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1、分分 子子 病病 理理 学学 绪绪 论论第一节第一节 病理学与分子病理学病理学与分子病理学的概念和性质的概念和性质一、病理学的概念和性质一、病理学的概念和性质o研究疾病的原因研究疾病的原因(病因学病因学)o探索疾病的发生机制探索疾病的发生机制 o描述疾病发生发展过程中可见描述疾病发生发展过程中可见的形态学变化的形态学变化 o揭示各种疾病所引起的功能异揭示各种疾病所引起的功能异常常器官病理学器官病理学细胞病理学细胞病理学超微病理学超微病理学分子病理学分子病理学 病理学病理学 微生物学和病毒学微生物学和病毒学 化学病理学或临床生物化学化学病理学或临床生物化学 免疫学免疫学 分子病理学是在蛋白质和核
2、酸水平,应分子病理学是在蛋白质和核酸水平,应用分子生物学技术研究疾病发生发展过程的用分子生物学技术研究疾病发生发展过程的病理学的一个分支学科病理学的一个分支学科 分子病理学是在研究生命现象的分子基分子病理学是在研究生命现象的分子基础上,探索疾病状态及其愈复过程中出现的础上,探索疾病状态及其愈复过程中出现的细胞生物学和分子生物学现象细胞生物学和分子生物学现象二二.分子病理学的概念和任务分子病理学的概念和任务第二节第二节 分子病理学的分子病理学的研究内容研究内容 疾病的病因疾病的病因 发病机制发病机制 病理变化病理变化 转归转归 功能变化功能变化第三节第三节 目前的研究现状目前的研究现状o病因学研
3、究病因学研究 多基因疾病多基因疾病 o发病机制研究中的分子问题发病机制研究中的分子问题o病理诊断中的分子问题病理诊断中的分子问题附:分子病理诊断附:分子病理诊断技术简介技术简介A.分子诊断方法分子诊断方法DNA和和RNA:PCR、Realtime PCR、RT-PCR、ISH、DNA测序、DNA微阵列蛋白质蛋白质:蛋白组学、组织阵列、免疫组化、流式细胞检查B.B.分子诊断应用于疾病的全过程分子诊断应用于疾病的全过程疾病阶段疾病阶段检查目的检查目的危险度预测危险度预测高危家族及一般人群中高危家族及一般人群中 疾病相关基因突变的携疾病相关基因突变的携 带者带者早期疾病诊断早期疾病诊断症前诊断症前诊
4、断疾病分期分级疾病分期分级预后、预测因素、协助预后、预测因素、协助 诊断及治疗诊断及治疗疾病随诊及监督治疗疾病随诊及监督治疗 观察个体中治疗的反应并及观察个体中治疗的反应并及 时调整时调整(1)(1)原位杂交:在保证高特异性的基础上提原位杂交:在保证高特异性的基础上提高敏感性高敏感性关键措施关键措施1.优化操作流程2.优选放大系统C.C.近年来的重大技术进步近年来的重大技术进步(2)体外酶促核酸扩增技术演进体外酶促核酸扩增技术演进凝胶电泳凝胶电泳ELISAELISA样实验样实验(酶联免疫吸附酶联免疫吸附)FRETFRET方法方法(荧光共振能量交换荧光共振能量交换)Real-time PCR A
5、ssayTaqManAdjacent ProbesScorpionMolecular beacon一管操作一管操作定量功能定量功能(3)SequencingManualAutomatic(4)Immunohistochemistryo高温修复高温修复o修复液修复液o酸碱度酸碱度附附II.国外病理实验室国外病理实验室n n美国安德森癌美国安德森癌症研究中心症研究中心主要组织学实验室冰冻切片实验室乳腺癌标本巨检病理和血液病理科o专项检查实验室专项检查实验室n免疫细胞化学免疫细胞化学n细胞学细胞学 FISH(HER-2,UroVysion)n图象分析图象分析n细胞遗传学细胞遗传学(FISH)n分子病
6、理诊断分子病理诊断n流式细胞计数流式细胞计数专项实验室免疫组织(细胞)化学专项实验室流式细胞学流式细胞学分子诊断分子诊断接收和传递诊断记录,归档和切片归还Modern Pathologist第四节第四节 展望展望o首先,对疾病本质的认识更加深化,尤其是多基因首先,对疾病本质的认识更加深化,尤其是多基因疾病,人们过去无法对其深人研究,现在发现其中疾病,人们过去无法对其深人研究,现在发现其中许多疾病的发生本质上是由相关基因的结构和功能许多疾病的发生本质上是由相关基因的结构和功能异常所致异常所致o其次,致病基因和相关基因被大量发现,并将逐步其次,致病基因和相关基因被大量发现,并将逐步阐明其在疾病发病学中的意义阐明其在疾病发病学中的意义o第三,肿瘤基因诊断和基因治疗将取得突破性进展第三,肿瘤基因诊断和基因治疗将取得突破性进展o第四,人类基因组计划实施过程中创造发明的新技第四,人类基因组计划实施过程中创造发明的新技术和新方法将在病理学中广泛应用,并导致出现更术和新方法将在病理学中广泛应用,并导致出现更加迅猛的知识增长趋势加迅猛的知识增长趋势