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1、常见植物的脱毒与快速繁殖技术常见植物的脱毒与快速繁殖技术第1页，共81页，编辑于2022年，星期日本章主要内容本章主要内容(4学时学时)l蔬菜的脱毒与快繁l果树的脱毒与快繁l花卉植物的脱毒与快繁l农作物的脱毒与快繁l药用植物的试管快繁l树木的脱毒与快繁第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 第2页，共81页，编辑于2022年，星期日(1)(1)掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃掌握马铃薯的生物学习性，掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法；薯脱毒苗的鉴定方法；掌握番茄的生物学特性及快速繁殖
2、方法；(2)(2)掌握苹果的脱掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技术；毒方法与快繁技术；掌握葡萄的脱毒与快技术；掌握草莓的脱掌握草莓的脱 毒与快繁技术；毒与快繁技术；(3)(3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；学特性，组培快速繁殖方法及自然繁殖法；(4)(4)掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术；掌握甘薯的生物学特性，脱毒与快繁的方法及技术；(5)(5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术；掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术；(6)(6)掌握毛白杨、河北杨
3、等绿化苗木的快繁技术。掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。第第9 9章章 常见植物的脱毒常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 本章教学目的与要求第3页，共81页，编辑于2022年，星期日第一节第一节 蔬菜的脱毒与快繁蔬菜的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 马铃薯马铃薯 蕃茄蕃茄第4页，共81页，编辑于2022年，星期日一、马铃薯的组织培养一、马铃薯的组织培养第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第5页，共81页，编辑于2022年，星期日微型薯第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第6页，共81页，编辑于2022年，星期日
4、马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输，既是一应性广，营养价值高，耐贮藏适运输，既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。的一种作物。第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第7页，共81页，编辑于2022年，星期日 危害有危害有1717种之多，如种之多，如X X病毒、病毒、S S病毒、病毒、Y Y病毒、病毒、MM
5、病毒、病毒、A A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。马铃薯病毒可使块茎产量减少马铃薯病毒可使块茎产量减少50%80%50%80%。马铃薯病毒的种类马铃薯病毒的种类第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第8页，共81页，编辑于2022年，星期日1 1、形态特性、形态特性(1)(1)根根 根系由出生根和匍匐根组成。根系由出生根和匍匐根组成。(2)(2)茎茎 分地上部分和地下部分。分地上部分和地下部分。(3)(3)叶叶 全缘，心脏形。全缘，心脏形。(4)(4)花花 为聚伞花序。为聚伞花序。(5)(5)果实果实 浆果。浆果。（一）、马铃薯特性和生物学习性（一）、马
6、铃薯特性和生物学习性第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第9页，共81页，编辑于2022年，星期日马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻。发芽适温为发芽适温为12181218。地上茎叶生长温度为地上茎叶生长温度为17211721。块茎形成要求昼温块茎形成要求昼温14241424，夜温，夜温12141214。结薯期要求结薯期要求12h12h左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以左右的短日照和疏松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表面粗糙和及通气良好的土壤条件。土壤板结，薯块表面粗糙和薯形不整。薯形不整。2 2、生物学习性生物学习性第一节第一节 蔬菜脱毒
7、与快繁蔬菜脱毒与快繁第10页，共81页，编辑于2022年，星期日通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除除PLRVPLRV、PVYPVY、PVAPVA、PAFPAF、PVGPVG、PVMPVM、PSWPSW等病毒。等病毒。（二）、马铃薯脱毒技术（二）、马铃薯脱毒技术第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第11页，共81页，编辑于2022年，星期日全国现有马铃薯播种面积全国现有马铃薯播种面积300300多万公顷，每年多万公顷，每年需合格种薯需合格种薯4545亿公斤，脱毒原种亿公斤，脱毒原种4 4亿公斤，脱亿公斤，脱毒小薯或微型薯毒小薯或微型薯4545亿粒
8、。亿粒。我国的马铃薯平均单产仅为我国的马铃薯平均单产仅为13.6013.60吨吨/公顷，是公顷，是世界单产最高国这瑞士（世界单产最高国这瑞士（48.8048.80吨吨/公顷）的公顷）的1/41/4。最主要的因素就是种薯质量差，品种布局不合最主要的因素就是种薯质量差，品种布局不合理。理。我国马铃薯栽培现状我国马铃薯栽培现状第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第12页，共81页，编辑于2022年，星期日 微茎尖组织培养微茎尖组织培养-诱导出苗诱导出苗-联免疫吸附联免疫吸附试验法或指示植物方法鉴定试验法或指示植物方法鉴定-脱毒试管基础苗。脱毒试管基础苗。固体、液体培养基相结合固体、液体培养基相
9、结合-扩繁基础扩繁基础苗苗-在防虫网室栽植或封闭温室扦插在防虫网室栽植或封闭温室扦插-原原原种（或称脱毒小薯）。原原种原种（或称脱毒小薯）。原原种-原种原种1 1代代-原种原种2 2代代-良种良种1 1代代-良种良种2 2代。代。1 1脱毒种薯生产程序脱毒种薯生产程序第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第13页，共81页，编辑于2022年，星期日（1）茎尖消毒一般在室内发芽，芽经热处理（一般在室内发芽，芽经热处理（3838）2 2周。周。然后取然后取1 1厘米的茎尖，水洗干净，无菌条件下厘米的茎尖，水洗干净，无菌条件下先用先用7070的酒精浸组织的酒精浸组织15-2015-20秒，再用秒
10、，再用2 2次次氯酸钠溶液浸泡氯酸钠溶液浸泡4-5min4-5min，然后用无菌水冲洗，然后用无菌水冲洗3 3次。次。2 2茎尖培养脱毒茎尖培养脱毒第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第14页，共81页，编辑于2022年，星期日 把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出把消毒芽在解剖镜下逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，留圆滑的生长点，留1-21-2个叶原基，个叶原基，0.20.30.20.3毫毫米，随即接种于米，随即接种于MSMS液体培养基上，每升加液体培养基上，每升加0.1mgNAA 0.1mgNAA、0.2mgGA3 0.2mgGA3、0.5BA0.5BA，2%2%蔗糖，蔗糖，p Hp
11、H值值5.85.8。取材和接种取材和接种第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第15页，共81页，编辑于2022年，星期日温度温度：21252125光照度光照度：2000-3000 lx2000-3000 lx光照时间光照时间：12h/d12h/d 2-3 2-3周长愈伤，周长愈伤，4-54-5周长绿点，周长绿点，3-63-6月长月长成成2-32-3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。扔掉。培养条件：培养条件：第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第16页，共81页，编辑于2022年，星期日 培养成功的马铃薯脱毒苗，经培养成功的马铃薯脱毒苗，经ELISAE
12、LISA（试剂盒）（试剂盒）鉴定后（试管苗应每鉴定后（试管苗应每3 3月检测一次，每年月检测一次，每年4 4次）采用次）采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。固体、液体培养基相结合方法扩繁。取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培养基上，每瓶可插，每瓶可插2020个左右茎段，经个左右茎段，经20d20d左右发育成左右发育成510cm510cm高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖每月可繁殖5858倍，试管苗多节接种在液体培养基上，倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。进行浅层静止液体培
13、养。（2 2）继代和生根继代和生根第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第17页，共81页，编辑于2022年，星期日MS+NAA0.2-0.5+D-MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙泛酸钙1010，3%3%蔗糖；蔗糖；20-2520-25，3000-4000LX3000-4000LX，14-16hr14-16hr光照；光照；每每3 3周继代一次，单芽茎段约周继代一次，单芽茎段约1 1厘米；厘米；原则试管苗用原则试管苗用2 2年年33年。年。马铃薯继代培养基：马铃薯继代培养基：第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第18页，共81页，编辑于2022年，星期日马铃薯试管苗马铃薯试管苗第
14、一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第19页，共81页，编辑于2022年，星期日炼苗室温度：炼苗室温度：白天白天23272327，夜间不低于，夜间不低于1414。炼苗具体方法炼苗具体方法：移植前：移植前7d7d左右，将长有左右，将长有3535片叶、高片叶、高23cm23cm的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室的试管苗，在不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温移至温室排好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色遮阳网。室顶上加盖一层黑色遮阳网。(3)(3)驯化驯化第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第20页，共81页，编辑于2022年，星
15、期日 1 1、指示植物鉴定、指示植物鉴定在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒很的方法，病毒、病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。容易通过汁液来接种。2 2、鉴定寄主的准备、鉴定寄主的准备马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。虫网室中培养。（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料（三）、马铃薯无病毒苗的鉴定材料第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与快繁第21页，共81页，编辑于2022年，星期日
16、 叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释倍作为接种物滤出汁液，再用蒸馏水稀释倍作为接种物(混入混入目的金刚砂目的金刚砂)。用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指用左手心紧靠在鉴定寄主植物的背面，以右手指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水洗净，放置在的防虫室中，一般天可发放置在的防虫室中，一般天可发病。病。.接种液制备及接种接种液制备及接种第一节第一节 蔬菜脱毒与快繁蔬菜脱毒与
17、快繁第22页，共81页，编辑于2022年，星期日（）（）直接块茎繁殖直接块茎繁殖（）（）扦插繁殖扦插繁殖（）（）组织培养切段繁殖组织培养切段繁殖 A A：继代培养：继代培养 B B：低温保存：低温保存（四）、马铃薯无病毒株的繁殖（四）、马铃薯无病毒株的繁殖第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁第23页，共81页，编辑于2022年，星期日二、番茄的组织培养二、番茄的组织培养（一）、形态特征和生物学习性（一）、形态特征和生物学习性 番茄的叶片为长羽状，番茄的叶片为长羽状，在叶轴上生有裂片，顶生裂在叶轴上生有裂片，顶生裂片，小裂片，间裂片，这些片，小裂片，间裂片，这些裂片是叶的深裂，缺刻的变裂片是
18、叶的深裂，缺刻的变化。两性花，聚伞花序，浆化。两性花，聚伞花序，浆果。果。蕃茄耐低温，喜光照，对水蕃茄耐低温，喜光照，对水分需求量极大，喜肥，适于分需求量极大，喜肥，适于微酸性或中性土壤。微酸性或中性土壤。第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁第24页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、番茄的组织培养（二）、番茄的组织培养1 1、外植体、外植体：幼嫩叶片：幼嫩叶片 。2 2、消毒、消毒：用：用0.1%0.1%升汞浸泡升汞浸泡4min4min，再用无菌水冲洗，再用无菌水冲洗3-43-4次次 。3 3、愈伤组织培养条件、愈伤组织培养条件：MS+BA2mg/L+IAA1mg/L MS+BA
19、2mg/L+IAA1mg/L，温度，温度2525，每天光照，每天光照10h10h，光照度，光照度2000lx 2000lx。4 4、分化培养、分化培养：分化培养基：分化培养基MS+BA4MS+BA4中。中。5 5、生根培养、生根培养：MS+IAA2 mg/LMS+IAA2 mg/L。6 6、炼苗栽植、炼苗栽植：将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼：将培养有根试管苗的瓶口打开。煅炼3d3d后取出，洗后取出，洗去根上带有的培养基，移栽到营养土中，浇透水，并罩上塑料薄去根上带有的培养基，移栽到营养土中，浇透水，并罩上塑料薄膜，以保温保湿，膜，以保温保湿，4-5d4-5d后去掉薄膜，新叶长出时即定植田间。
20、后去掉薄膜，新叶长出时即定植田间。第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁第25页，共81页，编辑于2022年，星期日（三）、番茄的胚培养（三）、番茄的胚培养1 1、外植体制备、外植体制备：授粉后：授粉后30-40d30-40d收获果皮完整的果实，果实放入收获果皮完整的果实，果实放入95%95%乙醇中表面消毒，浸在乙醇中表面消毒，浸在5%NaCI5%NaCI中中5min5min，用无菌蒸馏水充分淋，用无菌蒸馏水充分淋洗。果实放在无菌吸水纸上，除去种子上的胶状复被。洗。果实放在无菌吸水纸上，除去种子上的胶状复被。2 2、培养基、培养基：启动：启动：MS+MS+硫胺素硫胺素0.3mg/L+2,4-
21、D2mg/L+0.3mg/L+2,4-D2mg/L+椰乳椰乳100ml/L100ml/L，pH6.0pH6.0；继代：；继代：MS+2,4-D2mg/L MS+2,4-D2mg/L；分化：；分化：MS+BA1.5mg/LMS+BA1.5mg/L；生根：；生根：MS+NAA2mg/LMS+NAA2mg/L。3 3、培养条件、培养条件：愈伤组织启动和继代，用暗培养，：愈伤组织启动和继代，用暗培养，2727。芽再。芽再生和生根在室温生和生根在室温20-30.16h/d 20-30.16h/d 的光照，的光照，2000lx2000lx。第一节蔬菜脱毒与快繁第一节蔬菜脱毒与快繁第26页，共81页，编辑于
22、2022年，星期日第二节第二节 果树的脱毒与快繁果树的脱毒与快繁 葡萄葡萄苹果苹果第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 草莓草莓第27页，共81页，编辑于2022年，星期日一、苹果的脱毒与快繁一、苹果的脱毒与快繁（一）、苹果的形态特性和生物学特性（一）、苹果的形态特性和生物学特性 苹果（苹果（Malus pumilaMalus pumila）属落叶乔木，树木高大。果实为假果。）属落叶乔木，树木高大。果实为假果。苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。苹果喜凉；喜光；适合在微酸性到中性土壤中栽种。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第28页，共81页
23、，编辑于2022年，星期日（二）、脱毒技术（二）、脱毒技术1 1、病毒种类、病毒种类：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和：苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等苹果茎沟病毒等 。2 2、微尖嫁接脱毒、微尖嫁接脱毒：砧木：去顶的离体培养幼苗，：砧木：去顶的离体培养幼苗，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，接穗：试管培养的无毒新稍；嫁接后培养生叶，移栽即可。移栽即可。3 3、热处理脱毒、热处理脱毒：把植株置于：把植株置于38 38 下下25-5025-50天。天。4 4、茎尖培养脱毒、茎尖培养脱毒：把：把0.1-0.3mm0.1-0.3mm的茎尖离体培养。的茎尖离体培养。5 5、脱毒苗
24、的鉴定、脱毒苗的鉴定：抗血清法，电子：抗血清法，电子 显微镜法，显微镜法，ELISAELISA法、指示植物法。法、指示植物法。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第29页，共81页，编辑于2022年，星期日（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术 1 1、材料与消毒、材料与消毒：带芽或茎尖的茎段；常规消毒，：带芽或茎尖的茎段；常规消毒，用无菌水洗用无菌水洗3 35 5次次 ；切茎尖约；切茎尖约0.10.10.5mm0.5mm。2 2、芽的诱导、芽的诱导：MSMS或或LS+BA2+300LS+BA2+300500CH500CH或或LH+3%LH+3%蔗糖的培养基上，诱导芽的分
25、化。蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。3 3、继代增殖培养、继代增殖培养：MS+BA0.5MS+BA0.51+CH300 1+CH300 培养培养基上增殖。基上增殖。4 4、生根培养、生根培养：1/2MS1/2MS或或 WhiteWhite，NitshNitsh附加附加IAA1IAA1、IBA0.2IBA0.2和和GA33 GA33 等。等。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第30页，共81页，编辑于2022年，星期日（四）苹果花粉培养（四）苹果花粉培养1 1、选材与预处理、选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰蕾明显增大，但
26、花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中箱中1-31-3预处理。预处理。2 2、消毒、消毒：70%70%的酒精浸约的酒精浸约0.5min0.5min，再在，再在10%10%漂漂白粉上清夜中浸白粉上清夜中浸151520min20min。3 3、胚状体诱导、胚状体诱导：接种到：接种到MS+2,4-D0.4+KT0.2 MS+2,4-D0.4+KT0.2+IAA4+3+IAA4+38%8%蔗糖培养基上，蔗糖培养基上，25253030下下培养。培养。4 4、生根、生根：同茎尖脱毒中所用方法。：同茎尖脱毒中所用方法。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第31页，共81页，编辑于2022年，星期日（五）胚培养（
27、五）胚培养1 1、取材消毒、取材消毒：取授粉取授粉303050d50d内的幼果，用内的幼果，用70%70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。2 2、启动培养、启动培养：接种在接种在BA0.25+IAA0.5BA0.25+IAA0.5的的1/2MS1/2MS培养基上。培养条件为培养基上。培养条件为25253030和和150015002000lx2000lx光照光照14h14h。3 3、分化增殖、分化增殖：移植到加有移植到加有BA0.5BA0.51.01.0和和CH300CH300的的1/2MS1/2MS培养基上培养基上 ，在光下培养条件同上。，在光下培养
28、条件同上。4 4、生根培养、生根培养：同茎尖培养。同茎尖培养。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第32页，共81页，编辑于2022年，星期日二、葡萄的脱毒与快繁二、葡萄的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物学习性（一）、形态特征和生物学习性 葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须，地上部分的茎细。节上具有卷须，可向上攀援。叶近圆型或卵型，可向上攀援。叶近圆型或卵型，3 35 5裂。裂。葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在葡萄的根系抗寒力很弱，在5 577时即受冻。时即受冻。第二节果树脱毒与快繁第二
29、节果树脱毒与快繁第33页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、葡萄的组织培养（二）、葡萄的组织培养 1 1、选材接种、选材接种：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取1 12 2的茎尖。的茎尖。消毒。分离出约消毒。分离出约2 2长的茎尖，接种到培养基上。长的茎尖，接种到培养基上。2 2、培养基、培养基：MSMS培养基（无机盐减半为好），再添加培养基（无机盐减半为好），再添加BA1BA12 2，NAA0.01NAA0.01，LH100LH100，蔗糖，蔗糖2%2%，琼脂，琼脂0.6%0.6%，而，而B5B5培养基愈伤培养基愈伤组织化严重，茎尖生长不好。组织化严重，茎尖生长不
30、好。3 3、苗分化、苗分化：BA0.5BA0.5，同时添加，同时添加GA30.2GA30.2，黑暗处理可促进幼，黑暗处理可促进幼茎的伸成，提高成苗率。茎的伸成，提高成苗率。4 4、根分化、根分化：将苗转入：将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生培养基中进行生根。根。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第34页，共81页，编辑于2022年，星期日（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 葡萄受到葡萄受到2626种病毒的危害。由于病毒的种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄的长势减弱，产量降低，果实危害，葡萄的长势减弱，产量降低，果实
31、的糖分含量减少，风味变劣。葡萄卷叶病的糖分含量减少，风味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病是危害最大的病毒病。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第35页，共81页，编辑于2022年，星期日（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 1 1、热处理脱毒：、热处理脱毒：（1 1）葡萄无性系处理：材料置于）葡萄无性系处理：材料置于3838，COCO2 2120010-6120010-6的人工空的人工空气侯箱内。经气侯箱内。经30min30min处理，较易从枝条尖端或休眠芽中除去扇叶病毒。处理，较易从枝条尖端或休眠芽中除去扇叶病毒。（2 2）将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然
32、后在）将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然后在3838的环境中保持的环境中保持2 2个月，以后取出枝条和接种芽继续生长。个月，以后取出枝条和接种芽继续生长。（3 3）直接将葡萄蔓浸泡在直接将葡萄蔓浸泡在5050的的 温水中温水中101020min20min，可以，可以治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第36页，共81页，编辑于2022年，星期日2 2、组织培养脱毒技术、组织培养脱毒技术 （1 1）、茎尖接种后变绿、增大期的培养）、茎尖接种后变绿、增大期的培养：在：在2525，相对湿度，相对湿度80%8
33、0%，16h16h的长日照条件下水培生成的嫩茎取的长日照条件下水培生成的嫩茎取0.20.20.3mm 0.3mm 茎尖接种于茎尖接种于 1/2MS1/2MS，添加，添加NAA0.1NAA0.1，BA1.0BA1.0，Kt0.5Kt0.5，腺嘌呤，腺嘌呤4.04.0，蔗，蔗糖糖30g/L30g/L，琼脂，琼脂6.06.0，pH5.8pH5.8培养基上培养基上。（2 2）从畸形叶和茎叶伸长期从畸形叶和茎叶伸长期：采用：采用1/2MS1/2MS，添加，添加IAA0.2IAA0.2，BA0.1BA0.1，KT0.5KT0.5，腺嘌呤，腺嘌呤4.04.0，蔗糖，蔗糖30g/L30g/L的培养基。的培养基
34、。（3 3）地上部和地下部的伸长期）地上部和地下部的伸长期：GalzyGalzy（19641964）培养基，添加）培养基，添加NAA0.1NAA0.1。（三）、葡萄无病毒苗的培养（三）、葡萄无病毒苗的培养 第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第37页，共81页，编辑于2022年，星期日三、草莓的脱毒与快繁三、草莓的脱毒与快繁 （一）、形态特征和生物习性（一）、形态特征和生物习性草莓（草莓（FragariaFragaria）属多年生草本）属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。为聚合瘦果生于花托
35、上。草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。性或微碱性土壤。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第38页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、草莓脱毒苗的培养（二）、草莓脱毒苗的培养 1 1、热处理脱毒、热处理脱毒 将草莓植株在将草莓植株在40404141温度下处理温度下处理4 46 6周。周。2 2、微茎尖脱毒、微茎尖脱毒（1 1）、初代培养）、初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流水：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗冲洗2 24h4h，然后剥去外层叶片，消毒，然后剥去外层叶片，消毒，切取切取0.2mm
36、0.2mm的茎尖。接入的茎尖。接入MS+BA0.25+NAA0.25MS+BA0.25+NAA0.25培养基中。培养条件为培养基中。培养条件为22222525，日照，日照161618h18h光强光强3000lx3000lx。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第39页，共81页，编辑于2022年，星期日 （二）、草莓脱毒苗的培养（二）、草莓脱毒苗的培养(2)(2)继代培养继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入：把芽丛割成芽丛小块，转入MSMS培养培养基中，令其长大基中，令其长大 。并进行分株，扩大繁殖。并进行分株，扩大繁殖。(3)(3)生根培养生根培养：在培养基中加入：在培养基中加入NAA1N
37、AA1或或IBA1IBA1。第二节果树脱毒与快繁第二节果树脱毒与快繁第40页，共81页，编辑于2022年，星期日第三节第三节 花卉植物的脱毒与快繁花卉植物的脱毒与快繁 第第9 9章常见植物的脱毒章常见植物的脱毒 与快速繁殖技术与快速繁殖技术 第41页，共81页，编辑于2022年，星期日一、一、兰花的脱毒与快繁兰花的脱毒与快繁 兰花系兰科兰花系兰科(Orchidaceae)(Orchidaceae)植物，在植物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率一自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖生产，年只有几倍，所以无法大量繁殖生产，而且由于长期进行无性繁殖，带病毒株而且由于长期进
38、行无性繁殖，带病毒株增多，逐渐使种性降低，影响生长。增多，逐渐使种性降低，影响生长。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第42页，共81页，编辑于2022年，星期日（一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养 1 1、茎尖的培养、茎尖的培养 (1)(1)取材消毒取材消毒：将芽除去叶后，用水冲洗，再用：将芽除去叶后，用水冲洗，再用1010的漂白粉的漂白粉表面灭菌表面灭菌15min15min。除去叶原基后，用。除去叶原基后，用5 5的漂白粉中灭菌的漂白粉中灭菌l0minl0min，以后用无菌水冲洗，以后用无菌水冲洗3 35 5次。切取茎尖和腋芽，约次。切取茎尖和腋芽，约2 23m
39、m3mm，接种到培养基中。接种到培养基中。(2)(2)培养基：培养基：采用采用VacinVacin和和WentWent培养基，添加培养基，添加1515CMCM进行液进行液体培养，或加体培养，或加9g9gL L的琼脂进行固体培养。的琼脂进行固体培养。(3)(3)培养条件：培养条件：为温度为温度2525，光照强度，光照强度2000Lx2000Lx，照明，照明161624h24h。液体培养基用。液体培养基用60r60rminmin的速度进行振荡培养。培养的速度进行振荡培养。培养1 1个个月即可形成原球茎球状体，即可进行继代增殖。月即可形成原球茎球状体，即可进行继代增殖。第三节第三节 花卉植物的花卉植
40、物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第43页，共81页，编辑于2022年，星期日 （一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养2.2.花梗腋芽的培养花梗腋芽的培养 (1)(1)采芽采芽：将带腋芽的花梗进行冲洗，用：将带腋芽的花梗进行冲洗，用1010的漂白粉溶液表面灭的漂白粉溶液表面灭菌菌20min20min，除去腋芽的苞叶，再在，除去腋芽的苞叶，再在5 5的漂白粉溶液中表面灭菌的漂白粉溶液中表面灭菌3min3min，无菌水冲洗净。仅取腋芽，接种到培养基上。，无菌水冲洗净。仅取腋芽，接种到培养基上。(2)(2)培养基和培养条件培养基和培养条件：用德兰属：用德兰属1 1号培养基培养原球状体，育苗号培养基培养原
41、球状体，育苗用卡德兰属用卡德兰属1 1号加号加1010香蕉汁；培养条件是光照强度香蕉汁；培养条件是光照强度2000Lx2000Lx，光照时，光照时间每天间每天13h13h，保持恒温，保持恒温2525。(3)(3)继代培养继代培养：用原球茎球状体繁殖。：用原球茎球状体繁殖。(4)(4)育苗育苗：不切块继续培养即可分化产生叶片，移到育苗的培养：不切块继续培养即可分化产生叶片，移到育苗的培养基，基，3 36 6个月可得到能栽植的苗。个月可得到能栽植的苗。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第44页，共81页，编辑于2022年，星期日 （一）蝴蝶兰属的培养（一）蝴蝶兰属的培养3.
42、3.叶片的培养：叶片的培养：(1)(1)取材取材：叶片是从试管内培养的材料上切取。取展开叶最上部先端、：叶片是从试管内培养的材料上切取。取展开叶最上部先端、中央或基部约中央或基部约6 68mm8mm2 2。(2)(2)培养基和培养条件培养基和培养条件：用：用 Kyoto Kyoto改良培养基，加复合肥料改良培养基，加复合肥料3.5g3.5gL L、肌、肌醇醇10001000、烟酸、烟酸1 1、维生素、维生素B11B11、NAAlNAAl、腺嘌呤、腺嘌呤1010、BAl0BAl0、蔗糖、蔗糖2 2、琼脂、琼脂1.01.0。25 25恒温，光照恒温，光照500Lx,500Lx,日照日照16h16h
43、。(3)(3)继代培养继代培养：用改良的：用改良的KyotoKyoto培养基进行继代培养，或在培养基进行继代培养，或在VacinVacin和和WentWent培养基中去掉蔗糖和琼脂，加培养基中去掉蔗糖和琼脂，加2020的的CMCM的液体培养基进行的液体培养基进行振荡培养。振荡培养。(4)(4)育苗育苗：原球茎球状体：原球茎球状体2 23 3个月即可萌芽，形成细苗，以后转移到个月即可萌芽，形成细苗，以后转移到KyotoKyoto培养基，加培养基，加1010的香蕉汁，经数月后可得到能移的香蕉汁，经数月后可得到能移f f栽的大苗。栽的大苗。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第
44、45页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、卡特兰的培养（二）、卡特兰的培养 1.1.取材和消毒取材和消毒：选择：选择5 510cm10cm长的嫩茎，从基部采芽。先用流水长的嫩茎，从基部采芽。先用流水冲洗，切去叶片酒精，漂白粉等消毒。冲洗，切去叶片酒精，漂白粉等消毒。2.2.培养基和培养条件培养基和培养条件：MSMS基本培养基，附加维生素，氨基酸，基本培养基，附加维生素，氨基酸，NAA0.186mgNAA0.186mgL L，Kt0.02mgKt0.02mgL L，GAGA3 30.173mg0.173mgL L，蔗糖，蔗糖30g30gL L，琼脂，琼脂6g6gL L，不加，不加CMCM
45、。启动培养温度。启动培养温度15152020，成活以后，则保持在成活以后，则保持在2525。光照强度。光照强度500-2000Lx500-2000Lx，照明，照明161622h22h。3.3.防止培养材料变褐方法防止培养材料变褐方法：(1)(1)采芽后，用无菌水冲洗再接种采芽后，用无菌水冲洗再接种 (2)(2)在培养基中加在培养基中加(50(50100)10100)10-6-6芸香甙。芸香甙。(2)(2)开始培养到开始培养到成活，保持温度成活，保持温度15152020。(4)(4)调调pHpH值至值至5.55.5，减轻褐化，减轻褐化，提高成活率。提高成活率。(5)(5)避免避免6 68 8月采
46、芽（由于多酚类物质的积月采芽（由于多酚类物质的积累，褐化较严重）。累，褐化较严重）。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第46页，共81页，编辑于2022年，星期日二、香石竹的组织培养二、香石竹的组织培养 香石竹为石竹科石竹属草本植物，原产南欧地中海北香石竹为石竹科石竹属草本植物，原产南欧地中海北岸。须根系，茎直立，多分枝，株高岸。须根系，茎直立，多分枝，株高7070100cm100cm，茎部半，茎部半木质化。叶线状披针形，全缘，叶质较厚，上半部向外弯木质化。叶线状披针形，全缘，叶质较厚，上半部向外弯曲，对生，基部抱茎。花通常单生或曲，对生，基部抱茎。花通常单生或2 23
47、 3朵聚伞状排列。朵聚伞状排列。石石竹竹是是一一种种中中日日性性花花卉卉。喜喜干干燥燥、通通风风，喜喜冷冷凉凉，最最适适宜宜的的生生长长温温度度为为19192121，忌忌高高温温多多湿湿。喜喜保保肥肥、通通气气、排排水水良良好好的的腐腐殖殖质质或或砂砂质质壤壤土土，最最适适宜宜的的土土壤壤pHpH值为值为6 66.56.5。（一）形态特性和生物学习性第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第47页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、组织培养育苗（二）、组织培养育苗 1 1、取材灭菌、取材灭菌：取长势健壮植株上较为粗壮的嫩芽，剥去成熟叶取长势健壮植株上较为粗壮的嫩芽，剥
48、去成熟叶片，在清水中清洗后，常规消毒，切取片，在清水中清洗后，常规消毒，切取0.3-0.4mm0.3-0.4mm的茎尖。的茎尖。2 2、培养基、培养基：选用：选用MSMS或或WhiteWhite培养基。附加培养基。附加BABA或或KT 0KT 05 52mg2mgL(L(单位下同单位下同)；NAANAA、IAAIAA浓度为浓度为0 02 22 2，2,4-D2,4-D为为0.10.11 1。3 3、分化增殖、分化增殖：于于MSMS附加附加BA2BA2，IAA0.5IAA0.5进行分化；于进行分化；于MSMS附加附加BA0.5BA0.52 2、IAA0.5IAA0.5进行丛生芽诱导。进行丛生芽诱
49、导。4 4、生根、生根：于：于1/2MS1/2MS上，温度上，温度20202525，光照强度，光照强度20001x20001x光照光照101012h/d12h/d。第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第48页，共81页，编辑于2022年，星期日三、菊花的组织培养三、菊花的组织培养 菊花系多年生植物，株高菊花系多年生植物，株高60-180cm60-180cm，茎直立粗壮，多，茎直立粗壮，多分枝。叶形大，互生，叶片有深缺刻。花序单生或聚生，边分枝。叶形大，互生，叶片有深缺刻。花序单生或聚生，边缘为舌状花，中部为筒状花，也有全为舌状或筒状花的，形缘为舌状花，中部为筒状花，也有全
50、为舌状或筒状花的，形状各异，种子为细小的瘦果，中间膨大，两端突出。状各异，种子为细小的瘦果，中间膨大，两端突出。适适宜宜的的生生育育温温度度为为15-2515-25，喜喜阳阳光光充充足足，通通风风良良好好，在在光光照照条条件件下下生生长长健健壮壮。比比较较耐耐旱旱，不不耐耐潮潮湿湿，忌忌低低洼洼积积水水。秋秋菊菊、冬冬菊菊为为典典型型的的短短日日照照植植物物，只只有有光光照照长度在长度在12h12h以下时才能开花以下时才能开花 （一）形态特性和生物学习性第三节第三节 花卉植物的花卉植物的 脱毒与快繁脱毒与快繁 第49页，共81页，编辑于2022年，星期日（二）、菊花的组织培养快速繁殖（二）、菊