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1、生物显微镜的原理及使用生物显微镜的原理及使用一、实验目的:一、实验目的:掌握普通复式光学显微镜的原理、构造及其使用方法。掌握普通复式光学显微镜的原理、构造及其使用方法。二、普通复式光学显微镜原理二、普通复式光学显微镜原理 是将两个凸透镜是将两个凸透镜系统适当地组合在仪系统适当地组合在仪器上对标本进行放大,器上对标本进行放大,经物镜形成倒立实像,经物镜形成倒立实像,经目镜放大成虚像。经目镜放大成虚像。1、照明系统、照明系统:光源:光源(普通光线可见光普通光线可见光)、折光镜、折光镜、聚光镜、滤光片聚光镜、滤光片 2、光学放大系统、光学放大系统:两组玻璃透镜:两组玻璃透镜目镜、物镜目镜、物镜 3、
2、机械装置、机械装置:保证光学系统的准确配置和灵活调:保证光学系统的准确配置和灵活调控控三、三、普通复式光学显微镜构造普通复式光学显微镜构造普通复式光学显微镜普通复式光学显微镜镜筒镜筒载物台载物台聚光镜聚光镜光阑光阑粗动螺旋粗动螺旋微动螺旋微动螺旋照明装置照明装置基座基座棱镜棱镜光路图光路图四、四、普通复式光学显微镜普通复式光学显微镜使用方法使用方法 1取镜和安放取镜和安放:显微镜平时存放在柜或箱中,:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,略偏左(显将显微镜放在自己左肩前方的实验台上
3、,略偏左(显微镜放在距实验台边缘微镜放在距实验台边缘7cm左右处),镜座后端距桌左右处),镜座后端距桌边边46cm为宜,便于坐着操作。安装好目镜和物镜。为宜,便于坐着操作。安装好目镜和物镜。安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜,然后用右安装物镜时要用左手食指和中指托住物镜,然后用右手将物镜装上去,这样即使没安装好,也不会摔到地手将物镜装上去,这样即使没安装好,也不会摔到地上。上。2、对光:、对光:用拇指和中指移动旋转器用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物切忌手持物镜移动镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔,使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心叩声时,
4、说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈,。打开光圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察观察(右眼睁开右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内,同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。的光线均匀明亮为止。3、放置玻片标本:、放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位调到通光孔的正中。调到通光孔的正中。4、调节焦距:、调
5、节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5mm处,处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。如果物象不
6、在视野中心,可调节推片器将其调到中心如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,一过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,一般显微镜的物距在般显微镜的物距在cm左右。如果物距已远超过左右。如果物距已远超过cm,仍未看到物像,仍未看到物像,那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快,此时应调整装片那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋速度过快,此时应调整装片
7、位置,然后再重复上述步骤,当视野中出现模糊的物像时,就要换用细位置,然后再重复上述步骤,当视野中出现模糊的物像时,就要换用细准焦螺旋调节,使看到的物像更加清晰。只有这样,才能缩小,切不可准焦螺旋调节,使看到的物像更加清晰。只有这样,才能缩小,切不可心急而盲目地上升镜台。心急而盲目地上升镜台。5、观察:、观察:使用准焦螺旋调节焦距,找到物象可以使用准焦螺旋调节焦距,找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步,也是学生感觉最难说是显微镜使用中最重要的一步,也是学生感觉最难的一步。用显微镜观察物体时,应双眼同时睁开,左的一步。用显微镜观察物体时,应双眼同时睁开,左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋
8、,使镜筒眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。寻找范围,提高找到缓缓上升,直到看清物像为止。寻找范围,提高找到物像的速度。物像的速度。6、转换物镜:、转换物镜:使用低倍镜后换用高倍镜时应手握转换使用低倍镜后换用高倍镜时应手握转换器的下层转动板转换物镜。不能用手指直接推转物镜,因为器的下层转动板转换物镜。不能用手指直接推转物镜,因为这样虽比较省力,但因转换器的材料质地较软,精度较高,这样虽比较省力,但因转换器的材料质地较软,精度较高,螺纹受力不均匀很容易松脱,容易使物镜的光轴发生偏斜。螺纹受力不均匀很容易松脱,容易使物镜的光轴发生偏斜。一旦螺纹破坏,整个转换器
9、就会报废。一旦螺纹破坏,整个转换器就会报废。高倍镜的使用方法:高倍镜的使用方法:一定要先在低倍镜下选好一定要先在低倍镜下选好目标后,把需进一步观察的部位调到中心,同时把目标后,把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,然后转动转换器,调换物象调节到最清晰的程度,然后转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头,如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜焦距没有调好,应重新操作。碰到玻片,说明低倍镜焦距没有调好,应重新操作。调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼
10、观察,物调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼观察,物象不太清楚的,可将细调节器的螺旋逆时针移动约象不太清楚的,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.51圈,即可获得清晰的物象圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器切勿用粗调节器!)。如果亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如如果亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如需要更换玻片标本时,必须顺时针需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。油镜的使用方法:油镜的使用方法:经低、高倍镜观察,然后将需经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。
11、将集光器上升进一步放大的部分移到视野的中心。将集光器上升到最高位置,光圈开到最大。转动转换器,使高倍到最高位置,光圈开到最大。转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。用左眼观察目镜,并慢慢又不以压破载玻片为宜。用左眼观察目镜,并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。转动细调节器至物象清晰为止。如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加如果不出
12、现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:低倍油区之外重找时应按:低倍高倍高倍油镜程序。在油镜程序。在加油区内重找应按:低倍加油区内重找应按:低倍油镜程序,不得经高倍油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头。镜,以免油沾污镜头。油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去,再用干擦镜纸擦干净。头上和标本上的香柏油擦去,再用干擦镜纸擦干净。7、边观察边画图。、边观察边画图。8、整理登记:、整理登记:实验完毕,取下标本片,把显微实验完毕,取下标本片,把显微镜的外表擦拭干净。转动旋转器使镜头离开通光孔,镜的外表擦拭干净。转动旋转器使
13、镜头离开通光孔,下降镜台,平放反光镜,下降集光器下降镜台,平放反光镜,下降集光器(但不要接触反但不要接触反光镜光镜)、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,、关闭光圈,推片器回位,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内。最后填写使用登记表。放回实验台柜内。最后填写使用登记表。五、光学显微镜的维护要点:五、光学显微镜的维护要点:1、取送显微镜时一定要一手握住弯臂,另一手、取送显微镜时一定要一手握住弯臂,另一手托住底座。显微镜不能倾斜,以免目镜从镜筒上端托住底座。显微镜不能倾斜,以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。不可把显微镜放滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。不可把显微镜放置在实验台的边缘,以免
14、碰翻落地。置在实验台的边缘,以免碰翻落地。2、观察时,不能随便移动显微镜的位置。、观察时,不能随便移动显微镜的位置。3、保持显微镜的干燥、清洁,避免灰尘、水及化、保持显微镜的干燥、清洁,避免灰尘、水及化学试剂的玷污。显微镜的光学部分只能用特殊的擦学试剂的玷污。显微镜的光学部分只能用特殊的擦镜纸与溶液一同擦拭,不能乱用他物擦拭,更不能镜纸与溶液一同擦拭,不能乱用他物擦拭,更不能用手指触摸透镜,以免汗液玷污透镜。切忌口吹手用手指触摸透镜,以免汗液玷污透镜。切忌口吹手抹或用布擦,机械部分用布擦拭。抹或用布擦,机械部分用布擦拭。水滴、酒精或其水滴、酒精或其它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即擦净。
15、它药品切勿接触镜头和镜台,如果沾污应立即擦净。4放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放置玻片标本时要对准通光孔中央,且不能反放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。放玻片,防止压坏玻片或碰坏物镜。5、转换物镜镜头时,不要搬动物镜镜头,只能转、转换物镜镜头时,不要搬动物镜镜头,只能转动转换器。现在显微镜有电动转换动转换器。现在显微镜有电动转换,使用也很方便使用也很方便,是一个发展方向。是一个发展方向。6、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮、切勿随意转动调焦手轮。使用微动调焦旋钮时,用力要轻,转动要慢,转不动时不要硬转。时,用力要轻,转动要慢,转不动时不要硬转。7、不得任意拆卸显微镜上的零件,严禁
16、随意拆、不得任意拆卸显微镜上的零件,严禁随意拆卸物镜镜头,以免损伤转换器螺口,或螺口松动后卸物镜镜头,以免损伤转换器螺口,或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。使低高倍物镜转换时不齐焦。9 9、用毕将光源调到最小、用毕将光源调到最小,延长灯泡的使用寿命。延长灯泡的使用寿命。1010、物镜和目镜的生霉生雾的处理办法:、物镜和目镜的生霉生雾的处理办法:准备准备30%30%无水乙醇无水乙醇 +70%+70%乙醚,将不同的镜头单独分乙醚,将不同的镜头单独分开放置干燥剂器皿中,最好用棉花棒,纱布,柔软开放置干燥剂器皿中,最好用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭,注意不能用力擦,的刷子等比较柔
17、软的东西来擦拭,注意不能用力擦,以防止损伤镀膜层。油镜当时就要清洗,特别是以防止损伤镀膜层。油镜当时就要清洗,特别是100X100X的油镜,处理不当的话,前片容易浸油或开胶。的油镜,处理不当的话,前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗,目镜可以自己拆下来清洗,16X16X目镜注意别装反了,目镜注意别装反了,前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做,易弄脏镜头,厂家可配备一个指针。一般发来做,易弄脏镜头,厂家可配备一个指针。一般2 2个月最好能集中保养一次。显微镜多时,各个镜头个月最好能集中保养一次。显微镜多时,各个镜头要标号以免弄错了搭
18、配。要标号以免弄错了搭配。11、透镜的清洁、透镜的清洁 清洁灰尘用用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔清洁灰尘用用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来,注意轻软的东西来,注意轻 柔柔 慢慢 缓。有些较顽固的污迹如油迹,缓。有些较顽固的污迹如油迹,指纹等,可以用干净的软棉布,棉花棒镜头纸等蘸上无水指纹等,可以用干净的软棉布,棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油,应用镜头纸,酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油,应用镜头纸,软棉布或纱布,蘸上二甲苯轻轻擦去。注意,不要用二甲软棉布或纱布,蘸上二甲苯轻轻擦去。注意,不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯容易燃烧,在将电源开关打开或关闭时为纯酒精和二甲苯容易燃烧,在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。12.定期检查定期检查 显微镜的精细和贵重,要求我们要更加的爱护它。显微镜的精细和贵重,要求我们要更加的爱护它。为了保持它的性能的稳定,我们建议您定期的检查,保养。为了保持它的性能的稳定,我们建议您定期的检查,保养。