《《分子伴侣》PPT课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《分子伴侣》PPT课件.ppt（39页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、分子伴侣分子伴侣2009-3-14 分子伴侣（分子伴侣（Chaperone或或molecular chaperone，可译为侣伴蛋白，英文单词原，可译为侣伴蛋白，英文单词原意是指一种年老妇女的职业，她们负责监管意是指一种年老妇女的职业，她们负责监管年轻未婚少女的行为年轻未婚少女的行为)，是一类协助，是一类协助细胞细胞内分内分子组装和协助子组装和协助蛋白质折叠蛋白质折叠的的蛋白质蛋白质。分子伴侣概述分子伴侣概述 1978年年Lasky首先在非洲爪蟾首先在非洲爪蟾(Xenopus laevis)卵的浸出液中发现的，并提出了分子伴侣的概念卵的浸出液中发现的，并提出了分子伴侣的概念。他将细胞核内能与。
2、他将细胞核内能与组蛋白组蛋白结合并介导核小体有结合并介导核小体有序组装的核质素序组装的核质素(nucleoplasmin)称为称为分子伴侣。分子伴侣。分子伴侣概述分子伴侣概述 20世纪世纪90年代，年代，Ellis将这一概念延伸为将这一概念延伸为“一类一类在在序列上没有相关性序列上没有相关性但但有共同功能有共同功能的蛋白质，它的蛋白质，它们在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组们在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装，而且在组装完毕后与之分离，不构成这些蛋装，而且在组装完毕后与之分离，不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份白质结构执行功能时的组份”。功能上的概念功能上的概念分子伴侣概述分子
3、伴侣概述v分子伴侣的分子伴侣的作用机制作用机制实际上就是它如何识别靶蛋实际上就是它如何识别靶蛋白，怎样与它结合，结合后会发生什么变化，在白，怎样与它结合，结合后会发生什么变化，在什么条件下又解离，解离后分子伴侣和靶蛋白又什么条件下又解离，解离后分子伴侣和靶蛋白又会如何等这样的问题。会如何等这样的问题。v对此目前认识还很少，现在只知道分子伴侣对此目前认识还很少，现在只知道分子伴侣识别识别折叠中间物的折叠中间物的非天然构象非天然构象，而不能识别天然的构，而不能识别天然的构象。象。分子伴侣概述分子伴侣概述v到底非天然构象的什么特征能被分子伴侣识别还到底非天然构象的什么特征能被分子伴侣识别还不清楚不清
4、楚，只知道在天然构象中，只知道在天然构象中，疏水残基疏水残基多半位多半位于分子的内部而形成于分子的内部而形成疏水核疏水核，去折叠后就可能暴，去折叠后就可能暴露出来，或者在新生肽段的折叠过程中，会暂时露出来，或者在新生肽段的折叠过程中，会暂时形成在天然构象中本应该存在于分子内部的疏水形成在天然构象中本应该存在于分子内部的疏水表面，因此认为表面，因此认为分子伴侣最有可能是与疏水表面分子伴侣最有可能是与疏水表面相结合。相结合。分子伴侣的类型分子伴侣的类型 伴侣素家族（伴侣素家族（chaperonin,Cpn）vCpn 家族是具有独特的双层家族是具有独特的双层 7-9 元环状结构的元环状结构的寡聚蛋白
5、，以寡聚蛋白，以依赖依赖 ATP 的方式促进体内正常和的方式促进体内正常和应急条件下的蛋白质折叠。应急条件下的蛋白质折叠。v Cpns 又分为两组：又分为两组：GroEL(Hsp60)家族家族和和 TriC 家族。家族。GroEL（HSP60）型伴侣素型伴侣素v存在于真细菌、线粒体和叶绿体中，由双层存在于真细菌、线粒体和叶绿体中，由双层 7 个亚个亚基组成的圆环组成，每个亚基分子量约为基组成的圆环组成，每个亚基分子量约为 60Ku。它们在体内与一种辅助因子，如它们在体内与一种辅助因子，如 E.coli 中的中的 GroES，协同作用以帮助蛋白折叠。除了叶绿体中，协同作用以帮助蛋白折叠。除了叶绿
6、体中的类似物外，这些蛋白是应急反应诱导的。的类似物外，这些蛋白是应急反应诱导的。大肠杆菌大肠杆菌GroEL-GroES复合体复合体 TRiC 型伴侣素型伴侣素vTRiC 型（型（TCP-1 环状复合物）存在于环状复合物）存在于古细菌古细菌和和真真核细胞质核细胞质中，由双层中，由双层 8 或或 9 元环组成，亚基分子量元环组成，亚基分子量约为约为 55K，与小鼠中，与小鼠中 TCP-1 尾复合蛋白（尾复合蛋白（TCP-1 tail complex protein）有同源性。这种）有同源性。这种 Cpn 没有没有类似类似 GroES 的辅助因子，而且只有古细菌中的成的辅助因子，而且只有古细菌中的成
7、员有应急诱导性员有应急诱导性应激蛋白应激蛋白70家族家族(Stress-70 family)v又称为又称为热休克蛋白热休克蛋白（Heat Shock Proteins）70家族（家族（Hsp70 family），是一类高度保守的），是一类高度保守的ATP酶，广泛存在于原核和真核细胞中，在蛋白质的酶，广泛存在于原核和真核细胞中，在蛋白质的折叠、跨膜运输、错误折叠多肽的降解折叠、跨膜运输、错误折叠多肽的降解及及调控调控过过程中有重要的作用。在体内，程中有重要的作用。在体内，Hsp70家族成员的家族成员的主要功能是以主要功能是以ATP依赖的方式结合未折叠多肽链依赖的方式结合未折叠多肽链的疏水区以稳定
8、蛋白质的未折叠状态，再通过有的疏水区以稳定蛋白质的未折叠状态，再通过有控制的释放帮助其折叠。控制的释放帮助其折叠。Hsp70复合体复合体vHsp70作为一种重要的作为一种重要的内源性保护因子内源性保护因子，可提高肺，可提高肺组织对各种损伤的耐受性。肺组织中组织对各种损伤的耐受性。肺组织中Hsp70表达的表达的增加可增加可减轻肺水肿减轻肺水肿及及炎性炎性反应，减少肺组织细胞凋反应，减少肺组织细胞凋亡，从而改善氧合功能，降低病死率。亡，从而改善氧合功能，降低病死率。v增加心脏组织中增加心脏组织中Hsp70基因的表达，可使心脏具有基因的表达，可使心脏具有抵抗缺血抵抗缺血或或内毒素损伤内毒素损伤的作用
9、的作用Hsp70的功能的功能v近几年近几年，有关，有关Hsp70的研究已成为分子生的研究已成为分子生物学的一大热点，并逐渐物学的一大热点，并逐渐成为临床多种疾病成为临床多种疾病治疗的新途径治疗的新途径。由于。由于Hsp能够对各种形式的能够对各种形式的组织细胞损伤提供保护作用，随着研究的深组织细胞损伤提供保护作用，随着研究的深人，应用药物或基因工程等技术诱导人，应用药物或基因工程等技术诱导Hsp作作为肺损伤的治疗方法颇具前景为肺损伤的治疗方法颇具前景。应激蛋白应激蛋白90家族（家族（Stress-90 family）v即热休克蛋白即热休克蛋白90家族（家族（Hsp90 family），），Hsp
10、90是一种是一种ATP依赖依赖的伴侣蛋白，当的伴侣蛋白，当ATP结结合后，合后，Hsp90构象改变，形成二聚体。构象改变，形成二聚体。Hsp90多以多以-和和-同源二聚体存在。同源二聚体存在。vHsp90是细胞内最活跃的分子伴侣之一，广泛是细胞内最活跃的分子伴侣之一，广泛参与细胞的参与细胞的信号转导信号转导、激素应答激素应答及及转录调控转录调控过过程，对细胞在程，对细胞在生理、病理生理、病理及及应激应激条件下的生存条件下的生存发挥了重要作用发挥了重要作用vHsp90还与还与某些信号途径某些信号途径中许多信号分子的折中许多信号分子的折叠与组装密切相关，主要是叠与组装密切相关，主要是Hsp90的结
11、合与解的结合与解离，介导了这些分子在非活性形式与活性形式离，介导了这些分子在非活性形式与活性形式间的转化。间的转化。Hsp90的功能的功能v近年来近年来Hsp90在在肿瘤组织中肿瘤组织中的作用也受到的作用也受到广泛重视。广泛重视。Hsp90与相应的底物结合而在与相应的底物结合而在肿瘤的形成和发展中起一定作用，其底物肿瘤的形成和发展中起一定作用，其底物有一定选择性，大多数底物为有一定选择性，大多数底物为与细胞信号与细胞信号转导相关的蛋白激酶转导相关的蛋白激酶及及某些转录因子某些转录因子。目。目前已经证实前已经证实Hsp90的底物有的底物有100多种。多种。vHsp90及其及其抑制剂抑制剂已经成为
12、抗肿瘤研究的已经成为抗肿瘤研究的新靶新靶点点。格尔德霉素格尔德霉素是第是第1个个Hsp90抑制剂，是一抑制剂，是一种分离自链霉素吸水菌素的天然产物种分离自链霉素吸水菌素的天然产物v另外也是另外也是白血病治疗白血病治疗的分子靶点的分子靶点热休克蛋白热休克蛋白(Heat Shock Proteins,Hsps)v1962年年意大利意大利遗传学家遗传学家Ritossa在在果蝇果蝇(Drosophila)体内体内发现的，是机体在发现的，是机体在某些应激（高温、病毒感染、某些应激（高温、病毒感染、缺氧、重金属、饥饿、创伤及紫外线照射等）状态下缺氧、重金属、饥饿、创伤及紫外线照射等）状态下，诱导合成的一组
13、高度表达的保守蛋白质，称为应激蛋诱导合成的一组高度表达的保守蛋白质，称为应激蛋白。广泛存在于原核和真核生物中，多以分子伴侣的白。广泛存在于原核和真核生物中，多以分子伴侣的形式参与相关蛋白的折叠、装配、细胞内运输及蛋白形式参与相关蛋白的折叠、装配、细胞内运输及蛋白质降解等过程。质降解等过程。vHsps有有高度的保守性高度的保守性，在不同的菌株中同族的，在不同的菌株中同族的Hsps有很高的序列同源性，而不同族的有很高的序列同源性，而不同族的Hsps之之间却无明显的同源性，如间却无明显的同源性，如Hsp60s和和Hsp70s。热休克蛋白不仅在应激条件下有高效表达，而且热休克蛋白不仅在应激条件下有高效
14、表达，而且在正常的生理条侏下，许多热休克蛋白也有组成在正常的生理条侏下，许多热休克蛋白也有组成型表达。它们参与一些重要的细胞生理活动，如型表达。它们参与一些重要的细胞生理活动，如蛋白质转位、拆叠和装配，因此又被称为蛋白质转位、拆叠和装配，因此又被称为“分子分子伴侣伴侣”。热休克蛋白的一般作用热休克蛋白的一般作用v分子伴侣的作用分子伴侣的作用v抗氧化作用抗氧化作用v协同免疫作用（肿瘤、癌症等）协同免疫作用（肿瘤、癌症等）v抗细胞凋亡作用抗细胞凋亡作用v已经证实当人受到已经证实当人受到细菌细菌和和寄生虫寄生虫感染时，这些病感染时，这些病原体来源的热休克蛋白一种非常重要的抗原。到原体来源的热休克蛋白
15、一种非常重要的抗原。到目前为止，已经报道了有目前为止，已经报道了有24种感染性种感染性疾病疾病的免疫的免疫应答是针对热休克蛋白，如应答是针对热休克蛋白，如结核病结核病、麻风麻风病病等，等，其中对其中对Hsp60s的免疫应答最多。的免疫应答最多。v近年研究发现，近年研究发现，胃黏膜胃黏膜在受到各种刺激时，在受到各种刺激时，HSP表达水平增高，对胃黏膜具有保护作用。表达水平增高，对胃黏膜具有保护作用。v热休克蛋白参与了多种生物和免疫应答过程，热休克蛋白参与了多种生物和免疫应答过程，而且在许多疾病治疗方面有很大的潜力。用一而且在许多疾病治疗方面有很大的潜力。用一些化学物质或一些其他的方法来诱导产生热
16、休些化学物质或一些其他的方法来诱导产生热休克蛋白，会使生物体对一些破坏性的刺激产生克蛋白，会使生物体对一些破坏性的刺激产生一定的抗性。因而对于一些患有慢性疾病，如一定的抗性。因而对于一些患有慢性疾病，如糖尿病，心脏病糖尿病，心脏病或或肾脏疾病肾脏疾病的人可以考虑通过的人可以考虑通过诱导其体内的诱导其体内的Hsps的产生来加以治疗。的产生来加以治疗。v热休克蛋白也是抵抗热休克蛋白也是抵抗心血管心血管和和神经损伤疾病神经损伤疾病的的有效手段。有效手段。v在在器官保存器官保存和和移植移植方面，热休克蛋白也有一定方面，热休克蛋白也有一定的应用价值。的应用价值。v虽然热休克蛋白的应用有事实上的风险，但它
17、虽然热休克蛋白的应用有事实上的风险，但它在在治疗癌症治疗癌症以及以及自身免疫性疾病自身免疫性疾病方面有很大的方面有很大的潜力，随着对热休克蛋白调节机制的进一步了潜力，随着对热休克蛋白调节机制的进一步了解，热休克蛋白的应用一定会越来越广泛。解，热休克蛋白的应用一定会越来越广泛。其他种类的分子伴侣其他种类的分子伴侣 v包括核质素、包括核质素、T受体结合蛋白受体结合蛋白(TRAP)、大肠杆菌的、大肠杆菌的SecB和触发因子（和触发因子（trigger factor）及）及PapD、噬、噬菌体编码的支架蛋白（菌体编码的支架蛋白（scaffolding proteins）等。）等。分子伴侣不仅与胞内蛋白
18、的折叠与组装密切相关，分子伴侣不仅与胞内蛋白的折叠与组装密切相关，影响到蛋白质的转运、定位或分泌；而且与信号转影响到蛋白质的转运、定位或分泌；而且与信号转导中的信号分子的活性状态与活性行为密切相关，导中的信号分子的活性状态与活性行为密切相关，具有重要的生理意义具有重要的生理意义 DNA分子伴侣分子伴侣 v“DNA chaperones”，是与，是与DNA相结合相结合并并帮助帮助DNA折叠折叠的蛋白质。在这种复合物中，的蛋白质。在这种复合物中，DNA分分子包围在蛋白质分子的表面，既是高度有序的，子包围在蛋白质分子的表面，既是高度有序的，又是在一定程度上结构已有所改变的。又是在一定程度上结构已有所
19、改变的。vDNA与蛋白的这种相互作用对与蛋白的这种相互作用对DNA的的转录转录，复复制制以及以及重组重组都十分重要；如在核小体中，对都十分重要；如在核小体中，对DNA的包装是必须的。的包装是必须的。vDNA在溶液中的结构有相当的刚性，必须克服一个在溶液中的结构有相当的刚性，必须克服一个能障才能转变成它的蛋白复合物中的结构，能障才能转变成它的蛋白复合物中的结构，分子伴分子伴侣的作用侣的作用就是帮助就是帮助DNA分子进行分子进行折叠和扭曲折叠和扭曲，从而，从而把把DNA稳定在一个适合于蛋白结构的特定构型中。稳定在一个适合于蛋白结构的特定构型中。这种结合是协同的，可逆的，在形成复合物之后便这种结合是
20、协同的，可逆的，在形成复合物之后便解离下来。解离下来。v因此，不论是因此，不论是DNA分子伴侣还是蛋白分子伴侣，都分子伴侣还是蛋白分子伴侣，都与与DNA和蛋白的相互作用有关，与基因调控有关，和蛋白的相互作用有关，与基因调控有关，看来，分子伴侣确实与最终阐明中心法则这一当前看来，分子伴侣确实与最终阐明中心法则这一当前主要问题有密切关系。主要问题有密切关系。分子伴侣与疾病分子伴侣与疾病 v 分子伴侣是双刃剑分子伴侣是双刃剑 分子伴侣的免疫保护作用分子伴侣的免疫保护作用 分子伴侣的致病作用分子伴侣的致病作用 分子伴侣的免疫保护作用分子伴侣的免疫保护作用v分子伴侣也可以成为感染性疾病中的分子伴侣也可以
21、成为感染性疾病中的免疫优势免疫优势抗原抗原（immunodominant antigens），激发），激发宿主体内的宿主体内的体液免疫反应体液免疫反应和和 T 细胞介导的细胞细胞介导的细胞免疫反应免疫反应，证实在细菌或寄生虫感染中具有免，证实在细菌或寄生虫感染中具有免疫保护作用。这说明分子伴侣有可能用作疫苗，疫保护作用。这说明分子伴侣有可能用作疫苗，来抵抗微生物的感染，并用来治疗来抵抗微生物的感染，并用来治疗肿瘤肿瘤和和自身自身免疫疾病免疫疾病 由于分子伴侣在生命活动的各个层次都具有重由于分子伴侣在生命活动的各个层次都具有重要作用，因此它的要作用，因此它的突变突变或或损伤损伤也必定会引起也必定
22、会引起疾病，故称之为疾病，故称之为“分子伴侣病分子伴侣病”。随着对分。随着对分子伴侣功能及机制研究的深入。发现子伴侣功能及机制研究的深入。发现许多疾许多疾病的发生都与分子伴侣病的发生都与分子伴侣有关。有关。分子伴侣的致病作用分子伴侣的致病作用 分子伴侣的致病作用分子伴侣的致病作用 v细胞内新生肽链的折叠过程中蛋白质的降解还可细胞内新生肽链的折叠过程中蛋白质的降解还可以由以由分子伴侣提供的分子伴侣提供的“质控系统质控系统(quality control system)”辅助完成辅助完成。这种。这种“质控系统质控系统”可以可以识别识别(recongnizing)、滞留滞留(retaining)和和
23、靶靶向作用向作用(targeting)于错误折叠的蛋白质，促进这于错误折叠的蛋白质，促进这些蛋白质聚集或降解，阻碍其正常定位，防止它些蛋白质聚集或降解，阻碍其正常定位，防止它们干扰细胞的正常功能。但也可以们干扰细胞的正常功能。但也可以导致疾病导致疾病的发的发生。生。分子伴侣的实际应用分子伴侣的实际应用v分子伴侣疫苗已经在分子伴侣疫苗已经在肿瘤免疫肿瘤免疫和和治疗治疗的基础研究的基础研究方面取得了很大的进展。分子伴侣方面取得了很大的进展。分子伴侣-抗原肽复合抗原肽复合体瘤苗已经被广泛用于体瘤苗已经被广泛用于小鼠肝癌、肺癌、黑色素小鼠肝癌、肺癌、黑色素瘤等的免疫治疗瘤等的免疫治疗研究研究,具有较强
24、的治疗和预防作具有较强的治疗和预防作用。用。v开展开展病毒与分子伴侣的相互关系的深入研究病毒与分子伴侣的相互关系的深入研究可能可能为病毒病的防控提供新的途径。为病毒病的防控提供新的途径。v分子伴侣的研究成果必然会大大加深我们对生命分子伴侣的研究成果必然会大大加深我们对生命现象的认识，同时也一定会增加我们与自然斗争现象的认识，同时也一定会增加我们与自然斗争的能力和自身生存的能力。的能力和自身生存的能力。v另一方面，利用对分子伴侣的研究成果从根本上另一方面，利用对分子伴侣的研究成果从根本上提高提高基因工程基因工程和和蛋白工程蛋白工程的成功率，也必将对大的成功率，也必将对大幅度提高人类生活水平起重要
25、作用。幅度提高人类生活水平起重要作用。2002北京师范大学考研题北京师范大学考研题1、八肽氨基酸组成为：、八肽氨基酸组成为：Asp、Ser、Gly、Ala、Met、Phe、Lys22、FDNB与之反应再酸水解，得与之反应再酸水解，得DNP-Ala；3、胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽，其组成为、胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽，其组成为Asp、Gly、Lys和和Met，此四肽与，此四肽与FDNB反应生成反应生成DNP-Gly；4、胰蛋白酶消化八肽后，得到组成为、胰蛋白酶消化八肽后，得到组成为Lys、Ala、Ser及及Phe、Lys、Gly的两个三肽及一个二肽，此二肽被的两个三肽及一个二肽，此二肽被CNBr处理后游处理后游离出离出Asp请写出八肽的顺序及推理过程请写出八肽的顺序及推理过程南开大学南开大学2004考研题考研题v原肌球蛋白的相对分子质量是原肌球蛋白的相对分子质量是70kD，它完全由，它完全由-螺旋螺旋组成。成。请问，这个分子的伸展个分子的伸展长度是多少？度是多少？（提示，每个氨基酸的平均相（提示，每个氨基酸的平均相对分子分子质量量为110或或120，在，在-螺旋中，相螺旋中，相邻连个氨基酸残基的个氨基酸残基的-碳原碳原子之子之间轴相距相距为0.15nm）