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1、动物实验技术与方法第1页，共95页，编辑于2022年，星期五 在在医医学学教教学学、科科研研和和医医疗疗工工作作中中，不不论论是是从从事事基基础础医医学学还还是是临临床床医医学学或或预预防防医医学学，都都需需要要用用实实验验动动物物来来进进行行各各种种实实验验。通通过过对对动动物物实实验验的的观观察察、分分析析，来来研研究究需需要要解解决决的的问问题题，动动物物实实验验方方法已成为研究工作中必不可少的重要手段。法已成为研究工作中必不可少的重要手段。动物实验动物实验第2页，共95页，编辑于2022年，星期五F动物实验前的准备动物实验前的准备F实验动物的抓取和固定实验动物的抓取和固定F实验动物的麻
2、醉实验动物的麻醉F实验动物给药方法实验动物给药方法F各种检验标本的采集方法各种检验标本的采集方法F实验动物的安乐死及无害化处理实验动物的安乐死及无害化处理第3页，共95页，编辑于2022年，星期五F动物的购入动物的购入F动物外观健康检查动物外观健康检查F动物编号标记动物编号标记F动物被毛的去除动物被毛的去除动物实验前的准备动物实验前的准备第4页，共95页，编辑于2022年，星期五动物的购入动物的购入 购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取实实实实验验验验动动动动物物物物时时时时，应应应应向向向向供供供供应应应应部部部部门门门门索索索索取取取取所所所所用用用用动动动动物物物物相相相相应应应应等
3、等等等级级级级的的的的质质质质量量量量合合合合格格格格证证证证书书书书，若若若若是是是是购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取清清清清洁洁洁洁级级级级以以以以上上上上实实实实验验验验动动动动物物物物，应应应应采采采采用用用用带带带带有有有有空空空空气气气气过过过过滤滤滤滤膜膜膜膜的的的的无无无无菌菌菌菌运运运运输输输输罐罐罐罐或或或或带带带带过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。第5页，共95页，编辑于2022年，星期五F皮毛：有无光泽、出血、干燥；皮毛：有无光泽、出血、
4、干燥；F眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等；眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等；F耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；F四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；F肛门：有无下痢、血便、脱肛等。肛门：有无下痢、血便、脱肛等。动物外观健康检查动物外观健康检查第6页，共95页，编辑于2022年，星期五编号标记编号标记 目的：为了分组目的：为了分组目的：为了分组目的：为了分组要求：清晰、耐久、简便、适用要求：清晰、耐久、简便、适用颜料标记颜料标记颜料标记颜料标记 颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的颜料标记适应于较大量的大、小
5、鼠等小动物的颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有编号。常用的颜料有编号。常用的颜料有编号。常用的颜料有5%5%5%5%苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液(黄色黄色黄色黄色)、2%2%2%2%硝酸银溶硝酸银溶硝酸银溶硝酸银溶液液液液(咖啡色咖啡色咖啡色咖啡色)、0.5%0.5%0.5%0.5%中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液(红色红色红色红色)、煤焦油的酒精、煤焦油的酒精、煤焦油的酒精、煤焦油的酒精溶液溶液溶液溶液(黑色黑色黑色黑色)。颜料号的原则是先左后右，从上而下。颜料号的原则是先左后右，从上而下。颜料号的原
6、则是先左后右，从上而下。颜料号的原则是先左后右，从上而下。第7页，共95页，编辑于2022年，星期五小鼠和大鼠标号示图小鼠和大鼠标号示图第8页，共95页，编辑于2022年，星期五q烙印烙印 用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。q q纹身纹身纹身纹身 用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮
7、肤(兔多在耳朵内侧，猴多兔多在耳朵内侧，猴多兔多在耳朵内侧，猴多兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤在前胸皮肤在前胸皮肤在前胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。号，多用于猴、兔的编号。号，多用于猴、兔的编号。号，多用于猴、兔的编号。第9页，共95页，编辑于2022年，星期五q号牌号牌 将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应少量动物
8、时也可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。号。第10页，共95页，编辑于2022年，星期五q毛色毛色 利用动物的毛色将其编号，用于少量的利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。狗、马、猫、猴等大动物的编号。q剪毛剪毛 用剪刀在狗背上剪出号码，此方法用剪刀在狗背上剪出号码，此方法简单，字迹清楚、可靠，便于观察。简单，字迹清楚、可靠，便于观察。q打孔打孔 用打孔器在兔耳上打孔或剪口。用打孔器在兔耳上打孔或剪口。第11页，共95页，编辑于2022年，星期五 为为了了排排除除动动物物被被毛毛对对实实验验操操作作和和观
9、观察察结结果果的的影影响响，实实验验中中需需要要去去除除或或剪剪短短动动物物的的被被毛。毛。动物被毛的去除动物被毛的去除第12页，共95页，编辑于2022年，星期五脱毛剂脱毛剂1)8%NaS NaS 8g+1)8%NaS NaS 8g+水至水至100ml100ml；也可用硫化钠；也可用硫化钠8 8克、克、淀粉淀粉7 7克、甘油克、甘油4 4克、硼砂克、硼砂1 1克，用自来水加至克，用自来水加至100ml100ml。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液述配制好的溶液5 57ml7ml可用于可用于 1512cm 1512cm2 2皮肤的脱皮肤的脱皮肤的
10、脱皮肤的脱毛。毛。毛。毛。2)10%NaS 2)10%NaS 2)10%NaS 2)10%NaS 硫化钠硫化钠硫化钠硫化钠10101010克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙15151515克，自来水加至克，自来水加至克，自来水加至克，自来水加至100ml100ml100ml100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤第13页，共95页，编辑于2022年，星期五动物的抓取与固定方法动物的抓取与固定方法 q目的：限制动物的活动，持安静状态目的：限制动物的活动，持安静状态 以便正确操作和记录以便正确操作和记录
11、q要求：要求：不损伤实验动物不损伤实验动物 不影响观察指标不影响观察指标 实验者不被动物咬伤实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。第14页，共95页，编辑于2022年，星期五F一、小鼠一、小鼠 用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将
12、小鼠完全固定。将小鼠完全固定。第15页，共95页，编辑于2022年，星期五 小鼠的抓取与固定小鼠的抓取与固定第16页，共95页，编辑于2022年，星期五小鼠的抓取小鼠的抓取第17页，共95页，编辑于2022年，星期五二、大鼠二、大鼠 大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套，右手轻大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。第18页，
13、共95页，编辑于2022年，星期五大鼠的抓取大鼠的抓取第19页，共95页，编辑于2022年，星期五F三、豚鼠三、豚鼠 抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起来；抓取较大抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起来；抓取较大的豚鼠时，可先用手掌抠住豚鼠的背部，抓住其肩胛的豚鼠时，可先用手掌抠住豚鼠的背部，抓住其肩胛上方，将右手张开，用手指抓住颈部再慢慢将其提起上方，将右手张开，用手指抓住颈部再慢慢将其提起第20页，共95页，编辑于2022年，星期五豚鼠的抓取豚鼠的抓取第21页，共95页，编辑于2022年，星期五四、家兔四、家兔四、家兔四、家兔 一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托一只手抓住兔的颈部皮毛，将
14、兔提起，用另一只手托一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托一只手抓住兔的颈部皮毛，将兔提起，用另一只手托其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大，故人其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大，故人其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大，故人其臀，或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部们常误认为抓其耳可以提起，或有人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。提起均为不正确的操作。提起均为不正确的操作。提起均为不正确的操作。第22页，共95
15、页，编辑于2022年，星期五兔的抓取方法兔的抓取方法第23页，共95页，编辑于2022年，星期五猫的抓取与固定方法猫的抓取与固定方法第24页，共95页，编辑于2022年，星期五 布制猪固定带布制猪固定带第25页，共95页，编辑于2022年，星期五猪的悬吊式固定猪的悬吊式固定第26页，共95页，编辑于2022年，星期五 为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂药物注入实验动物体内。由于实验目的、
16、动物种类、药物剂药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多样。型不同，给药途径和方法也多种多样。型不同，给药途径和方法也多种多样。型不同，给药途径和方法也多种多样。实验动物给药方法实验动物给药方法第27页，共95页，编辑于2022年，星期五实验动物的给药剂量实验动物的给药剂量D D2 2=D=D1 1KK2 2/K/K1 1 3 3 W W1 1/W/W2 2 D:D:药物剂量药物剂量(g(gkgkgkgkg-1-1d d-1-1)W:W:动物体重动物体重(kg)(kg)K:K:K:K:常数常数常数常数
17、第28页，共95页，编辑于2022年，星期五不同种类动物的不同种类动物的K K值值名称名称 K K值值 名称名称 K K值值 人人 10.610.6 家兔家兔 10.110.1 猴猴 11.811.8 大鼠大鼠 9.19.1 狗狗 11.211.2 豚鼠豚鼠 9.89.8 猫猫 9.89.8 小鼠小鼠 9.19.1第29页，共95页，编辑于2022年，星期五 实验动物的给药途径和方法实验动物的给药途径和方法第30页，共95页，编辑于2022年，星期五（一）（一）口服给药口服给药 经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验中常用经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验中常用经口给药剂量准确，对动物
18、安全，是动物实验中常用经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。必须口服肠道不吸收的抗生素。必须口服肠道不吸收的抗生素。必须口服肠道不吸收的抗生素。第31页，共95页，编辑于2022年，星期五1灌胃法灌胃法 是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内
19、的一种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。第32页，共95页，编辑于2022年，星期五 （1）鼠类）鼠类：
20、鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到达膈肌角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。退针或将针拔出，以免损伤、穿破食道或误入气管。第33页，共95页，编辑于2022年，星期五小白鼠灌胃方法小白鼠灌胃方法第34页，共95页，编辑于2022年，星期五大白鼠灌胃方法大白鼠灌
21、胃方法第35页，共95页，编辑于2022年，星期五（2 2）兔、犬等）兔、犬等）兔、犬等）兔、犬等：灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌先将动物固定，再将开口器固定于上下门齿之间，然后将灌胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口中，沿胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口中，沿胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物
22、口中，沿胃管（常用导尿管代潜）从开口器的小孔插入动物口中，沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中，若无气泡产生，表明灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。灌胃管被正确插入胃中，未误入气管。灌胃管被正确插
23、入胃中，未误入气管。第36页，共95页，编辑于2022年，星期五兔灌胃方法兔灌胃方法第37页，共95页，编辑于2022年，星期五狗灌胃方法狗灌胃方法第38页，共95页，编辑于2022年，星期五动物种类动物种类插入深度，插入深度，每次灌胃量：每次灌胃量：小白鼠小白鼠3cm3cm1ml1ml大白鼠、豚鼠大白鼠、豚鼠 5cm5cm1-4ml1-4ml兔兔 15cm15cm80-100ml80-100ml犬犬约约20cm20cm200-250ml200-250ml第39页，共95页，编辑于2022年，星期五（二）注射给药法（二）注射给药法 注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的注射给药剂量准确、
24、作用快，是动物实验中常用的注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用4#4#4#4#针头，针头，针头，针头，兔、猫、犬、猪、猴用兔、猫、犬、猪、猴用兔、猫、犬、猪、猴用兔、猫、犬、猪、猴用6 6 6 68#8#8#8#针头）。针头）。针头）。针头）。第40页，共95页，编辑于2022年，星期五1皮下注射皮下注射 皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮肤，皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运
25、动皮肤，右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推送药液使注右手持注射器，使针头水平刺入皮下，推送药液使注射部位隆起。拔针时，以手指捏住针刺部位，可防止射部位隆起。拔针时，以手指捏住针刺部位，可防止药液外漏。皮下注射剂量为药液外漏。皮下注射剂量为0.1-0.3ml/10g.0.1-0.3ml/10g.第41页，共95页，编辑于2022年，星期五 皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠、皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠、小鼠和豚鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；小鼠和豚鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧作皮下注射；家兔可在背部或耳根部作皮下注射：猫、犬则在大腿家兔可在背部或耳根部作皮下注射：猫、
26、犬则在大腿外侧作皮下注射。外侧作皮下注射。第42页，共95页，编辑于2022年，星期五皮下注射皮下注射第43页，共95页，编辑于2022年，星期五2 2皮内注射皮内注射皮内注射皮内注射 将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并将注射部位脱毛、消毒，用左手拇指和食指压住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，使之绷紧，在两指之间，用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内，然后向
27、上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液然后向上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液然后向上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液然后向上挑起并再稍刺入。随之慢慢注入一定量的药液,会会会会感到有很大阻力感到有很大阻力感到有很大阻力感到有很大阻力.第44页，共95页，编辑于2022年，星期五F缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆缓慢注射，皮肤表面出现白色桔皮样隆起，若隆起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内起可维持一定时间，则证明确实注射在皮内.如很如很快消失快消失,就可能注入皮下就可能注入皮下,应重换部位再注射应重换部位再注射,如果如果注射完毕后马上拔针注射完毕后马上拔针,药液会
28、从针孔漏出药液会从针孔漏出,所以需所以需注射后注射后5min5min再拔出再拔出.第45页，共95页，编辑于2022年，星期五皮内注射皮内注射第46页，共95页，编辑于2022年，星期五3 3肌肉注射肌肉注射肌肉注射肌肉注射 肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。注肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可射时针头宜垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可注射。注射。大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉；大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉；家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射：犬、猴等大型动
29、物选臂部注射。犬、猴等大型动物选臂部注射。犬、猴等大型动物选臂部注射。犬、猴等大型动物选臂部注射。第47页，共95页，编辑于2022年，星期五4腹腔注射腹腔注射 腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏移腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置,注射器注射器沿沿45454545角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。回血或尿液，即可注入药液。回血或尿液，
30、即可注入药液。回血或尿液，即可注入药液。第48页，共95页，编辑于2022年，星期五q小鼠的一次注射剂量为小鼠的一次注射剂量为0.1-0.2ml/10g(0.1-0.2ml/10g(体重体重)q大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为大鼠一次注射剂量为1-2ml/100g(1-2ml/100g(1-2ml/100g(1-2ml/100g(体重体重体重体重).).).).q家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧家兔：下腹部近腹白线左右两侧1cm1cm1cm1cm处处处处q犬：脐后腹白线两侧边犬：脐后腹白线两侧边犬：脐后腹白线两侧边犬：脐
31、后腹白线两侧边1 1 1 12cm2cm处进行腹腔注射处进行腹腔注射第49页，共95页，编辑于2022年，星期五小鼠腹腔注射方法小鼠腹腔注射方法第50页，共95页，编辑于2022年，星期五5 5静脉注射静脉注射静脉注射静脉注射 将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。（1 1 1 1）小鼠和大鼠）小鼠和大鼠）
32、小鼠和大鼠）小鼠和大鼠：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有3 3 3 3根，根，根，根，左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各左右两侧和背侧各1 1 1 1根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾
33、部用4545454550505050的温水浸润几分钟或用的温水浸润几分钟或用的温水浸润几分钟或用的温水浸润几分钟或用75%75%75%75%酒精棉球反复擦拭使血管酒精棉球反复擦拭使血管酒精棉球反复擦拭使血管酒精棉球反复擦拭使血管扩张，并使表皮角质软化。扩张，并使表皮角质软化。扩张，并使表皮角质软化。扩张，并使表皮角质软化。第51页，共95页，编辑于2022年，星期五小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法第52页，共95页，编辑于2022年，星期五小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法第53页，共95页，编辑于2022年，星期五狗前肢内侧皮下静脉注射方法狗前肢内侧皮下静脉注射方法第54页，共95页，
34、编辑于2022年，星期五狗后肢静脉注射方法狗后肢静脉注射方法第55页，共95页，编辑于2022年，星期五猪灌胃方法猪灌胃方法第56页，共95页，编辑于2022年，星期五各种动物一次给药能耐受的最大容量各种动物一次给药能耐受的最大容量(ml)(ml)动物动物 灌胃灌胃 皮内注射皮内注射 皮下注射皮下注射 肌肉注射肌肉注射 腹腔注射腹腔注射 静脉注射静脉注射 小鼠小鼠 0.9 0.1 1.5 0.2 1.0 0.8 大鼠大鼠 5.0 0.1 5.0 0.5 2.0 4.0 兔兔 200 0.2 10 2.0 5.0 10 猫猫 150 0.2 10 2.0 5.0 10 猴猴 300 0.3 50
35、 3.0 10 20 狗狗 500 0.3 100 4.0 _ 100第57页，共95页，编辑于2022年，星期五实验动物样本的采集实验动物样本的采集 及时、准确地采集实验动物的血样或排及时、准确地采集实验动物的血样或排泄泄(分泌分泌)物等实验标本，是保证动物实验结物等实验标本，是保证动物实验结果准确性的重要条件。采集不当时可严重影果准确性的重要条件。采集不当时可严重影响实验结果，如狗或猴在实验台上较长时间响实验结果，如狗或猴在实验台上较长时间剧烈挣扎后可使外周血白细胞明显升高；如剧烈挣扎后可使外周血白细胞明显升高；如抽血不顺利且时间较长，则血样中血小板计抽血不顺利且时间较长，则血样中血小板计
36、数可明显降低。数可明显降低。第58页，共95页，编辑于2022年，星期五血样的采集血样的采集 根据不同的实验要求及不同种类的实验动根据不同的实验要求及不同种类的实验动物而采取不同的采血方法。如：物而采取不同的采血方法。如：心心脏脏、胸胸主主动动脉脉、股股动动脉脉、静静脉脉、剪剪(割割、刺刺)尾尾、眼眶、断头眼眶、断头第59页，共95页，编辑于2022年，星期五1 1小鼠和大鼠小鼠和大鼠小鼠和大鼠小鼠和大鼠（1）剪尾采血：需血量较少时常用此法。）剪尾采血：需血量较少时常用此法。先将动物固定，将鼠尾浸在先将动物固定，将鼠尾浸在4545左右温水中几分钟或左右温水中几分钟或用酒精棉球涂擦鼠尾用酒精棉球
37、涂擦鼠尾,使尾部血管充盈使尾部血管充盈,剪去尾尖剪去尾尖1 12mm2mm(小鼠小鼠)或或3 35mm(5mm(大鼠大鼠),),使血液顺血管壁自由流入试管或使血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时用血红蛋白吸管吸取。采血结束时,伤口消毒并压迫止血。伤口消毒并压迫止血。此法每只鼠一般可采血此法每只鼠一般可采血1010次以上，小鼠每次可取血次以上，小鼠每次可取血0.1ml0.1ml左右，大鼠可取血左右，大鼠可取血0.30.30.5ml0.5ml0.5ml0.5ml。第60页，共95页，编辑于2022年，星期五鼠尾静脉取血方法鼠尾静脉取血方法第61页，共95页，编辑于2022年，星
38、期五（2 2）眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，食眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，食眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，食眼眶后静脉丛采血：操作者一手固定小鼠或大鼠，食指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，另一只手指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，另一只手指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，另一只手指和拇指轻轻压迫颈部两侧，使眶后静脉丛充血，另一只手持毛细采血管，以持毛细采血管，以持毛细采血管，以持毛细采血管，以45454545从内眼角刺入，并向下旋转，感觉刺从内眼角刺入，并向下旋转，感觉刺从内眼角刺入，并向下旋转，感觉刺从内眼角刺入，并向
39、下旋转，感觉刺入静脉丛后，再向外边退边吸，当得到所需血量后，放松加入静脉丛后，再向外边退边吸，当得到所需血量后，放松加入静脉丛后，再向外边退边吸，当得到所需血量后，放松加入静脉丛后，再向外边退边吸，当得到所需血量后，放松加于颈部的压力，并拔出采血器，以防穿刺孔出血。若技术熟于颈部的压力，并拔出采血器，以防穿刺孔出血。若技术熟于颈部的压力，并拔出采血器，以防穿刺孔出血。若技术熟于颈部的压力，并拔出采血器，以防穿刺孔出血。若技术熟练，此方法在短期内可重复采血，小鼠一次可采练，此方法在短期内可重复采血，小鼠一次可采练，此方法在短期内可重复采血，小鼠一次可采练，此方法在短期内可重复采血，小鼠一次可采0
40、.2-0.3ml0.2-0.3ml0.2-0.3ml0.2-0.3ml，大鼠可采血约，大鼠可采血约，大鼠可采血约，大鼠可采血约0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml。如只进行一次取血，可采用摘眼球。如只进行一次取血，可采用摘眼球。如只进行一次取血，可采用摘眼球。如只进行一次取血，可采用摘眼球法。法。法。法。第62页，共95页，编辑于2022年，星期五小白鼠后眼眶静脉丛取血方法小白鼠后眼眶静脉丛取血方法第63页，共95页，编辑于2022年，星期五大白鼠后眼眶静脉丛取血方法大白鼠后眼眶静脉丛取血方法第64页，共95页，编辑于2022年，星期五（3 3）股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股
41、动股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股动股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股动股动脉采血：大量取血时常用此法。需手术分离股动脉。小鼠的一次采血量可达脉。小鼠的一次采血量可达脉。小鼠的一次采血量可达脉。小鼠的一次采血量可达0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml，大鼠可达，大鼠可达，大鼠可达，大鼠可达2.0ml2.0ml2.0ml2.0ml。（4 4）断头采血）断头采血（5 5 5 5）心脏采血）心脏采血）心脏采血）心脏采血第65页，共95页，编辑于2022年，星期五狗股动脉取血方法狗股动脉取血方法第66页，共95页，编辑于2022年，星期五猕猴后肢静脉取血方法猕猴后肢静脉取血方
42、法第67页，共95页，编辑于2022年，星期五小白鼠断头取血方法小白鼠断头取血方法第68页，共95页，编辑于2022年，星期五大白鼠颈静脉取血方法大白鼠颈静脉取血方法第69页，共95页，编辑于2022年，星期五兔耳缘静脉取血方法兔耳缘静脉取血方法第70页，共95页，编辑于2022年，星期五狗颈静脉取血方法狗颈静脉取血方法第71页，共95页，编辑于2022年，星期五（6 6 6 6）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前）心脏采血：将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前区皮肤脱毛，常规消毒。于左
43、侧第区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第区皮肤脱毛，常规消毒。于左侧第3 3 3 3、4 4 4 4肋间心尖博动最强肋间心尖博动最强肋间心尖博动最强肋间心尖博动最强处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进处将针头垂直刺入心脏，由于心脏的搏动，血液可自动进入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左入注射器。如无血液流出，拔出针头后重新穿刺，不能左右来回斜穿，
44、以免造成气胸而导致动物很快死亡。经右来回斜穿，以免造成气胸而导致动物很快死亡。经右来回斜穿，以免造成气胸而导致动物很快死亡。经右来回斜穿，以免造成气胸而导致动物很快死亡。经6 6 6 67 7 7 7天后可重复穿刺采血。天后可重复穿刺采血。天后可重复穿刺采血。天后可重复穿刺采血。第72页，共95页，编辑于2022年，星期五（二）尿液采集（二）尿液采集（二）尿液采集（二）尿液采集 1.1.大、小鼠：代谢笼大、小鼠：代谢笼大、小鼠：代谢笼大、小鼠：代谢笼 2.2.兔、犬：导尿管兔、犬：导尿管兔、犬：导尿管兔、犬：导尿管（三）脑脊液采集（三）脑脊液采集（四）胸腔积液（四）胸腔积液（五）腹腔液（五）腹
45、腔液（五）腹腔液（五）腹腔液（六）其他：胃液、胆汁、关节液（六）其他：胃液、胆汁、关节液第73页，共95页，编辑于2022年，星期五消化液采集消化液采集(一一)胃液的采集胃液的采集通通通通过过过过刺刺刺刺激激激激，使使使使胃胃胃胃液液液液分分分分泌泌泌泌增增增增加加加加，再再再再用用用用插插插插胃胃胃胃管管管管的的的的办法抽取胃液。办法抽取胃液。办法抽取胃液。办法抽取胃液。(二二)胆汁的采集胆汁的采集采集胆汁需要施行手术。采集胆汁需要施行手术。(三三)胰液的采集胰液的采集胰液的采集基本同胆汁的采集。胰液的采集基本同胆汁的采集。第74页，共95页，编辑于2022年，星期五 尿液采集尿液采集 (一
46、一)代谢笼代谢笼 动动物物排排便便时时，可可通通过过笼笼子子底底部部的的大大小小便便分分离离漏漏斗斗，将尿液与粪便分开，达到采集尿液的目的。将尿液与粪便分开，达到采集尿液的目的。(二二)压迫膀胱压迫膀胱(强制排尿强制排尿)将动物固定，按压骶骨两侧的腰背部或轻将动物固定，按压骶骨两侧的腰背部或轻 轻压迫膀胱的体表部位，使其排尿。轻压迫膀胱的体表部位，使其排尿。第75页，共95页，编辑于2022年，星期五目的：防止动物挣扎，保持安静目的：防止动物挣扎，保持安静 防止意外损伤，便于操作防止意外损伤，便于操作 实验动物的实验动物的麻醉麻醉第76页，共95页，编辑于2022年，星期五全全身麻醉身麻醉1%
47、1%硫喷妥钠硫喷妥钠:15:15mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip2%2%戊巴比妥戊巴比妥:40:40mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮:40:40mg/kgmg/kg，sc/imsc/im复方氯胺酮复方氯胺酮:0.01:0.01ml/kgml/kg，sc/imsc/im第77页，共95页，编辑于2022年，星期五速眠新速眠新(846)(846)注射液注射液每每Kg体重体重:杂种犬：杂种犬：0.1-0.15ml纯种犬：纯种犬：0.040.08ml猫、兔：猫、兔：0.20.3ml羊、猴：羊、猴：0.10.15ml鼠鼠 ：0.30.8ml第78页，共95页，编辑
48、于2022年，星期五麻醉方法麻醉方法1吸入法吸入法 乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用乙醚、氯仿等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有乙醚棉球的广口瓶或干燥器内，醚棉球的广口瓶或干燥器内，4 46 6分钟后即处于麻醉分钟后即处于麻醉状态。如实验过程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不状态。如实验过程较长，可在其鼻部放棉花或纱布，不时滴加乙醚维持，也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻时滴加乙醚维持，也可用乙醚先麻醉后再用非挥发性麻醉剂维持麻醉。醉剂维持麻醉。第79页，共95页，编辑于2022年，星期五 在给药过程中，
49、如果发现动物的角膜反射消失，瞳在给药过程中，如果发现动物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可进行孔突然放大，应立即停止麻醉。如果呼吸停止，可进行人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待恢复自人工呼吸，并配以咖啡因、可拉明等苏醒剂，待恢复自主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道分泌物增主呼吸后再进行实验。因乙醚易引起上呼吸道分泌物增多，导致窒息，可先注射阿托品预防。多，导致窒息，可先注射阿托品预防。第80页，共95页，编辑于2022年，星期五2腹腔和静脉给药麻醉法腹腔和静脉给药麻醉法 非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类药非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥
50、钠等巴比妥类药非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类药非挥发性麻醉剂如戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类药物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或静脉注射麻醉。物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或静脉注射麻醉。物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或静脉注射麻醉。物及水合氯醛、氨基甲酸乙酯等，可用腹腔或静脉注射麻醉。大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；兔、犬、猴等多用静大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；兔、犬、猴等多用静大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；兔、犬、猴等多用静大鼠、小鼠、豚鼠常用腹腔给药麻醉；兔、犬、猴等多用静脉给药麻醉。此法主要用于需麻醉脉给药麻醉。此法主要用于需麻醉脉给药