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1、实验诊断学总实验诊断学总论论主讲;常世勤教授主讲;常世勤教授 实验诊断学实验诊断学(Laboratorydiagnosis)是涉及多种是涉及多种专业的一门边缘学科,又是一门基础医学与临床专业的一门边缘学科,又是一门基础医学与临床医学之间的桥梁学科。医学之间的桥梁学科。实验诊断主要是运用物理学、化学和生物学等实验诊断主要是运用物理学、化学和生物学等的实验室技术和方法,通过感官、试剂反应、仪的实验室技术和方法,通过感官、试剂反应、仪器分析和动物试验等手段,对病人的血液、体液、器分析和动物试验等手段,对病人的血液、体液、分泌液、排泄物以及组织细胞等标本进行检测,分泌液、排泄物以及组织细胞等标本进行检
2、测,以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料。客观资料。近年来由于现代科学包括生物化学,免疫学,近年来由于现代科学包括生物化学,免疫学,遗传学,分子生物学,重要的作用,因此实验诊遗传学,分子生物学,重要的作用,因此实验诊断已成为诊学中不可分隔的组成部分。断已成为诊学中不可分隔的组成部分。随着实验方法的标准化,检测技术随着实验方法的标准化,检测技术的自动化,质量控制制度化,科室管理的自动化,质量控制制度化,科室管理微机化,使实验误差越来越小,结果越微机化,使实验误差越来越小,结果越来越准确。但由于标本采集,保存,来越准确。但由于标本采集,保存,
3、运运输等问题,机体状态和个体差异问题,输等问题,机体状态和个体差异问题,技术人员操作水平等问题,往往会使实技术人员操作水平等问题,往往会使实验结果出现差异。因此当实验室检查结验结果出现差异。因此当实验室检查结果与临床不符时,必须结合病史和体格果与临床不符时,必须结合病史和体格检查作系统全面的分析,必要时进行动检查作系统全面的分析,必要时进行动态化验检查,以便作出正确的诊断。态化验检查,以便作出正确的诊断。二、实验室检查包括的主要内容:(做哪二、实验室检查包括的主要内容:(做哪些检查)些检查)临床一般检查:临床一般检查:血常规血常规尿常规尿常规粪便常规粪便常规体液常规体液常规 临床血液学检查:临
4、床血液学检查:为各类血液性疾病的诊断提供依据。为各类血液性疾病的诊断提供依据。血小板计数,血小板功能。血小板计数,血小板功能。骨髓细胞学检查。骨髓细胞学检查。出血、凝血检查。出血、凝血检查。贫血的实验室检查。贫血的实验室检查。缺铁性贫血。缺铁性贫血。溶血性贫血。溶血性贫血。再生障碍性贫血。再生障碍性贫血。临床生化检查:临床生化检查:是指对人体固有的生理成分,代谢排是指对人体固有的生理成分,代谢排泄产物和病理性化学成分的检查。泄产物和病理性化学成分的检查。1.肝、肾功能肝、肾功能2.血脂、血糖血脂、血糖3.酶酶4.电介质(离子)电介质(离子)5.内分泌激素内分泌激素6.血气(酸碱平衡)血气(酸碱
5、平衡)7.心肌损伤的实验室检查心肌损伤的实验室检查8.毒品、药物浓度分析毒品、药物浓度分析 临床免疫学检查:临床免疫学检查:细胞免疫。细胞免疫。体液免疫。体液免疫。感染免疫。感染免疫。肿瘤免疫。肿瘤免疫。自身免疫性疾病。自身免疫性疾病。移植免疫。移植免疫。四、保证化验质量的要素:四、保证化验质量的要素:标本收集和保存:标本收集和保存:标本采集的时间:标本采集的时间:空腹采血标本:空腹采血标本:是进食后是进食后8-12小时所小时所采取的血标本,一般晨起以后,早餐前采血。采取的血标本,一般晨起以后,早餐前采血。指定时间采血标本:指定时间采血标本:肾上腺皮质功能试验肾上腺皮质功能试验糖耐量试验糖耐量
6、试验肾小管排泌试验肾小管排泌试验药物浓度监测药物浓度监测急诊采血标本急诊采血标本抗凝剂的使用:抗凝剂的使用:肝素抗凝:肝素抗凝:肝素抑制凝血酶原变成凝血酶,肝素抑制凝血酶原变成凝血酶,是一种生理性抗凝剂,适用于绝大多数生化检是一种生理性抗凝剂,适用于绝大多数生化检查。查。EDTA-Na(K):钙离子络合剂,适用于血钙离子络合剂,适用于血液细胞计数。液细胞计数。枸椽酸钠:枸椽酸钠:与钙离子结合成不解离化合物。与钙离子结合成不解离化合物。适用于血沉、凝血机制检查。适用于血沉、凝血机制检查。氟化钠草酸盐抗凝:氟化钠草酸盐抗凝:适用于血糖检查。适用于血糖检查。标本采集量:标本采集量:一般采血一般采血2
7、-3ml即可。即可。血培养采血为血培养采血为3-5ml(血液和培养液之比为(血液和培养液之比为1:10)标本处理和保存:标本处理和保存:(1)及时送检和检测)及时送检和检测v测血糖若不用含氟化钠的抗凝剂保存,血测血糖若不用含氟化钠的抗凝剂保存,血糖以每小时糖以每小时7%速度下降。速度下降。v测血钾,血氯浓度随标本放置时间的延长测血钾,血氯浓度随标本放置时间的延长而增高。红细胞内含量高的物质进入血清。而增高。红细胞内含量高的物质进入血清。v二氧化碳逸散,血液二氧化碳逸散,血液PH增高。增高。(2)标本存放:标本溶血:)标本存放:标本溶血:v溶血可干扰测定反应中的反应过程和比色。溶血可干扰测定反应
8、中的反应过程和比色。v血红蛋白在血红蛋白在431nm和和555nm处有吸收峰,因处有吸收峰,因此测定项目用这二个波长的,可使结果假性升此测定项目用这二个波长的,可使结果假性升高,如:胆红素测定。高,如:胆红素测定。vCK在室温中存放在室温中存放4小时即可出现明显下降。小时即可出现明显下降。因此各项测定,应及时送检,及时测定。因此各项测定,应及时送检,及时测定。参考值:参考值:参考值和参考范围都是应用统计学方法参考值和参考范围都是应用统计学方法而产生。而产生。参考值是指对抽样的个体进行某项目检参考值是指对抽样的个体进行某项目检测所得的值;测所得的值;所有抽样组测得值的平均值所有抽样组测得值的平均
9、值加减其标准差即为参考范围。加减其标准差即为参考范围。影响化验结果的因素:影响化验结果的因素:生理影响因素生理影响因素(个体差异)(个体差异)遗传因素:人种,民族,家族遗传因素:人种,民族,家族生活习惯:居住条件,嗜好,饮食,激烈生活习惯:居住条件,嗜好,饮食,激烈运动,精神状态运动,精神状态环境因素:地区,海拔环境因素:地区,海拔时间:年龄因素时间:年龄因素日内差异日内差异季节差异季节差异性别:男女差别性别:男女差别月经周期变化月经周期变化年龄对生化指标的影响年龄对生化指标的影响 2.检验标本采集和处理对测定结果的影响检验标本采集和处理对测定结果的影响:体位体位从站位从站位卧位卧位血液中化学
10、成分测定值有下降趋势血液中化学成分测定值有下降趋势钙钙下降下降4%(2-7%)TP下降下降9%(7-10%)Alb下降下降9%(6.2-14%)Chol下降下降9%(5-15%)TG下降下降10%(2-20%)ALP下降下降9%(5-11%)ALT下降下降7%(4-14%)采血时应保持体位的一致性采血时应保持体位的一致性(2)止血带的使用:)止血带的使用:系止血带三分钟后系止血带三分钟后Alb,ALP,钙,钙,AST,Chol,铁等浓度升高,铁等浓度升高5-10%。3.药物干扰:药物干扰:药物中含有待测物质:药物中含有待测物质:输入葡萄糖液:测血糖输入葡萄糖液:测血糖输液补钾:测血钾输液补钾:测血钾药物中含有直接干扰化验测定过程中的酶,药物中含有直接干扰化验测定过程中的酶,影响氧化还原反应影响氧化还原反应VitC是很强的还原剂口服避是很强的还原剂口服避孕药和雌激素药物孕药和雌激素药物药物含有色素:在化学显色反应测定中可药物含有色素:在化学显色反应测定中可使结果偏高。使结果偏高。VitB2,利福平,利福平