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1、分光光度计的使用维护方法分光光度计的使用维护方法光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测系统检测系统稳压电源稳压电源通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调波长可调,故选择性好故选择性好,准确度高准确度高.分光光度法的主要部件框架分光光度法的主要部件框架2(1 1)分光光度计的主要部件)分光光度计的主要部件光源光源:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够:发出所需波长范围内的连续光谱,有足够 的光强度的光强度,稳定。稳定。可见光区:可见光区:钨灯,碘钨灯钨灯,碘钨灯(320(32025002500nm)nm)紫外区:紫外区:氢灯,氘灯氢灯,氘灯(180(1803
2、75375nm)nm)单色器单色器:将光源发出的连续光谱分解为单色光的:将光源发出的连续光谱分解为单色光的 装置。装置。棱镜棱镜:玻璃玻璃35035032003200nm,nm,石英石英18518540004000nmnm光栅光栅:波长范围宽波长范围宽,色散均匀色散均匀,分辨性能好分辨性能好,使用方便使用方便3吸收池吸收池:(比色皿比色皿)用于盛待测及参比溶液。用于盛待测及参比溶液。可见光区:光学玻璃池可见光区:光学玻璃池 紫外区:石英池紫外区:石英池检测器检测器:利用光电效应,将光能转换成:利用光电效应,将光能转换成 电流信号。电流信号。光电池,光电管,光电倍增管光电池,光电管,光电倍增管指
3、示器指示器:低档仪器:刻度显示低档仪器:刻度显示 中高档仪器:数字显示,自动扫描记录中高档仪器:数字显示,自动扫描记录4(2)分光光度计的类型)分光光度计的类型5722722型分光光度计结构方框图型分光光度计结构方框图光光源源吸收池吸收池检测系统检测系统分光分光系统系统6721分光光度计分光光度计7722型分光光度计的使用操作方法型分光光度计的使用操作方法 v(1)将灵敏度旋钮调整)将灵敏度旋钮调整“1”档档(放大放大倍率最小)倍率最小)v(2)开启电源,指示灯亮,仪器预热)开启电源,指示灯亮,仪器预热20分钟,选择开关置于分钟,选择开关置于Tv(3)打开试样室盖)打开试样室盖(光门自动关闭)
4、(光门自动关闭)调调节节0%T旋钮,使数字显示为旋钮,使数字显示为00.0。v(4)将装有溶液的比色皿放置比色架中。)将装有溶液的比色皿放置比色架中。v(5)旋动仪器波长手轮,把测试所需的)旋动仪器波长手轮,把测试所需的波长调节至刻度线处。波长调节至刻度线处。8v(6)盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节透过率透过率“100%T”旋钮,使数字显示为旋钮,使数字显示为“100.0T”(如(如果显示不到果显示不到100%T,则可适当增加灵敏度的档数,同时,则可适当增加灵敏度的档数,同时应重复应重复“3”,调整仪器的,调整仪器的“00.0”)v(7
5、)将被测溶液置于光路中,数字表上直接读出被测溶)将被测溶液置于光路中,数字表上直接读出被测溶液的透过率(液的透过率(T)值。)值。v(8)吸光度)吸光度A的测量的测量参照参照“3”“6”调整仪器的调整仪器的“00.0”和和“100.0”,将选择开关置于,将选择开关置于A旋动吸光度调旋动吸光度调零旋钮,使得数字显示为零旋钮,使得数字显示为.000,然后移入被测溶液,显,然后移入被测溶液,显示值即为试样的吸光度示值即为试样的吸光度A值。值。v(9)浓度)浓度C的测量的测量选择开关由选择开关由A旋至旋至C,将已标定浓,将已标定浓度的溶液移入光路,调节浓度按钮,使得数字显示为标度的溶液移入光路,调节浓
6、度按钮,使得数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值 9v(10)仪器在使用时,应常参照本操作方法中)仪器在使用时,应常参照本操作方法中“3”“6”进行调进行调“00.0”和和“100.0”的工作。的工作。v11)每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比)每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。色皿单个调换。v(12)本仪器数字显示后背部,带有外接插座,可输)本仪器数字显示后背部,带有外接插座,可输出模拟信号出模拟信号插座插座1脚为正,脚为正,2脚为负接地线脚为负接地线v(13)如果大幅度改变测试波长时,需等数分
7、钟后才)如果大幅度改变测试波长时,需等数分钟后才能正常工作。(因波长由长波向短波或短波向长波移能正常工作。(因波长由长波向短波或短波向长波移动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应较慢,需动时,光能量变化急剧,光电管受光后响应较慢,需一段光响应平衡时间。一段光响应平衡时间。10分光光度计的检验分光光度计的检验v波长准确度的检验波长准确度的检验 由一些原因而导致仪器灵敏度由一些原因而导致仪器灵敏度降低,影响测定结果的精度,需要经常进行检验降低,影响测定结果的精度,需要经常进行检验v投射比正确度的检验投射比正确度的检验 透射比的准确度最普遍是重铬透射比的准确度最普遍是重铬酸钾溶液酸钾溶液v稳定度的检
8、验稳定度的检验v吸收池配套性检验吸收池配套性检验 在紫外光区测定时,需要对吸收池在紫外光区测定时,需要对吸收池作校准及配对工作,以消除吸收池的误差,提高测量的准确作校准及配对工作,以消除吸收池的误差,提高测量的准确度度11维护方法维护方法 v1.在不使用时不要开光源灯在不使用时不要开光源灯如灯泡发黑如灯泡发黑(钨灯)、亮度明显减弱或不稳定,应及时更(钨灯)、亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置。不要用手换新灯。更换后要调节好灯丝位置。不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。心接触过,要用无水乙醇
9、擦拭。v2.单色器是仪器的核心部分,装在密封单色器是仪器的核心部分,装在密封的盒内,一般不宜拆开的盒内,一般不宜拆开要经常更换单色器要经常更换单色器盒的干燥剂,防止色散元件受潮生霉。仪器停盒的干燥剂,防止色散元件受潮生霉。仪器停用期间,应在样品室和塑料仪器罩内放置数袋用期间,应在样品室和塑料仪器罩内放置数袋防潮硅胶,以免灯室受潮,反射镜面有霉点及防潮硅胶,以免灯室受潮,反射镜面有霉点及沾污沾污。12v3.吸收池在使用后应立即洗净,为防止其光学窗吸收池在使用后应立即洗净,为防止其光学窗面被擦伤,必须用擦镜纸或柔软的棉织物擦去水面被擦伤,必须用擦镜纸或柔软的棉织物擦去水分分生物样品、胶体或其它在池
10、窗上形成薄膜的物质生物样品、胶体或其它在池窗上形成薄膜的物质要用适当的溶剂洗涤。有色物质污染,可用要用适当的溶剂洗涤。有色物质污染,可用3mol/L盐盐酸和等体积乙醇的混合液洗涤酸和等体积乙醇的混合液洗涤v4.光电器件应避免强光照射或受潮积尘光电器件应避免强光照射或受潮积尘v5.仪器的工作电源一般允许仪器的工作电源一般允许220V10%的电压波的电压波动动为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波动较大的实验室最好配备稳压器。动较大的实验室最好配备稳压器。13多通道仪器多通道仪器(MultichannelInstruments)光电二极管阵列光电二
11、极管阵列(通常具有通常具有316个硅二极管个硅二极管)photodiodearrays(PDAs)同时测量同时测量200820nm范围内的整个光谱范围内的整个光谱,比单个比单个检测器快检测器快316倍倍,信噪比增加信噪比增加3161/2倍倍.其它类型分光光度计其它类型分光光度计将光度计放入样品中将光度计放入样品中,原位测量原位测量.对环境和对环境和过程监测非常重要过程监测非常重要.纤维光度计纤维光度计14镀铝反射镜镀铝反射镜纤维光度计示意图纤维光度计示意图15纤维光度计纤维光度计16小组成员v梁升楚,邓飞宇,王少波,周梁升楚,邓飞宇,王少波,周润添,谢雄,陈茂阳,李伟豪,润添,谢雄,陈茂阳,李伟豪,吴敏儿,陆伟强吴敏儿,陆伟强1718