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1、 临床病原学检验临床病原学检验上海交通大学医学院xx教授 1 1谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29前前 言言n n实验诊断学实验诊断学实验诊断学实验诊断学(laboratory diagnosis)(laboratory diagnosis)是诊是诊是诊是诊断学的一部分断学的一部分断学的一部分断学的一部分,它是基础医学向临床医学过渡它是基础医学向临床医学过渡它是基础医学向临床医学过渡它是基础医学向临床医学过渡的桥梁课程之一。实验诊断学的任务是将临床的桥梁课程之一。实验诊断学的任务是将临床的桥梁课程之一。实验诊断学的任务是将临床的桥梁课程之一。实验诊断学的任务是将临床检验所提供
2、的检验信息,通过医师的分析和思检验所提供的检验信息,通过医师的分析和思检验所提供的检验信息,通过医师的分析和思检验所提供的检验信息,通过医师的分析和思维,科学地应用于临床诊断、鉴别诊断、观察维,科学地应用于临床诊断、鉴别诊断、观察维,科学地应用于临床诊断、鉴别诊断、观察维,科学地应用于临床诊断、鉴别诊断、观察病情、判断预后、预防疾病的一门学科,特别病情、判断预后、预防疾病的一门学科,特别病情、判断预后、预防疾病的一门学科,特别病情、判断预后、预防疾病的一门学科,特别强调在循证实验医学的原则下推行强调在循证实验医学的原则下推行强调在循证实验医学的原则下推行强调在循证实验医学的原则下推行“实验的优
3、实验的优实验的优实验的优化组合应用化组合应用化组合应用化组合应用”和和和和“在实验监测下作个体化治疗在实验监测下作个体化治疗在实验监测下作个体化治疗在实验监测下作个体化治疗的应用的应用的应用的应用”,实验诊断学也可称为,实验诊断学也可称为,实验诊断学也可称为,实验诊断学也可称为临床检验诊断临床检验诊断临床检验诊断临床检验诊断学学学学。因此,它是医学生的必修课,必须加以重。因此,它是医学生的必修课,必须加以重。因此,它是医学生的必修课,必须加以重。因此,它是医学生的必修课,必须加以重视。视。视。视。2 2谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n nClinical laborato
4、ry Clinical laboratory or or medical medical laboratorylaboratory is is intended to beintended to be inclusive inclusive and cover all institutions providing a and cover all institutions providing a pathology service or pathology service or performing performing teststests on specimens from human on
5、 specimens from human beings.It is for the biological,beings.It is for the biological,microbiological,immunological,microbiological,immunological,chemical,immunohematological,chemical,immunohematological,hematological,biophysical,hematological,biophysical,cytological,pathological,or other cytologica
6、l,pathological,or other testing of materials derived testing of materials derived fromfrom the the human body human body for the purposefor the purpose of of providing information for the providing information for the diagnosis,prevention,treatment of diagnosis,prevention,treatment of disease or the
7、 assessment of the disease or the assessment of the health of human beings.health of human beings.3 3谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-294 4谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-295 5谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-296 6谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-297 7谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-298 8谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-299 9谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-2
8、9一、临床病原体检查目的一、临床病原体检查目的n n临床病原体检查目的临床病原体检查目的:是确定感染的发生和性质,在疾是确定感染的发生和性质,在疾病早期提供恰当的治疗方案,并采取病早期提供恰当的治疗方案,并采取有效的预防措施,防止感染传播造成有效的预防措施,防止感染传播造成的危害。的危害。1010谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29二、各种不同病原体的实验诊二、各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则断方法遵循以下基本原则1.1.正确、规范采集和运送标本。正确、规范采集和运送标本。2.2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原,直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原,借助分子生
9、物学的方法检测病原体核酸,借助分子生物学的方法检测病原体核酸,结合病人的病史、症状或体征,快速作出结合病人的病史、症状或体征,快速作出初步诊断。初步诊断。1111谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29二、各种不同病原体的实验诊断方法遵循以二、各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则:下基本原则:3.3.初步诊断同时,对病原体进行分离与鉴定。初步诊断同时,对病原体进行分离与鉴定。4.4.检测机体对病原体的免疫产物。检测机体对病原体的免疫产物。5.5.参与临床选择抗菌药物,指导和监控微生参与临床选择抗菌药物,指导和监控微生物的治疗方案,避免物的治疗方案,避免 耐药菌株的产生。耐药
10、菌株的产生。1212谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n n泌尿生殖道标本:泌尿生殖道标本:n n根据不同疾病采集不同标本,如性传根据不同疾病采集不同标本,如性传播疾病常取尿道口分泌物、外阴糜烂播疾病常取尿道口分泌物、外阴糜烂面病灶边缘分泌物阴道宫颈口分泌物面病灶边缘分泌物阴道宫颈口分泌物和前列腺液等。和前列腺液等。n n除淋病奈瑟菌保温送检外,所有标本除淋病奈瑟菌保温送检外,所有标本4保存。保存。1313谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29三、标本的采集和运送三、标本的采集和运送n n血液标本血液标本n n采血时间:发热初期和高峰期,已用抗菌采血时间:发热初
11、期和高峰期,已用抗菌药物治疗者在下次用药前。药物治疗者在下次用药前。n n采血量:成人采血量:成人1020ml,婴儿和儿童为,婴儿和儿童为12ml。n n运送:血液置于含抗凝集聚茴香脑磺酸钠运送:血液置于含抗凝集聚茴香脑磺酸钠无菌瓶中送检。无菌瓶中送检。1414谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n n脑脊液标本脑脊液标本n n脑脊液应立即保温送检或床边接种脑脊液应立即保温送检或床边接种(引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌、(引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌等抵抗力弱)肺炎链球菌等抵抗力弱)n n胸水、腹水和心包液等含菌量少宜采胸水、腹水和心包液等含菌量少宜采集较大量标本
12、送检。集较大量标本送检。1515谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n n尿液标本尿液标本n n应注意无菌操作,取清洁中断尿。应注意无菌操作,取清洁中断尿。n n厌氧培养采用膀胱穿刺法、无菌厌氧厌氧培养采用膀胱穿刺法、无菌厌氧小瓶运送,排尿困难者可导尿。小瓶运送,排尿困难者可导尿。1616谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n n呼吸道标本呼吸道标本n n标本种类:鼻咽拭子、痰、通过气管标本种类:鼻咽拭子、痰、通过气管收集的标本。收集的标本。n n合格的痰标本合格的痰标本:扁平上皮细胞扁平上皮细胞25个个/高倍视野。高倍视野。1717谢谢观赏谢谢观赏2019-6
13、-292019-6-29n n粪便标本:粪便标本:n n含脓、血、粘液粪便置于清洁容器中送含脓、血、粘液粪便置于清洁容器中送检。检。n n根据细菌不同种类选用合适运送培养基,根据细菌不同种类选用合适运送培养基,如疑为副溶血弧菌引起腹泻的粪便置于如疑为副溶血弧菌引起腹泻的粪便置于碱性蛋白胨水或卡碱性蛋白胨水或卡-布运送培养液布运送培养液。1818谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29n n创伤、组织和脓肿标本创伤、组织和脓肿标本创伤、组织和脓肿标本创伤、组织和脓肿标本n n采集部位首先清除污物,防止表面污染菌混入。采集部位首先清除污物,防止表面污染菌混入。采集部位首先清除污物,防止
14、表面污染菌混入。采集部位首先清除污物,防止表面污染菌混入。n n采集方法:采集方法:采集方法:采集方法:大面积创伤大面积创伤大面积创伤大面积创伤不同部位采集多份标本。不同部位采集多份标本。不同部位采集多份标本。不同部位采集多份标本。开放性脓肿开放性脓肿开放性脓肿开放性脓肿无菌棉试采取脓液及病灶深部分无菌棉试采取脓液及病灶深部分无菌棉试采取脓液及病灶深部分无菌棉试采取脓液及病灶深部分泌物。泌物。泌物。泌物。厌氧菌感染厌氧菌感染厌氧菌感染厌氧菌感染取脓后立即排尽注射器内空气取脓后立即排尽注射器内空气取脓后立即排尽注射器内空气取脓后立即排尽注射器内空气。1919谢谢观赏谢谢观赏2019-6-2920
15、19-6-29 n n血清标本血清标本n n用于检测患者特异性抗体效价用于检测患者特异性抗体效价n n采集血液置无菌管中,自然凝固、血块收采集血液置无菌管中,自然凝固、血块收缩后吸取血清,缩后吸取血清,56加热加热30min以灭活补以灭活补体成分。体成分。n n灭活血清保存于灭活血清保存于-202020谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29Specimen Collection 1.1.Successful Successful laboratory laboratory diagnosis diagnosis of of a a microbial microbial infe
16、ction infection depends depends on on many many factors factors beginning beginning with with a a well-collected well-collected sample.sample.2.2.Proper Proper specimen specimen selection,selection,collection,collection,and and transport transport are are all all essential essential to to ensure ens
17、ure that that a a specimen specimen is is representative representative of of the the disease disease process process and and minimally minimally contaminated contaminated with with microorganisms microorganisms present in adjacent tissuespresent in adjacent tissues.2121谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29Sit
18、e and Timing1.1.Collect Collect the the sample sample from from the the correct correct anatomic anatomic sitesite.eg.eg.a a superficial superficial sample sample of of a a lesion lesion is is not useful in identifying the cause of a deep wound infection.not useful in identifying the cause of a deep
19、 wound infection.2.2.The The timing timing of of sample sample collection collection is is also also important.important.eg,eg,when when submitting submitting a a specimen specimen for for bacterial bacterial culture,culture,samples samples should should be be collected collected before before the t
20、he administration of antibioticsadministration of antibiotics 2222谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29Collection Techniques1.1.Sufficient volume Sufficient volume 2.2.Sterile technique and equipment.Sterile technique and equipment.3.3.After After collection,collection,the the specimen specimen must must be be
21、 placed placed in in an an appropriately appropriately labeled labeled leak-leak-proof container.proof container.2323谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29Transport of Specimens1.1.Rapid,optimally in less than 2 hours.Rapid,optimally in less than 2 hours.2.2.For For delays delays in in transport,transport,most
22、most specimens specimens should should be be refrigerated.refrigerated.3.3.Exceptions:Exceptions:blood,blood,cerebrospinal cerebrospinal fluid fluid(CSF),(CSF),and and specimens specimens to to be be examined examined for for anaerobes,anaerobes,fastidious fastidious organisms organisms such such as
23、 as Neisseria Neisseria gonorrboeae gonorrboeae and and Bordetella Bordetella pertussispertussis,and and Trichomonas Trichomonas vaginalisvaginalis,all all of of which which should should be be maintained at maintained at room temperatureroom temperature.2424谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-292525谢谢观赏谢谢观赏2019-6-292019-6-29