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1、没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任胰岛素胰岛素(E.Coli)生产流程生产流程没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任 没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任人胰岛素碳水化合物代谢和体细胞供能一级结构：51个氨基酸 双链（A：21，B：30）分子量：5734 g/mol等电点：5.4胰岛素产生胰岛素产生受损导致糖受损导致糖尿病尿病没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起
2、。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任人胰岛素的制备方法人胰腺提取-原料来源有限通过单个氨基酸化学合成-生产成本太高猪胰岛素转化或“半合成”-成本高，来源少基因工程菌发酵 -双链Genentech,开发，Eli Lilly 放大 -胰岛素原（82个氨基酸，胰岛素的前体）-分泌法（Yeast），Novo Nordisk产业化 -细胞内法（细胞内法（E.coli），表达），表达121+82个氨基酸个氨基酸的的Trp-LE-Met-proinsulin包涵体，包涵体，Eli Lilly 产业化产业化没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生
3、责任。每承担一次责任E.Coli胰岛素原法转化流程没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任市场分析和设计基础（2005）糖尿病人数：美国1800万，全世界1.5-2.0亿，年增长率3-4%胰岛素年销售额35-40亿美元,由Novo Nordisc、Eli Lilly和Sanofi Aventis三家垄断每个患者每年购买胰岛素的花费：$250-750每个病人每年平均用量：0.5克纯胰岛素对1.5-2.0亿患者，年需求75-100吨纯胰岛素目前年产量20-30吨纯胰岛素设计年产量：1800kg纯胰岛素，满足350万人年工作330天
4、，每48小时生产一批次，每年160批次每批次发酵液体积：37.5立方米，发酵罐空罐体积：50立方米没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任人重组胰岛素（E.coli）生产流程发酵工段初回收工段反应工段终纯化工段没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任通气量：通气量：0.5VVM空罐体积：空罐体积：50立方米立方米前接前接2级种子罐级种子罐发酵周期：发酵周
5、期：18小时小时发酵温度：发酵温度：37度度终菌密度：终菌密度：30克（干重）克（干重）/升升包涵体含量：干重的包涵体含量：干重的20%终保温：终保温：10度度发酵工段发酵工段没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任初回收工段物料温度保持10度-三个平行的碟片式离心机收获菌体-菌液从37000L浓缩到9165L菌泥-菌体收率98%加与菌泥等体积的缓冲液(96.4%w/w WFI注射用水,0.7%EDTA,和2.9%TRIS-base)稀释,有利于菌体碎片与包涵体分离三次高压匀浆机破菌释放包涵体压降800bar终物料体积：140
6、0L用前面的碟片式离心机回收包涵体收率98%加2倍体积的清洗剂(0.66%Triton-X100),洗涤包涵体没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任反应工段溶解包涵体玻璃反应釜内加终浓度为300g/L(5M)的尿素（溶解变性蛋白）和40g/L的 2-巯基乙醇（减少二硫键的结合）反应时间：8小时溶解收率：95%包涵体内包涵体内Trp-LE-Met-proinsulin含量含量：80%w/wWFI透析6小时，收率98%，去除尿素和2-巯基乙醇过滤去除细小颗粒，保护后续层析柱。终体积5200L再次离心，去除菌体碎片和可溶性蛋白共用
7、前面回收工段的碟片离心机没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任反应工段嵌合蛋白被CNBr溴化氰裂解为121个氨基酸的Trp-LE-Met和82个氨基酸的Proinsulin70%甲酸溶液30倍过量加入CNBr(理论摩尔比1:1)收率95%反应时间：12小时反应温度：20度利用前面溶解反应釜在CNBr沸点35度旋转真空蒸发1小时会产生少量有毒氰化物气体，现场应准备次氯酸盐亚硫酸分解的目的是打开胰岛素原和二硫键，给半胱氨酸加上SO3部分pH 9-11，50%w/w(6M)盐酸胍，0.35%碳酸氢铵，3%硫酸钠，1.5%过硫酸钠，
8、反应时间12小时，收率95%WFI透析至盐酸胍浓度为20%w/w共用前面包涵体溶解过程的透析器没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任反应工段再折叠三个平行阳离子交换层析床纯化proinsulin床直径：140cm床高度：25cm填料：SP Sepharose FF,GE洗脱液：29%w/w尿素，1.5%NaCl,69.5%WFIpH4收率90%再折叠的目的是去除SO3，然后使二硫键形成，并再折叠成胰岛素原的正确天然结构加入巯基乙醇没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任反应工段酶转化没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任终纯化工段没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任终纯化工段没有明确的价值取向和人生目标，实现自我人生价值就无从谈起。人生价值就是人生目标，就是人生责任。每承担一次责任