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1、层析技术如何选择合适的极性第1页，共30页，编辑于2022年，星期六按分离形式分为按分离形式分为：薄层层析薄层层析（Thin Layer Chromatography)普通TLC；高效TLC；制备TLC；离心TLC；柱层析柱层析（Column Chromatography)普通C C；制备C C(快速CC;低压CC；中压CC；高压CC）电泳电泳（Electrophoresis)纸电泳(PE)；毛细管电泳(CE)第2页，共30页，编辑于2022年，星期六 含水量含水量%氧化铝的活性氧化铝的活性 0 I 级级 3 II 级级 6 III 级级 10 IV 级级 15 V 级级 第3页，共30页，编
2、辑于2022年，星期六氧化铝的适用性氧化铝的适用性*碱性氧化铝：应用于碳氢化合物的分离，以碱性氧化铝：应用于碳氢化合物的分离，以 及中性、碱性物质的分离，不适用于酸性及中性、碱性物质的分离，不适用于酸性 成分的分离。成分的分离。*中性氧化铝：属于碱性吸附剂范畴，对于分中性氧化铝：属于碱性吸附剂范畴，对于分 离碱性中草药成分颇为理想，使用范围最广离碱性中草药成分颇为理想，使用范围最广 泛，不适合于酸性成分的分离。泛，不适合于酸性成分的分离。*酸性氧化铝：表面常带有酸性氧化铝：表面常带有NO3-或或Cl-，具有离，具有离 子交换剂的性质，适合于酸性成分的层析子交换剂的性质，适合于酸性成分的层析。第
3、4页，共30页，编辑于2022年，星期六 汉防己甲素 汉防己乙素第5页，共30页，编辑于2022年，星期六 对甲氧基偶氮苯 苏丹红第6页，共30页，编辑于2022年，星期六 含水量含水量%硅胶的活性硅胶的活性 0 I 级级 5 II 级级 15 III 级级 25 IV 级级 38 V 级级 第7页，共30页，编辑于2022年，星期六硅胶的适用性硅胶的适用性 能用于非极性化合物，也能用于极性化合能用于非极性化合物，也能用于极性化合物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强物。适用于芳香油、萜类、甾体、生物碱、强心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、心甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、脂肪酸、氨基酸
4、以及合成产品如：有机金属化合物等。氨基酸以及合成产品如：有机金属化合物等。第8页，共30页，编辑于2022年，星期六第9页，共30页，编辑于2022年，星期六第10页，共30页，编辑于2022年，星期六聚酰胺的适用性聚酰胺的适用性 分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤甙类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离。第11页，共30页，编辑于2022年，星期六第12页，共30页，编辑于2022
5、年，星期六第13页，共30页，编辑于2022年，星期六凝胶层析同义词：凝胶层析同义词：凝胶过滤层析凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)分子筛过滤层析分子筛过滤层析(molecular seive filtration-)阻滞扩散层析阻滞扩散层析(restricted diffusion-)排阻层析排阻层析(exclusion chromatography)凝胶渗透层析凝胶渗透层析(gel permeation chromatography)第14页，共30页，编辑于2022年，星期六Sephadex 葡聚糖凝胶第15页，共30页，编辑于2022年，星期六S
6、ephacryl 凝胶第16页，共30页，编辑于2022年，星期六Sepharose 琼脂糖凝胶第17页，共30页，编辑于2022年，星期六分子筛的适用性分子筛的适用性 水水溶溶性性的的高高分分子子化化合合物物，如如：蛋蛋白白质质，多肽，核酸，多糖等。多肽，核酸，多糖等。Sephadex LH20 适适用用于于水水溶溶性性差差的的有有机机物物质质的的分分离离，如如：脂脂类类、固固醇醇类类、黄黄酮酮类类、大大环环内内酯酯类类等等分分子子量量差差别别大大的的化化合物合物。第18页，共30页，编辑于2022年，星期六第19页，共30页，编辑于2022年，星期六第20页，共30页，编辑于2022年，星
7、期六离子交换层析适用性离子交换层析适用性 能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离能在水溶液或含水极性溶剂中产生游离离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基离子基团的酸、碱及两性成分。可用于氨基酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性酸、肽类、生物碱、有机酸、酚类等水溶性成分的分离。成分的分离。第21页，共30页，编辑于2022年，星期六使用离子交换剂使物质分离表使用离子交换剂使物质分离表 中药煎剂中药煎剂 强酸型强酸型(磺酸型磺酸型)稀稀NH4OH洗脱洗脱 通过液通过液 酸性、中性化合物酸性、中性化合物 解离型、两性化合物解离型、两性化合物 稀稀NaOH洗脱洗脱 强碱型强碱型(季铵型季铵型)强碱型强碱
8、型 稀稀HCl洗脱洗脱 通过液通过液 通过液通过液 酸性化合物酸性化合物 中性化合物中性化合物 解离型物质解离型物质 两性化合物两性化合物 (盐、生物碱盐、生物碱)第22页，共30页，编辑于2022年，星期六第23页，共30页，编辑于2022年，星期六1.溶剂槽 2.高压泵 3.进样器 4.层析柱 5.检测器 6.收集器 7.记录仪 8.梯度淋洗 HPLC HPLC 主要流程方块图主要流程方块图第24页，共30页，编辑于2022年，星期六超临界流体萃取超临界流体萃取Supercritical Fluid Extraction SCFE 当一种物质处于临界温度与临界压当一种物质处于临界温度与临界
9、压力以上的状态下，形成即非液体又非气力以上的状态下，形成即非液体又非气体的单一相态，称超临界流体。体的单一相态，称超临界流体。利用一种物质在超临界区域形成的利用一种物质在超临界区域形成的流体进行提取的方法称流体进行提取的方法称SCFE。第25页，共30页，编辑于2022年，星期六 SCF 与常温常压下的气体和液体比较与常温常压下的气体和液体比较流体流体 密度密度(g.ml-1)粘度粘度(g.cm-1s-1)扩散系数扩散系数(cm2.s-1)气体气体 0.62 103 13 10-4 0.10.4 SCF 0.20.9 19 10-4 0.20.7 10-3 液体液体 0.61.6 0.23 1
10、0-2 0.22 10-5第26页，共30页，编辑于2022年，星期六大孔树脂的基本结构大孔树脂的基本结构 第27页，共30页，编辑于2022年，星期六常用大孔树脂吸附剂性能一览表常用大孔树脂吸附剂性能一览表 树脂结构树脂结构 极性度极性度 比表面比表面(m2/g)孔径孔径(A)交联剂交联剂 备注备注Amberlite系列系列 XAD-1 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 100 200 二乙烯苯二乙烯苯 美国美国:Rohm-XAD-2 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 330 90 二乙烯苯二乙烯苯 Haas XAD-4 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 750 50 二乙烯苯二乙烯苯 XAD-7 -甲基丙烯
11、酸甲酯甲基丙烯酸甲酯 中极性中极性 450 80 双双(-甲基丙烯酸甲基丙烯酸)乙二醇酯乙二醇酯 XAD-9 亚亚 砜砜 极极 性性 250 80 XAD-10 丙烯酰胺丙烯酰胺 极极 性性 69 350 XAD-12 氧化氮类氧化氮类 强极性强极性 25 1300 第28页，共30页，编辑于2022年，星期六Diaion系列系列 HP10 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 400 二乙烯苯二乙烯苯 日本三菱化学日本三菱化学 HP20 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 600 二乙烯苯二乙烯苯 公司公司 HP30 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 500-600 二乙烯苯二乙烯苯 HP40 苯乙烯苯乙烯 非极性
12、非极性 600-700 二乙烯苯二乙烯苯 HP05 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 400-500 二乙烯苯二乙烯苯GDX104 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 590 二乙烯苯二乙烯苯 中国天津试剂中国天津试剂GDX401 乙烯、吡啶乙烯、吡啶 强极性强极性 370 二乙烯苯二乙烯苯 二厂二厂GDX501 含氮极性化合物含氮极性化合物 极极 性性 80 二乙烯苯二乙烯苯GDX601 带强极性基团带强极性基团 强极性强极性 90 二乙烯苯二乙烯苯Duolite s-30苯酚甲醛缩合物苯酚甲醛缩合物 极极 性性 128 美国美国Diamond Alkali Co.Lewapol G-7318 苯乙烯苯乙烯 非极性非极性 42 440 德国德国第29页，共30页，编辑于2022年，星期六 本章要求：掌握天然药物化学的研究内容；掌握天然药物化学的研究内容；认识天然药物化学在中药现代化中的地位；认识天然药物化学在中药现代化中的地位；了解研究方法；了解研究方法；了解结构鉴定程序；了解结构鉴定程序；掌握常用层析方法的基本原理和应用。掌握常用层析方法的基本原理和应用。（氧化（氧化铝铝层析；硅胶层析；聚酰胺层析；纸层析；层析；硅胶层析；聚酰胺层析；纸层析；凝胶层析；离子交换层析）凝胶层析；离子交换层析）第30页，共30页，编辑于2022年，星期六