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1、实验八影响神经冲动传导的因素观察第1页,本讲稿共11页实验原理:实验原理:用用电电刺刺激激神神经经,在在刺刺激激电电极极的的负负极极下下神神经经纤纤维维膜膜内内产产生生去去极极化化,当当去去极极化化达达到到阈阈电电位位,膜膜上上产产生生一一次次可可传传导导的的快快速速电位反转,即动作电位电位反转,即动作电位一条神经干中有无数条神经纤维,每条神经纤维的直径和一条神经干中有无数条神经纤维,每条神经纤维的直径和长度不同,膜特性也不完全一样,故兴奋性不同、阈值各长度不同,膜特性也不完全一样,故兴奋性不同、阈值各异,而本实验记录到的动作电位是神经干中各条神经纤维异,而本实验记录到的动作电位是神经干中各条
2、神经纤维动作电位的复合表现,故随着刺激强度的增大动作电位幅动作电位的复合表现,故随着刺激强度的增大动作电位幅度也增大。度也增大。如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面,兴奋波如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面,兴奋波先后通过两个电极处,便引导出两个方向相反的电位波形,先后通过两个电极处,便引导出两个方向相反的电位波形,称双相动作电位称双相动作电位如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤,兴奋波只通过如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤,兴奋波只通过第一个引导电极,不能传至第二个引导电极,则只能引导出第一个引导电极,不能传至第二个引导电极,则只能引导出一个方向的电位偏向波形,称单向动
3、作电位一个方向的电位偏向波形,称单向动作电位第2页,本讲稿共11页双相动作电位Biphasic Action Potential兴奋区细胞外引导电极检流计第3页,本讲稿共11页单相动作电位Monophasic Action Potential损伤区兴奋区细胞外引导电极检流计第4页,本讲稿共11页刺激伪迹(Stimulus artifact)刺激伪迹AP刺激器放大器+地刺激电流i-i+R+R-地刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。第5页,本讲稿共11页动作电位传导速度的测定MeasurementofConductionVelocityofAP+St传导速度测定=SA
4、Ct刺激器输入通道R1-Rr1+R2-R2+第6页,本讲稿共11页实验动物与器材实验动物与器材 蟾蜍或青蛙、神经标本屏蔽盒、电子刺激器、示蟾蜍或青蛙、神经标本屏蔽盒、电子刺激器、示波器或计算机生物信号采集处理系统、普通剪刀、手波器或计算机生物信号采集处理系统、普通剪刀、手术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)、玻璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养、玻璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养皿、滴管、双凹夹、培养皿、滤纸片、带电极的接线皿、滴管、双凹夹、培养皿、滤纸片、带电极的接线若干、锌铜弓,酒精灯、温度计、任氏液、若干、锌铜
5、弓,酒精灯、温度计、任氏液、1.5倍氯化倍氯化钾任氏液、钾任氏液、0.5倍氯化钠任氏液。倍氯化钠任氏液。实验方法与步骤:实验方法与步骤:1.神经肌肉标本的制备神经肌肉标本的制备 2.坐骨神经标本的制备坐骨神经标本的制备 第7页,本讲稿共11页3仪器及标本的连结仪器及标本的连结 第8页,本讲稿共11页4观测和测定双相动作电位观测和测定双相动作电位(1)缓慢增大刺激强度,缓慢增大刺激强度,观察动作电位波形的观察动作电位波形的变化。读出波宽为某一数值时的阈刺激。变化。读出波宽为某一数值时的阈刺激。(2)仔细观察双相动作电位的波形,读出最大刺)仔细观察双相动作电位的波形,读出最大刺激时双相动作电位上下
6、相的振幅和整个动作电位激时双相动作电位上下相的振幅和整个动作电位持续时间数值。持续时间数值。5观察单相动作电位观察单相动作电位 用镊子将两个引导电极用镊子将两个引导电极r1,r1之间的神经夹伤,之间的神经夹伤,再刺激时呈现的即是单相动作电位。再刺激时呈现的即是单相动作电位。第9页,本讲稿共11页6动作电位传导速度的测定及影响因素的观察动作电位传导速度的测定及影响因素的观察 换一根坐骨神经,搭放在神经屏蔽盒的电极上。给换一根坐骨神经,搭放在神经屏蔽盒的电极上。给予神经干最大刺激强度,可在两个通道中(或示波器的予神经干最大刺激强度,可在两个通道中(或示波器的上、下线)观察到先后形成的两个双向动作电
7、位波形。上、下线)观察到先后形成的两个双向动作电位波形。(1)分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时)分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时 间,设上线为间,设上线为t1,下线为,下线为t2(或可直接测量两个动或可直接测量两个动 作电位起点的间隔时间作电位起点的间隔时间),求出,求出t2t1的时间差值。的时间差值。(2)测量标本屏蔽盒中两对引导电极相应的电极之)测量标本屏蔽盒中两对引导电极相应的电极之 间的距离间的距离d(即测定即测定r1r2的间距的间距)。(4)参照上步操作可自行设计改变细胞外液的某些因)参照上步操作可自行设计改变细胞外液的某些因 素,如分别将神经干标本置于素,如分别
8、将神经干标本置于25的任氏液、高的任氏液、高 钾和低钠任氏液中浸泡钾和低钠任氏液中浸泡5 min后,再测定神经冲动后,再测定神经冲动 的传导速度。的传导速度。(3)将神经干标本置于)将神经干标本置于4的任氏液中浸泡的任氏液中浸泡5 min后,后,再测定神经冲动的传导速度。再测定神经冲动的传导速度。第10页,本讲稿共11页1什么叫刺激伪迹,是怎样发生的?怎样鉴别刺激伪迹什么叫刺激伪迹,是怎样发生的?怎样鉴别刺激伪迹 和神经干动作电位?和神经干动作电位?2神经干动作电位与刺激强度有何关系?它与神经动作神经干动作电位与刺激强度有何关系?它与神经动作 电位的电位的“全或无全或无”特性有矛盾吗?为什么特性有矛盾吗?为什么?3若改变细胞外液的某些因素,如分别将神经干标本置若改变细胞外液的某些因素,如分别将神经干标本置 于于25的任氏液、高钾和低钠任氏液中浸泡的任氏液、高钾和低钠任氏液中浸泡5 min后,后,神经冲动的传导速度是否改变?神经冲动的传导速度是否改变?思思 考考 题题 第11页,本讲稿共11页