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1、第四章 消毒与灭菌1 采用多种物理、化学或生物学的方法来抑制或杀死微生物的方法。v 物理消毒灭菌法 v 化学消毒灭菌法2消毒（消毒（disinfection）杀灭物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌芽胞。灭菌（灭菌（sterilization）杀灭物体上所有微生物的方法，包括细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌（抑菌（bacteriostasis）抑制体内或体外细菌的繁殖。防腐防腐（antisepsis）防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。无菌无菌（asepsis）不存在活的微生物。无菌技术无菌技术是指在进行外科手术或分离、转种及培养微生物时防止其他微生物污染实验材料的操作方法
2、。基本概念：3第一节 物理消毒灭菌法l热力灭菌法l辐射灭菌法l滤过除菌法l超声波灭菌法l干燥与低温抑菌法4一、热力灭菌法原理高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。方法 湿热灭菌 干热灭菌51.干热灭菌法6电热干烤箱电热干烤箱 7l巴氏消毒法：巴氏消毒法：63 30min or 72 1530sec，用于牛奶、酒类的消毒。l煮沸法：煮沸法：100 510min，用于消毒食具、刀剪、注射器等。l流动蒸气消毒法：流动蒸气消毒法：100 蒸汽1530min，芽胞不能全部杀灭。l间歇蒸气灭菌法：间歇蒸气灭菌法：100 蒸汽1530min，37 过夜，再100 蒸汽1530min，如此连续三次以上。
3、适于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。l高压蒸气灭菌法：高压蒸气灭菌法：103.4kPa蒸汽压，121.3 1520min，适于普通培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌。2.湿热灭菌法8手提式高压蒸汽灭菌器立式高压蒸汽灭菌器9立式智能高压蒸汽灭菌器10干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较加热方式传导介质温度（）加热时间（h）透过布层温度（）结果20层40层100层干热空气1301404867270以下 灭菌不完全湿热饱和蒸汽105.3310110l10l灭菌完全11二、辐射杀菌法（一）紫外线（一）紫外线：波长265266nmp杀菌原理：主要作用于细菌DNA，使相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成
4、二聚体，从而干扰DNA复制和转录，导致细菌变异和死亡。p用途与缺陷：穿透力弱穿透力弱，只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒和不耐热的物品表面消毒。12（二）电离辐射（二）电离辐射：包括x射线和射线，有较高的能量与穿透力。用于食品、一次性医用塑料制品的消毒。（三）微波（三）微波：可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介质，但不能穿透金属。常用于非金属器械消毒，实验室用品、食品餐具、药杯等消毒。13三、过滤除菌法p是用物理阻留的方法除去液体和气体的微生物。p主要适合于不耐高温的血清、抗生素、抗毒素、血清、抗生素、抗毒素、药液以及空气药液以及空气除菌。p不能去除病毒、支原体、衣原体等。14滤菌器 杯
5、式过滤器圆筒式过滤器1516四、超声波杀菌法 目前主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。17 五、干燥与低温抑菌法 干燥法常用于保存食物。低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存细菌菌种，冷冻真空干燥法冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。18第二节 化学消毒灭菌法19一、消毒剂的主要种类l根据杀灭微生物作用的能力l高效消毒剂：戊二醛、甲醛l中效消毒剂：乙醇、碘伏 l低效消毒剂：新洁尔灭、洗必泰 20l根据杀菌机制根据杀菌机制l l促进菌体蛋白质变性或凝固促进菌体蛋白质变性或凝固促进菌体蛋白质变性或凝固促进菌体蛋白质变性或凝固 酚类酚类(高浓度高浓度)、醇类等、醇类等l l干扰细菌的
6、酶系统和代谢干扰细菌的酶系统和代谢干扰细菌的酶系统和代谢干扰细菌的酶系统和代谢 某些氧化剂、重金属盐类等某些氧化剂、重金属盐类等l l损伤细菌细胞膜损伤细菌细胞膜损伤细菌细胞膜损伤细菌细胞膜 酚类酚类(低浓度低浓度)、表面活性剂等、表面活性剂等21l根据化学结构与性质根据化学结构与性质l酚类酚类石炭酸（苯酚）、来苏（甲酚皂）、洗必泰（石炭酸（苯酚）、来苏（甲酚皂）、洗必泰（氯已定）氯已定）等等l醇类醇类70%75%乙醇杀菌力最强乙醇杀菌力最强l重金属盐类红汞等重金属盐类红汞等l氧化剂氧化剂过氧化氢、过氧乙酸等过氧化氢、过氧乙酸等l表面活性剂增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂，表面活性
7、剂增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂，如新洁尔灭（如新洁尔灭（苯扎溴铵）苯扎溴铵）等等l烷化剂甲醛等，杀菌力强，但毒烷化剂甲醛等，杀菌力强，但毒性大性大22二、消毒剂的应用231.患者排泄物与分泌物 粪、尿、脓、痰等，多用等量的等量的20%漂白漂白粉、粉、5%石炭酸或石炭酸或2%来苏儿来苏儿搅拌均匀，作用2h再倾去。厕所、阴沟的消毒多采用生石灰。24 2.皮肤（手）l外科手术常采用0.1%新洁而灭、新洁而灭、0.01%洗必泰洗必泰泡手。l传染科医护人员手的消毒常用0.2%-0.4%过氧乙酸过氧乙酸 浸泡,可以杀灭乙肝病毒。l注射或手术部位局部消毒用2.5%碘酒、碘酒、70%酒精酒精。
8、l皮肤浅表创伤可用2%红汞红汞。25 3.粘膜l预防新生儿淋球菌性眼结膜炎：1%硝酸银硝酸银滴眼l口腔粘膜消毒：3%过氧化氢过氧化氢l冲洗尿道、阴道、膀胱：0.1%高锰酸钾或高锰酸钾或0.01%洗必泰洗必泰等。26 4.水 l煮沸法l自来水用氯气消毒l漂白粉275.空气l常用甲醛甲醛加热或甲醛混合高锰酸钾熏蒸：甲醛40ml加高锰酸钾30g/m3，熏蒸1224h。l居室空气消毒可用5-10ml醋酸醋酸/m3加等量水加热蒸发。l肝炎病房可用3g/m3过氧乙酸过氧乙酸熏蒸90min。28 6.食具的消毒l 煮沸15-30minl 0.5%1%漂白粉或过氧乙酸漂白粉或过氧乙酸液浸泡3060min。7.蔬菜、瓜果 采用0.1%高锰酸钾高锰酸钾浸泡15min。298.温度计l70%75酒精酒精浸泡30min。l肝炎者用2%碘酒浸泡5min后用70%酒精脱碘。30第三节 影响消毒灭菌效果的因素v消毒剂的性质、浓度与作用时间v微生物的种类与数量v温度与湿度v酸碱度v有机物v化学拮抗物质31本章主要复习内容v消毒、灭菌等基本概念v各种消毒灭菌方法的应用及常见物品的消毒灭菌方法。32