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1、Agilent 1260 基本操作方法基本操作方法基本单元基本单元溶剂柜溶剂柜四元泵四元泵自动进样器自动进样器柱温箱柱温箱DAD检测器检测器建立文件位置建立文件位置工作站联机画面工作站联机画面nAgilent工作站建立方法是以改写方式建立工作站建立方法是以改写方式建立n建议先调用工作站默认方法建议先调用工作站默认方法DEF_LC.M，n在此基础上进行改写在此基础上进行改写建立新方法建立新方法编辑完整方法编辑完整方法n建议给予注释建议给予注释ww方法信息方法信息色谱柱：色谱柱：4.6mm，5m 流速：流速：12mL/min仪器仪器/采集采集-设置泵设置泵泵输送流动相的初始状态泵输送流动相的初始状
2、态根据预实验确定采集时间根据预实验确定采集时间一次运行结束后，到第二一次运行结束后，到第二次进样前的等候时间次进样前的等候时间默认：默认：999.99min样品复杂样品复杂梯度洗脱梯度洗脱 MeOH H2O20min 20 8040min 40 6060min 40 6080min 80 20020406080仪器仪器/采集采集-设置进样器设置进样器标准：标准：0.1100L前一针样品运行过程中，把前一针样品运行过程中，把下一针的样品瓶抓取到针座下一针的样品瓶抓取到针座前一针样品运行过程中，把下一前一针样品运行过程中，把下一针样品吸入定量环，准备进样针样品吸入定量环，准备进样运行停止前运行停止
3、前0.5 1min仪器仪器/采集采集-设置柱温箱设置柱温箱仪器仪器/采集采集-设置检测器设置检测器带宽越小，吸收越大，噪音也大，信带宽越小，吸收越大，噪音也大，信/噪小噪小带宽越大，吸收减小，噪音减小，信带宽越大，吸收减小，噪音减小，信/噪大噪大梯度洗脱，基线漂移，参比波长可减轻漂移梯度洗脱，基线漂移，参比波长可减轻漂移影响色谱图的采集频率影响色谱图的采集频率应略小于色谱图上最窄的色谱峰的半峰宽应略小于色谱图上最窄的色谱峰的半峰宽太快：色谱图毛刺；太慢：数据丢失太快：色谱图毛刺；太慢：数据丢失通过光谱选条件通过光谱选条件进行纯度检测进行纯度检测190950nm扫描间隔扫描间隔每次进样前自动平衡
4、每次进样前自动平衡序列进样序列进样每次进样后自动平衡每次进样后自动平衡手动进样手动进样只有打开才就绪只有打开才就绪DAD高级功能高级功能n利用等吸收图优化色谱条件利用等吸收图优化色谱条件反选后最亮处表示吸收最集中，即最大吸收。反选后最亮处表示吸收最集中，即最大吸收。参比波长：选择样品无吸收，且靠近样品吸收处。参比波长：选择样品无吸收，且靠近样品吸收处。DAD高级功能高级功能n色谱峰纯度检索色谱峰纯度检索n纯色谱峰的纯度因子将高于阈值纯色谱峰的纯度因子将高于阈值n不纯峰的纯度因子将低于阈值不纯峰的纯度因子将低于阈值运行时选项表运行时选项表必选必选一般不选一般不选冲柱程序冲柱程序方法方法-新建方法
5、新建方法编辑完整方法编辑完整方法另存为：冲柱另存为：冲柱.Mpumpall off（关泵）（关泵）lampall off（关灯）（关灯）Standby（待机）（待机）进样前准备进样前准备检查流动相检查流动相设置溶剂瓶填充量设置溶剂瓶填充量泵的初始化泵的初始化打开检测器打开检测器调出在线信号窗口调出在线信号窗口排气泡排气泡以流动相置换各通道以流动相置换各通道DADDAD或或VWDVWD至少预热至少预热10min10min检查流动相检查流动相n稍微摇动溶剂瓶，检查是否有悬浮物。稍微摇动溶剂瓶，检查是否有悬浮物。n检查各溶剂瓶所在管路是否与待运行方法一致。检查各溶剂瓶所在管路是否与待运行方法一致。n
6、新换溶剂需滤过、超声。（乙腈最好新配）新换溶剂需滤过、超声。（乙腈最好新配）n流动相含缓冲盐，要打开流动相含缓冲盐，要打开泵密封垫清洗组件泵密封垫清洗组件。打开密封垫清洗组件打开密封垫清洗组件n流动相含缓冲盐：流动相含缓冲盐：10%异丙醇水溶液（循环）异丙醇水溶液（循环）n流动相为有机相：有机相流动相为有机相：有机相设置溶剂瓶填充量设置溶剂瓶填充量n当重新添加流动相后，必须更改该界面当重新添加流动相后，必须更改该界面的实际溶剂值。的实际溶剂值。调出在线信号窗口调出在线信号窗口样品采集方案样品采集方案单针进样单针进样序列进样序列进样加冲柱加冲柱.M数据分析参数（脱机）数据分析参数（脱机）n调用数
7、据文件调用数据文件n建立合适的积分参数建立合适的积分参数n设置报告格式设置报告格式数据分析界面数据分析界面调用数据文件调用数据文件调用一个数据调用一个数据重叠调用一组数据重叠调用一组数据信号窗口信号窗口选择最佳测定条件选择最佳测定条件最高峰满刻度显示最高峰满刻度显示自行规定显示的时自行规定显示的时间轴和响应值量程间轴和响应值量程第二高峰满刻度第二高峰满刻度设置文字标注的字体、样式设置文字标注的字体、样式在图谱上添加文字标注在图谱上添加文字标注在图谱上添加线形标注在图谱上添加线形标注移动谱图上所添加的文字标注、线形标注或移动谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注图形标注删除谱图上所添加
8、的文字标注、线形标注或删除谱图上所添加的文字标注、线形标注或EMF图形标注图形标注在图谱上添加在图谱上添加EMF格式的图形标注格式的图形标注多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键多张色谱图使用同一尺寸显示或各自满量程显示的切换键多张色谱图使用同一尺寸显示或各自满量程显示的切换键是否显示化合物名称的切换键是否显示化合物名称的切换键是否显示化合物保留时间的切换键是否显示化合物保留时间的切换键是否显示图谱基线的切换键是否显示图谱基线的切换键是否显示图谱标题信息的切换键是否显示图谱标题信息的切换键是否显示图谱坐标轴的切换键是否显示图谱坐标轴的切换键打印当前窗口中的谱图
9、打印当前窗口中的谱图将当前窗口中的谱图拷贝到剪贴板中将当前窗口中的谱图拷贝到剪贴板中在图谱上添加文字标注在图谱上添加文字标注在图谱上添加线形标注在图谱上添加线形标注在图谱上添加在图谱上添加EMF格式的图形标注格式的图形标注多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键多张色谱图分开显示或重叠显示的切换键不显示保留时间、基线、图谱标题不显示保留时间、基线、图谱标题123 4 5 6789 10 111.按照时间参考点进行横轴对齐按照时间参考点进行横轴对齐2.纵轴对齐纵轴对齐3.谱图复原谱图复原4.进行多张谱图三维模拟显示进行多张谱图三维模拟显示5.谱图镜像显示谱图镜像显示6.谱图差减显示（扣空白）谱图差减
10、显示（扣空白）7.进行谱图积分进行谱图积分8.设置时间参考点设置时间参考点9.移动时间参考点移动时间参考点10.删除时间参考点删除时间参考点11.删除当前显示的谱图删除当前显示的谱图设置时间参考点设置时间参考点按照时间参考点进行横轴对齐按照时间参考点进行横轴对齐纵轴对齐纵轴对齐进行多张谱图三维模拟显示进行多张谱图三维模拟显示谱图镜像显示谱图镜像显示谱图差减显示（扣空白）谱图差减显示（扣空白）积分参数设置积分参数设置积分参数设置积分参数设置积分当前色谱图积分当前色谱图自动积分自动积分编辑编辑/设置积分事件表设置积分事件表查找当前色谱图的查找当前色谱图的合适积分参数合适积分参数是否自动使用手动积分
11、参数是否自动使用手动积分参数对所有信号均适用的积分事件初始值对所有信号均适用的积分事件初始值对前延或拖尾峰进行斜切处理对前延或拖尾峰进行斜切处理设置基线设置基线不校正基线不校正基线校正基线校正基线是否自动使用手动积分参数是否自动使用手动积分参数对所有信号均适用的积分事件初始值对所有信号均适用的积分事件初始值 贯穿贯穿 无贯穿无贯穿是否自动使用手动积分参数是否自动使用手动积分参数对所有信号均适用的积分事件初始值对所有信号均适用的积分事件初始值设置未达到基线分离的峰积分方式设置未达到基线分离的峰积分方式峰谷比低于峰谷比低于设定值设定值峰谷比高于峰谷比高于设定值设定值基线校正选基线校正选“高级高级”
12、峰谷比才生效峰谷比才生效是否自动使用手动积分参数是否自动使用手动积分参数对所有信号均适用的积分事件初始值对所有信号均适用的积分事件初始值直接影响峰面积大小直接影响峰面积大小改动要慎重改动要慎重不影响峰面积大小不影响峰面积大小根据需要改动根据需要改动19项参数项参数12345671.选择工具（选中色谱峰）选择工具（选中色谱峰）2.基线连到此点基线连到此点3.基线维持基线维持4.拖尾峰撇去拖尾峰撇去5.“积分积分”开开/关关6.斜率灵敏度斜率灵敏度7.最小峰面积最小峰面积8.固定峰宽固定峰宽9.“检测肩峰检测肩峰”开开/关关谷底基线谷底基线基线维持基线维持89基线连到此点基线连到此点“积分积分”开
13、开/关关设定报告格式设定报告格式报告格式报告格式需编辑噪音范围需编辑噪音范围就近计算就近计算QPDF：输出可以移植文件格式：输出可以移植文件格式QTXT：只输出报告的文本内容，以纯文本形式输出：只输出报告的文本内容，以纯文本形式输出QCSV：将报告以逗点分隔数据库文件形式输出，可以用：将报告以逗点分隔数据库文件形式输出，可以用Excel等程序打开该文件等程序打开该文件QEMF：将报告以：将报告以EMF图形文件形式输出图形文件形式输出QDIF：将报告以数据交换文件形式输出，可以用：将报告以数据交换文件形式输出，可以用Excel等程等程序打开该文件序打开该文件QHTM：将报告以超文本文件形式输出，可以使用：将报告以超文本文件形式输出，可以使用IE浏览器浏览器打开该文件打开该文件QXLS：将报告以：将报告以EXCEL文件形式输出文件形式输出