质评)保障质量控制5、提供新的临床参数(红细胞形态信息、尿路感染信息),附加值高方法学缺点方法学缺点 无法保存图像第37页,本讲稿共93页 分析中质量控制:分析中质量控制:标本前处理标本前处理 物理检查物理检查 化学项目分析化学项目分

22、析 有形成分检查有形成分检查 质量监控质量监控 第38页,本讲稿共93页 标本的接收标本的接收 1 1、核对检验申请单的患者信息与标本是否符、核对检验申请单的患者信息与标本是否符 符合符合 2 2、混有杂物或与检验目的不符的标本退回,、混有杂物或与检验目的不符的标本退回,并注明原因并注明原因 3 3、标本量过少的应重留、标本量过少的应重留 4 4、留、留1212或或2424小时尿做化学成分检测的标本,小时尿做化学成分检测的标本,未放防腐剂的应重留未放防腐剂的应重留第39页,本讲稿共93页 尿液检查的内容:尿液检查的内容:1 1、物理检查:外观,颜色,浊度,比密。、物理检查:外观,颜色,浊度,比

23、密。2 2、化学成分检测:、化学成分检测:PHPH,胆红素,尿胆原,葡,胆红素,尿胆原,葡 萄糖,蛋白,酮体,亚硝酸盐萄糖,蛋白,酮体,亚硝酸盐 3 3、有形成分检测:白细胞,红细胞,上皮细、有形成分检测:白细胞,红细胞,上皮细 胞,管型,结晶,寄生虫,细菌,真菌胞,管型,结晶,寄生虫,细菌,真菌 第40页,本讲稿共93页 一、物理检查一、物理检查 尿液比密:尿液比密:折射计法:尿折射率和尿比密有较好相关性,折射计法:尿折射率和尿比密有较好相关性,二者相关系数为二者相关系数为0.980.98,尿折射率和尿渗量在正,尿折射率和尿渗量在正 常及基本正常范围内,相关系数为常及基本正常范围内,相关系数

24、为0.970.97。因此。因此 在正常情况下,尿比密的末二位数在正常情况下,尿比密的末二位数*40=40=尿渗量尿渗量 使用折射仪方法简单,精密度和准确度较比密使用折射仪方法简单,精密度和准确度较比密 计高而且标本用量只要计高而且标本用量只要1-21-2滴(也可用于测其滴(也可用于测其 他体液比密),解决了尿少病人无法测比密的他体液比密),解决了尿少病人无法测比密的 实际困难。是目前我国测比密的确证方法。实际困难。是目前我国测比密的确证方法。第41页,本讲稿共93页 原理:原理:入射角为入射角为 9090度的光线进入另一介质(密度不度的光线进入另一介质(密度不 同)时,被折射的角度称为临界角,

25、在终端观同)时,被折射的角度称为临界角,在终端观 察时,依折射临界角的大小,可见明暗视物的察时,依折射临界角的大小,可见明暗视物的 改变,进而求出相对折射率。改变,进而求出相对折射率。操作:详见说明书操作:详见说明书 附注:附注:1 1、折射计的校准、折射计的校准 用用1010克克/升,升,4040克克/升,升,100100 克克/升蔗糖溶液校正折射仪,它们的折射率升蔗糖溶液校正折射仪,它们的折射率 分别为分别为1.33441.3344,1.33881.3388,1.34791.3479 2 2、混浊尿会影响结果判读,加热透明后再测、混浊尿会影响结果判读,加热透明后再测第42页,本讲稿共93页

26、 比密计法比密计法 原理:物质的重量与同体积的纯水,在一定温原理:物质的重量与同体积的纯水,在一定温 度下(度下(4 4度,度,15.515.5度)相比,得到的密度为该度)相比,得到的密度为该 物质的比密(俗称比重)物质的比密(俗称比重)操作:操作:1 1。充分混匀尿液后,沿管壁缓慢倒入小量筒。充分混匀尿液后,沿管壁缓慢倒入小量筒 中,如有气泡可用吸管或吸水纸吸去中,如有气泡可用吸管或吸水纸吸去 2 2。比密计放入量筒中,使悬浮于中央,勿触。比密计放入量筒中,使悬浮于中央,勿触 及筒壁或筒底。及筒壁或筒底。3 3。比密计停稳后,读取与尿液凹面相切的刻。比密计停稳后,读取与尿液凹面相切的刻 度,

27、即为被测尿液的比密度,即为被测尿液的比密第43页,本讲稿共93页 1 1、比密计的校准:购置的新比密计用纯水在、比密计的校准:购置的新比密计用纯水在 规定温度下观察比密是否准确。蒸馏水规定温度下观察比密是否准确。蒸馏水 15.5 15.5度应为度应为1.0001.000,8.58.5克克/升氯化钠夜在升氯化钠夜在 15.5 15.5度应为度应为1.0061.006,5050克克/升氯化钠液在升氯化钠液在 15.5 15.5度应为度应为1.0351.035 2 2 温度的影响:不在指定温度下测定,每高温度的影响:不在指定温度下测定,每高 于指定温度(一般以于指定温度(一般以15 15 度为准)度

28、为准)3 3度时,度时,比密应加比密应加0.0010.001,每低,每低3 3度减去度减去0.0010.001。第44页,本讲稿共93页 3 3、尿内容物的影响:尿内含糖,蛋白可增高、尿内容物的影响:尿内含糖,蛋白可增高 比密。盐类析出比密下降,应待盐类溶解比密。盐类析出比密下降,应待盐类溶解 后测比密。尿素分解比密下降。尿中含造后测比密。尿素分解比密下降。尿中含造 影剂,可使比密大于影剂,可使比密大于1.0501.050 4 4、目前比密计已不再是测定尿比密正确方法、目前比密计已不再是测定尿比密正确方法第45页,本讲稿共93页 二二 化学成分检查化学成分检查 1 1、尿液分析仪的原理:尿液分

29、析仪通常由机、尿液分析仪的原理:尿液分析仪通常由机 械系统,光学系统,电路系统三部分组成。械系统,光学系统,电路系统三部分组成。机械系统的主要作用是将待测的试带机械系统的主要作用是将待测的试带 传送到预定的位置,检测后将试带传送到传送到预定的位置,检测后将试带传送到 废物盒中废物盒中 第46页,本讲稿共93页 光学系统通常包括光源,单色处理,光电光学系统通常包括光源,单色处理,光电 处理三部分。光线照射到反应表面产生反射处理三部分。光线照射到反应表面产生反射 光,反射光的强度与各个项目的反应颜色呈正光,反射光的强度与各个项目的反应颜色呈正 比。不同强度的反射光再经光电转换为电信号比。不同强度的

30、反射光再经光电转换为电信号 进行处理进行处理 电路系统将转换后的电信号放大,经摸电路系统将转换后的电信号放大,经摸/数转换后送数转换后送CPUCPU处理,计算出最终检测结果然处理,计算出最终检测结果然 后将结果输出到打印机打印。后将结果输出到打印机打印。第47页,本讲稿共93页 2、尿干化学试带测试原理 PH:采用酸硷指示剂法,测试模块 含甲基红PH 4.6-6.2 和溴麝香草 芬蓝PH6.0-9.两种指示剂,在PH 4.5-9.0的范围内,颜色由橙红经 黄绿到兰色 第48页,本讲稿共93页 比重比重 :测试模块含有多聚电解质甲氧乙烯顺:测试模块含有多聚电解质甲氧乙烯顺 丁烯二酸,酸硷指示剂(

31、溴麝香草芬蓝)及缓丁烯二酸,酸硷指示剂(溴麝香草芬蓝)及缓 冲物。经过处理的多聚电解质的冲物。经过处理的多聚电解质的PKAPKA改变与尿改变与尿 液中离子浓度相关。尿比重偏高时,尿液中所液中离子浓度相关。尿比重偏高时,尿液中所 含盐类成分较多,试剂带中电解质多聚体释放含盐类成分较多,试剂带中电解质多聚体释放 出的出的H+H+增多,溴麝香草芬蓝呈现黄色尿比重偏增多,溴麝香草芬蓝呈现黄色尿比重偏 低时,尿中含盐类成分较少,试剂带试剂带中低时,尿中含盐类成分较少,试剂带试剂带中 电解质多聚体释放出的电解质多聚体释放出的H H+减少,溴麝香草芬蓝减少,溴麝香草芬蓝 呈现蓝色,进而换算成尿液比重值。呈现

32、蓝色,进而换算成尿液比重值。第49页,本讲稿共93页 干化学测试比重的局限性:干化学尿比重干化学测试比重的局限性:干化学尿比重 测定的变化范围测定的变化范围PH6.2PH6.27.07.0。当尿液。当尿液PHPH大于大于 7.0 7.0时,尿液中会存在时,尿液中会存在OHOH-,将中和掉部分由尿,将中和掉部分由尿 液离子成分使电解质多聚体释放出的液离子成分使电解质多聚体释放出的H H+,致使,致使 与酸碱指示剂反应的与酸碱指示剂反应的H H+减少,造成结果偏低。减少,造成结果偏低。因此,当因此,当PH PH 大于大于7.07.0时,应在测定结果上增加时,应在测定结果上增加 0.005 0.00

33、5作为由于硷性尿损失的补偿作为由于硷性尿损失的补偿 第50页,本讲稿共93页 干化学尿比重测定结果表达值的变化范围干化学尿比重测定结果表达值的变化范围 在在1.0001.0001.0301.030,间隔值为,间隔值为0.0050.005,不能反映,不能反映 较小的比重变化。多用于过高或过低尿比重病较小的比重变化。多用于过高或过低尿比重病 人筛选,比重在人筛选,比重在1.0001.0001.0041.004的新生儿尿液不的新生儿尿液不 宜使用此法测比重宜使用此法测比重第51页,本讲稿共93页 尿糖:尿糖:试剂带测试膜快含有葡萄糖氧化酶,过氧试剂带测试膜快含有葡萄糖氧化酶,过氧 化物酶,色素原等。

34、葡萄糖氧化酶促使尿液中化物酶,色素原等。葡萄糖氧化酶促使尿液中 的葡萄糖与的葡萄糖与O O2 2作用生成葡萄糖酸内酯及作用生成葡萄糖酸内酯及H H2 2O O2 2,H H2 2O O2 2又促使过氧化物酶释放出新生态氧,使色又促使过氧化物酶释放出新生态氧,使色 素原呈现不同的颜色变化。常见的色素原有邻素原呈现不同的颜色变化。常见的色素原有邻 联甲苯胺,碘化钾等。联甲苯胺,碘化钾等。第52页,本讲稿共93页 葡萄糖氧化酶的酶促反应,只与葡萄糖反葡萄糖氧化酶的酶促反应,只与葡萄糖反应,因此较班氏法测尿糖有更高的特异性和灵应,因此较班氏法测尿糖有更高的特异性和灵敏度。干化学阴性结果,班氏法有可能呈

35、现阳敏度。干化学阴性结果,班氏法有可能呈现阳性结果性结果 ():可疑):可疑 含糖量小于含糖量小于6mmol/L6mmol/L (+):阳性):阳性 含糖量含糖量6 628mmol/L28mmol/L (+):阳性):阳性 含糖量含糖量282855mmol/L55mmol/L (+):阳性):阳性 含糖量含糖量5555110mmol/L110mmol/L (+):阳性):阳性 含糖量大于含糖量大于110mmol/L110mmol/L第53页,本讲稿共93页 尿液在低葡萄糖浓度(尿液在低葡萄糖浓度(14mmol/L14mmol/L)时,维生素)时,维生素 C C与测试带的试剂发生竞争性抑制反应,

36、产生与测试带的试剂发生竞争性抑制反应,产生 假阴性反应。排除方法是先将尿液煮浮几分钟假阴性反应。排除方法是先将尿液煮浮几分钟 再进行测试再进行测试第54页,本讲稿共93页 尿蛋白:尿蛋白:试剂带测试模块区含有灵敏的蛋白显色试剂带测试模块区含有灵敏的蛋白显色 剂剂酸硷指示剂酸硷指示剂 四溴酚蓝和柠檬酸缓冲物及四溴酚蓝和柠檬酸缓冲物及 表面活性剂。当尿液中含有蛋白质时,由于蛋表面活性剂。当尿液中含有蛋白质时,由于蛋 白质离子对指示剂相反电荷的吸引而生成复合白质离子对指示剂相反电荷的吸引而生成复合 物,引起指示剂的进一步电离,当超缓冲范围物,引起指示剂的进一步电离,当超缓冲范围 时,指示剂发生颜色变

37、化。根据尿液中蛋白质时,指示剂发生颜色变化。根据尿液中蛋白质 含量高低,试剂膜块发生由黄经绿到蓝的颜色含量高低,试剂膜块发生由黄经绿到蓝的颜色 变化变化 第55页,本讲稿共93页 尿液尿液PHPH是影响尿蛋白测试结果的重要因素是影响尿蛋白测试结果的重要因素 不管尿液是由于保存不当引起不管尿液是由于保存不当引起PHPH大的变化,还大的变化,还 是尿液本身过酸,过硷都会影响实验结果。尿是尿液本身过酸,过硷都会影响实验结果。尿 液液PHPH大于大于9 9,出现假阳性,出现假阳性,PHPH小于小于3 3,出现假阴,出现假阴 性结果。性结果。第56页,本讲稿共93页 尿蛋白干化学法对蛋白质不同成分的敏感

38、尿蛋白干化学法对蛋白质不同成分的敏感 性不一样,对白蛋白敏感,球蛋白不敏感。有性不一样,对白蛋白敏感,球蛋白不敏感。有 专家经实验证实,尿中球蛋白为专家经实验证实,尿中球蛋白为4000mg/4000mg/升以升以 下时干化学法结果为阴性,只有达到下时干化学法结果为阴性,只有达到5500mg/5500mg/升时,才出现可疑反应。白,球蛋白比值为升时,才出现可疑反应。白,球蛋白比值为1 1:2 2 的蛋白尿,蛋白浓度的蛋白尿,蛋白浓度2000mg/2000mg/升时才会出现升时才会出现 阳性。干化学测定球蛋白的敏感性仅为白蛋白阳性。干化学测定球蛋白的敏感性仅为白蛋白 的的 1/501/501/10

39、01/100。第57页,本讲稿共93页 对肾脏患者在疾病发展过程中需要系统观对肾脏患者在疾病发展过程中需要系统观 察尿蛋白含量的病例,最好使用磺柳酸法或双察尿蛋白含量的病例,最好使用磺柳酸法或双 缩脲法进行定性和定量实验。缩脲法进行定性和定量实验。研究证明,多种物质包括药物致干化学测研究证明,多种物质包括药物致干化学测 定尿蛋白呈假阳性或假阴性。滴注青霉素定尿蛋白呈假阳性或假阴性。滴注青霉素250250 万单位万单位/2/2小时,小时,320320万单位万单位/3/3小时,小时,480480万单位万单位 /5 /5小时,可对干化学测定尿蛋白产生假阴性。小时,可对干化学测定尿蛋白产生假阴性。第5

40、8页,本讲稿共93页 酮体:酮体:酮体是脂肪分解代谢过程中的代谢产物。酮体是脂肪分解代谢过程中的代谢产物。尿液中的酮体包括乙酰乙酸,尿液中的酮体包括乙酰乙酸,-羟丁酸,丙羟丁酸,丙 酮三种形式。试剂带测试模块区主要含有亚硝酮三种形式。试剂带测试模块区主要含有亚硝 基铁氰化钠。在硷性条件下,亚硝基铁氰化钠基铁氰化钠。在硷性条件下,亚硝基铁氰化钠 可与尿液中的乙酰乙酸,丙酮起反应产生紫色。可与尿液中的乙酰乙酸,丙酮起反应产生紫色。与与 -羟丁酸不发生反应羟丁酸不发生反应第59页,本讲稿共93页 干化学法测试酮体的局限性:干化学法测试酮体的局限性:干化学法对酮体各组成成分敏感性不一致干化学法对酮体各

41、组成成分敏感性不一致 对乙酰乙酸敏感性为对乙酰乙酸敏感性为5050100mg/100mg/升,丙升,丙400400 700mg/700mg/升,与升,与-羟丁酸不发生反应。由于不羟丁酸不发生反应。由于不 同病因引起的酮症其酮体成分不一,不同病程同病因引起的酮症其酮体成分不一,不同病程 酮体成分变化,均会使检测结果与实际总的酮酮体成分变化,均会使检测结果与实际总的酮 体量有所差异。体量有所差异。第60页,本讲稿共93页 在糖尿病酮症酸中毒早期,酮体的主要成在糖尿病酮症酸中毒早期,酮体的主要成 分是分是-羟丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏,此时羟丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏,此时 测定结果可导致对总酮体量的估

42、计不足。在糖测定结果可导致对总酮体量的估计不足。在糖 尿病酮症酸中毒症状缓解后,乙酰乙酸含量反尿病酮症酸中毒症状缓解后,乙酰乙酸含量反 而比急性初始期含量高,应注意病程发展对实而比急性初始期含量高,应注意病程发展对实 验结果影响。验结果影响。第61页,本讲稿共93页 胆红素:胆红素:试剂带测试模块区主要含有试剂带测试模块区主要含有2 2,4-4-二氯苯二氯苯 胺重氮盐,缓冲剂及其他表面活性物质。在强胺重氮盐,缓冲剂及其他表面活性物质。在强 酸性介质里直接胆红素与二氯笨胺重氮盐起偶酸性介质里直接胆红素与二氯笨胺重氮盐起偶 联反应,生成红色复合物。联反应,生成红色复合物。尿胆原:尿胆原:试剂带测试

43、模块区主要含有对二甲氨基苯试剂带测试模块区主要含有对二甲氨基苯 甲醛,缓冲液及其它表面活性物质。在强酸性甲醛,缓冲液及其它表面活性物质。在强酸性 条件下,尿胆原和二甲氨基苯甲醛发生醛化反条件下,尿胆原和二甲氨基苯甲醛发生醛化反 应,生成樱红色缩合物应,生成樱红色缩合物第62页,本讲稿共93页 隐血:隐血:试剂带测试模块区主要含有过氧化氢枯试剂带测试模块区主要含有过氧化氢枯 烯,四甲替联苯胺,柠檬酸,柠檬酸盐等。尿烯,四甲替联苯胺,柠檬酸,柠檬酸盐等。尿 液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白 均含有亚血红素,它具有类似过氧化物酶作用均含有亚血红素,它具

44、有类似过氧化物酶作用 在与过氧化氢枯烯反应过程中,能够使无色的在与过氧化氢枯烯反应过程中,能够使无色的 四甲替联苯胺变化成兰色的邻四甲替联苯胺四甲替联苯胺变化成兰色的邻四甲替联苯胺第63页,本讲稿共93页 白细胞:白细胞:试剂带测试模块区主要含有吲哚酚酯,重试剂带测试模块区主要含有吲哚酚酯,重 氮盐及其他物质。粒细胞中存在酯酶,它能作氮盐及其他物质。粒细胞中存在酯酶,它能作 用于膜块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,吲用于膜块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,吲 哚酚与重氮盐发生反应产生紫色缩合物,颜色哚酚与重氮盐发生反应产生紫色缩合物,颜色 的深浅与细胞的多少呈比例关系。的深浅与细胞的多少呈比例关系

45、。本方法只能检测尿中完整的及溶解的中性本方法只能检测尿中完整的及溶解的中性 粒细胞,与淋巴细胞及单核细胞不起反应。粒细胞,与淋巴细胞及单核细胞不起反应。第64页,本讲稿共93页 干化学法是检测细胞浆内含物来判别细胞干化学法是检测细胞浆内含物来判别细胞 的有无,如通过特异或非特异性酯酶检测白细的有无,如通过特异或非特异性酯酶检测白细 胞,通过血红蛋白的过氧化物酶样反应检测红胞,通过血红蛋白的过氧化物酶样反应检测红 细胞,因此实际工作中可能存在以下问题:细胞,因此实际工作中可能存在以下问题:1 1、肾移植病人发生排异反应时,尿中以淋巴、肾移植病人发生排异反应时,尿中以淋巴 细胞为主,会出现干化学法

46、阴性结果,此细胞为主,会出现干化学法阴性结果,此 类病人应以显微镜检查为准类病人应以显微镜检查为准第65页,本讲稿共93页 2 2、尿液中污染甲醛,或高浓度胆红素,或使、尿液中污染甲醛,或高浓度胆红素,或使 用某些药物如呋喃妥因时,尿蛋白大于或用某些药物如呋喃妥因时,尿蛋白大于或 等于等于5 5克克/升,或尿液中含有大量头孢氨苄升,或尿液中含有大量头孢氨苄 庆大霉素等药物时,干化学法检测的白细庆大霉素等药物时,干化学法检测的白细 胞,红细胞会产生假阳性胞,红细胞会产生假阳性第66页,本讲稿共93页 3 3。尿液中含有对热不稳定的酶,肌红蛋白或。尿液中含有对热不稳定的酶,肌红蛋白或 菌尿,可引起

47、红细胞的干化学法测定结果菌尿,可引起红细胞的干化学法测定结果 的假阳性的假阳性 4 4。由于尿液在膀胱储存时间过长或标本放置。由于尿液在膀胱储存时间过长或标本放置 时间过长导致白细胞破坏,酯酶释放到尿时间过长导致白细胞破坏,酯酶释放到尿 液中,可造成干化学法阳性,镜检阴性的液中,可造成干化学法阳性,镜检阴性的 现象现象第67页,本讲稿共93页 5 5。由于肾病患者的红细胞在肾脏或泌尿道破。由于肾病患者的红细胞在肾脏或泌尿道破 坏,或比重过低,尿坏,或比重过低,尿PHPH偏高,均易造成红偏高,均易造成红 细胞破坏,血红蛋白逸出尿中,可造成干细胞破坏,血红蛋白逸出尿中,可造成干 化学法阳性,镜检阴

48、性的现象化学法阳性,镜检阴性的现象 对于干化学法和显微镜检测白细胞,红细对于干化学法和显微镜检测白细胞,红细 胞出现的不符合现象,要结合不同的实验原理胞出现的不符合现象,要结合不同的实验原理 病情综合分析,动态观察,合理解释实验结果病情综合分析,动态观察,合理解释实验结果第68页,本讲稿共93页 亚硝酸盐:亚硝酸盐:试剂带测试模块区主要含有对胺基苯砷酸试剂带测试模块区主要含有对胺基苯砷酸 (或氨基磺酸),(或氨基磺酸),N-N-萘基乙二胺物质。当尿液萘基乙二胺物质。当尿液 中感染的具有硝酸盐还原酶的细菌增加时,如中感染的具有硝酸盐还原酶的细菌增加时,如 大肠杆菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并可将

49、大肠杆菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并可将 膜块中的胺基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此膜块中的胺基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此 重氮盐再与重氮盐再与N-N-萘基乙二胺偶联,使膜快呈现红萘基乙二胺偶联,使膜快呈现红 色变化色变化第69页,本讲稿共93页 尿亚硝酸盐实验,是细菌性尿路感染的指尿亚硝酸盐实验,是细菌性尿路感染的指 标,阳性结果的产生取决于三个条件标,阳性结果的产生取决于三个条件 1 1 尿中的致病菌含有硝酸盐还原酶尿中的致病菌含有硝酸盐还原酶 2 2 尿液在膀胱内有足够的停留时间尿液在膀胱内有足够的停留时间 3 3 体内适量硝酸盐的存在体内适量硝酸盐的存在 引起尿路感染的细菌主要是大肠杆

50、菌,约引起尿路感染的细菌主要是大肠杆菌,约 占占70%70%,还有部分其他阴性杆菌,这些菌含硝,还有部分其他阴性杆菌,这些菌含硝 酸盐还原酶。粪肠球菌引起的尿路感染约酸盐还原酶。粪肠球菌引起的尿路感染约10%-10%-15%15%,此菌不产生硝酸盐还原酶。此实验诊断,此菌不产生硝酸盐还原酶。此实验诊断 尿路感染的符合率尿路感染的符合率80%80%第70页,本讲稿共93页 干化学尿液分析的质量控制干化学尿液分析的质量控制 尿液分析仪:尿液分析仪:1 1 仔细阅读仪器说明书,了解仪器的测试原仔细阅读仪器说明书,了解仪器的测试原 理,操作步骤,校准方法,仪器保养理,操作步骤,校准方法,仪器保养 2

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