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1、微生物实验微生物实验新疆师范大学生物技术09-7张经博实验实验1 培养基的制备培养基的制备一、实验器材二、仪器和其他用品三、目的要求：1.1.学习掌握培养基的配制原理。学习掌握培养基的配制原理。2.2.通过对这几种培养基的配制，掌握配制培养基的通过对这几种培养基的配制，掌握配制培养基的 一般方法一般方法四、操作步骤：高氏高氏号的制备号的制备1.1.称量和融化称量和融化2.PH2.PH调节、分装、包扎、灭菌调节、分装、包扎、灭菌配制高氏一号培养基配制高氏一号培养基实验实验2 稀释涂布平板法与平板分离稀释涂布平板法与平板分离技术技术n n一、实验器材n n1.土壤样品n n2.培养基高氏号，牛肉膏
2、蛋白胨琼脂培养基，马丁氏培养基n n二、目的要求n n1.掌握到平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。n n2.掌握平板分离技术n n三、操作步骤1.倒平板2.制备土壤稀释液3.涂布4.培养实验实验3 平板划线分离法平板划线分离法一、操作步骤1.1.倒平板倒平板2.2.划线划线二、实验结果：得到单菌落得到单菌落实验实验4 革兰氏染色革兰氏染色n n操作步骤1.1.制片制片2.2.初染初染3.3.媒染媒染4.4.脱色脱色5.5.复染复染6.6.镜检镜检n n实验结果：菌种被染成红色，菌种为革兰氏阳菌种被染成红色，菌种为革兰氏阳性菌性菌实验实验4 革兰氏染色革兰氏染色n n染完为阳性
3、菌革兰氏染色为阳性革兰氏染色为阳性且菌体为单一形态且菌体为单一形态（杆状）（杆状）可断定纯化合格可断定纯化合格能进行下阶段试验能进行下阶段试验实验五、放线菌、霉菌和酵母菌形态的观察n实验目的实验目的：vv学习丝状微生物制片和染色技术；学习丝状微生物制片和染色技术；vv观察和掌握典型放线菌、重要霉菌和酵母观察和掌握典型放线菌、重要霉菌和酵母菌的形态结构特征菌的形态结构特征 uu1 1、细黄链霉菌、细黄链霉菌54065406平板、插片培养材料。平板、插片培养材料。uu2 2、黑黑曲曲霉霉、青青霉霉、毛毛霉霉平平板板培培养养材材料料和和湿湿室培养材料。室培养材料。uu3 3、黑根霉（面包霉）装片、黑
4、根霉（面包霉）装片uu4 4、酿酒酵母菌菌液、酿酒酵母菌菌液一、实验材料放线菌的形态结构放线菌的形态结构n n是一类具有丝状分枝细胞的革兰是一类具有丝状分枝细胞的革兰阳性菌，因菌落成放射状二得名放线菌的形态和大小放线菌呈分枝丝状放线菌呈分枝丝状 菌丝无隔膜，单细胞菌丝无隔膜，单细胞菌丝直径与细菌相似，小于菌丝直径与细菌相似，小于1微米微米 放线菌放线菌菌丝形态和功能n n菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为为基内菌丝基内菌丝、气、气生菌丝生菌丝和和孢子丝孢子丝三种三种放线菌的培养与观察方法l l插片法插片法-水封片法水封片法l l玻璃纸法玻璃纸法l l压片
5、法压片法l l影印法影印法实验六实验六 食用真菌的培养食用真菌的培养n n二、目的要求1.1.理解使用真菌多种多样的培养方式。学习一种食用真菌的母种或原种或栽培种的培养技术，并掌握其基本的知识和技术方法三、基本原理三、基本原理n n 食用真菌全部都是化能自养型，各种现成的有机物能满足起生长的需要，根据食用真菌的不同需要，来配置培养基，四、操作步骤四、操作步骤n n食用菌的栽培食用菌的栽培1.1.将棉籽壳培养基转入塑料袋中压实，用小棒在将棉籽壳培养基转入塑料袋中压实，用小棒在中央扎一直径为中央扎一直径为1.5CM1.5CM的孔，的孔，121121度灭菌度灭菌9090分钟分钟2.2.将培养基温度降
6、至将培养基温度降至20-3020-30度时，移到无菌操作台度时，移到无菌操作台进行接种进行接种3.3.栽培管理栽培管理发菌：即菌丝在营养机制中向四周的扩散的伸发菌：即菌丝在营养机制中向四周的扩散的伸长期，室温控制在长期，室温控制在20-2320-23度相对湿度度相对湿度70%-75%70%-75%。珊瑚期：原基分化形成菌柄菌盖尚未形成茹蕾形成期：菌盖已经形成开始出现菌皱采收期：出现一批菇蕾，既要立即不留茬基采收实验结果实验结果实验实验7 大分子物质的水解（一）大分子物质的水解（一）1 1实验器材实验器材 1.1.菌种菌种 自己培养的菌种自己培养的菌种 2.2.培养基培养基 固体油脂培养基，石蕊
7、牛奶试管，琼脂脂试管，固体油脂培养基，石蕊牛奶试管，琼脂脂试管，明胶培养基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试明胶培养基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管，管，3 3溶液和试剂溶液和试剂 革兰氏染色用卢氏碘液等。革兰氏染色用卢氏碘液等。二、目的要求二、目的要求证明不同微生物对大分子物质水解能力不同，从而说明不同微生物有不同的酶系统。一、油脂水解实验一、油脂水解实验n n试验后平板出现红色斑点 说明脂肪被水解，为阳性反应。淀粉水解实验淀粉水解实验n n菌苔出现无色透明圈，说明淀粉已经水解，为阳性。明胶水解实验明胶水解实验n n发现明胶试管液化为阳性菌种石蕊牛奶实验石蕊牛奶实验n n石蕊在酸性条件下为粉红
8、色实验八实验八 糖发酵实验糖发酵实验n n试管由紫色变为黄色 说明此菌种课一产酸，德汉氏小管无气泡说明此菌种不产气。实验九实验九 IMVIC 实验实验 （1）甲基红实）甲基红实验验 n n表明为阳性菌种 产酸能力强实验九实验九 IMVIC 实验实验 （2）柠檬酸盐）柠檬酸盐实验实验n n发现菌种没有变蓝或黄，n n说明该菌种不能利用柠檬酸盐n n为阳性菌种V-P实验实验n n阳性菌种n n实验结果为红色实验十实验十 抗生素实验（抗生素实验（1）氨苄青霉）氨苄青霉实验实验n n实验结果表明菌种可以朝试纸方向生长表明菌种对氨苄青霉有抗性。实验十实验十 抗生素实验（抗生素实验（1）青霉素实）青霉素实验验n n实验结果表明菌种不能朝试纸方向生长，表明菌种对青霉素无抗性。实验十一实验十一 待鉴定菌的待鉴定菌的DNA提取提取n n提取结果不是很理想，谢谢谢谢