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1、资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1342流式细胞术的基本原理流式的临床应用迈瑞流式介绍专家对迈瑞流式的评价专家对迈瑞流式的评价目目录录1 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1342流式细胞术的基本原理流式的临床应用迈瑞流式介绍专家对迈瑞流式的评价专家对迈瑞流式的评价目目录录2 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。流式细胞术的定义l流式细胞术是以高能量激光照射高速流动状态下经荧光标记的单细胞（生物颗粒），通过检测产生的散射光和荧光素发射荧光的强度，从而对细胞进行定性或者定量检测，实现对目的细
2、胞分析或分选的技术。3 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。传统流式检测流程图NatRevImmunol.;12(3):191200.2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。FL4FL6FL5(PE-cy7)FL3(PerCP)FL2(PE)FL1(FITC)SS488/10530/30FS488/10585/40670LP785/60491/LP550LP645LP660/20785/60740LP488/10反光镜tvFL6(APC-cy7)FL4(APC)反光镜tvtvtvtvtvtvtvFS
3、CSSCFL1FL2FL3FL5流式细胞仪工作原理模拟图 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。流式细胞仪与常用检验仪器的比较项目流式细胞仪血球仪生化分析仪免疫分析仪测试对象细胞，血清细胞(测量设置全部固定化）血清血清测试目标物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）；小分子物质（如抗原，抗体）物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）化学成分和一些小分子物质（如钾、钠、钙、酶）小分子物质（如抗原、抗体、激素）测试原理流式细胞术+抗原抗体反应流式细胞术化学比色法抗原抗体反应计量百分比或绝对计数（如%、*个/uL）；物质的量
4、或定性判定（L、UI/L、阴性、阳pmol/m性）百分比和绝对计数（如%、*个/L）物质的量（mol/L）物质的量或定性判定（L、UI/L、阴性、阳pmol/m性）宏观和微观测量宏观对象（细胞）上的微观物质（抗原、看不见、摸不到）测定宏观对象（细胞）上的宏观物质（物理、复杂度、含量，看得见、摸得到）测量微观物质（可溶性成分和一些小分子物质，看不见、摸不到）测量微观物质（小分子物质，看不见、摸不到）输出 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。生命科学领域的应用资料仅供参考,不当之处，请联系改正。flowcytometry+tumorflowcyto
5、metry+Transplantflowcytometry+Autoimmunediseasesflowcytometry+leukemiaflowcytometry总结可以预计未来流式细胞仪在临床上的应用一定会有更大的发展！8 2012 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1342流式细胞术的基本原理流式的临床应用迈瑞流式介绍专家对迈瑞流式的评价专家对迈瑞流式的评价目目录录资料仅供参考,不当之处，请联系改正。流式细胞术在临床检验中的应用淋巴细胞亚群分析HLA-B27检测白血病免疫分型和MRD 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病（CLD)淋巴瘤造血干细胞分析
6、 造血干细胞绝对计数；阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）CD55/CD59/FLAER检测血小板相关分析 血小板计数、血小板免疫表型分析细胞周期与DNA倍体分析。2010年全国三级医院检验科流式项目分布10 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。流式细胞术分析淋巴细胞亚群的原理11 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。TBNK淋巴细胞的检测及临床指导意义l诊断与鉴别诊断l疾病临床分期l治疗效果评估l指导临床用药。淋巴细胞分类百分比和绝对计数淋巴细胞分类百分比和绝对计数淋巴细胞种类特异性分子标记T淋
7、巴细胞CD3+T辅助/诱导淋巴细胞CD3+CD4+T抑制/细胞毒淋巴细胞CD3+CD8+B淋巴细胞CD3-CD19+NK淋巴细胞CD3-CD16+CD56+12 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。TBNK淋巴细胞检测在临床科室中的应用l流式在风湿免疫科的应用l流式在肿瘤的应用l流式在移植中心的应用l流式在血液科的应用l流式在感染科的应用l流式在心血管内科的应用l流式在其他科室的应用l流式在健康体检的应用13 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。胃癌及其不同临床分期淋巴细胞亚群的变化14 201
8、4 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。肿瘤术后淋巴细胞亚群的变化15 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。乙型肝炎患者体内淋巴细胞亚群变化传染病信息.2011.24.206-21016 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（World J Gastroenterol.2008,14:3710-8.）乙型肝炎患者体内淋巴细胞亚群变化17 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HIV/AIDS病人的诊断与分期成
9、人及15岁以上青少年HIV/AIDS的临床分期及其分期标准临床分期CD4细胞计数（个数/mm3）HIV抗体检测HIV核酸检测主要临床表现一般持续时间期6个月12个月A期500或一过性降低或急性HIV感染综合征或无症状1周3周B期500血清阳转或无症状或PGL6个月12个月期6年7.5年A期350无症状或A组临床表现B期200349B组临床表现期200C组临床表现23年（WS 293-2008 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准）18 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。肺部疾病的鉴别诊断疾病类型疾病类型例数例数BALF淋巴细胞亚群（淋巴细胞亚群（%
10、）CD3+CD4+CD8+CD4/CD8结节病1491.85.6270.611.214.58.46.93.12IPF1694.53.9114.73.1278.47.920.20.04肺结核674.35.6142.31.9232.11.211.30.05肺部肿瘤767.510.424.35.2435.19.620.70.13（中华检验医学杂志.2000,23:214-216）19 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。利妥昔单抗治疗效果监测(Arthritis Research&Therapy 2009,11；R131)利妥昔单抗(美罗华)：针对B
11、细胞特异性抗原CD20的人-鼠嵌合单克隆抗体用于复发或耐药的CD20 阳性滤泡性淋巴瘤是首个以B细胞为靶标治疗类风湿性关节炎的药物外周血B细胞百分比显著下降而骨髓B细胞略下降20 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。移植病人免疫抑制剂治疗指导A移植前1-2天；B移植后1-2天；C移植后4-5天；D移植后6-8天；E移植后12-16天69例（50例没有排斥，19例发生排斥）CD4在移植后有一个缓慢的下降过程CD4如果升高，预示发生排斥反应，需要调整免疫抑制药的治疗方案21 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，
12、请联系改正。（Neuroimmunomodulation.2014,214:206-12.）老年人身体状况评估22 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（Clinical and Applied Immunology Reviews.2002,2:129139.）慢性疲劳综合征与淋巴亚群分析23 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。（MechanismsofAgeingandDe6elopment.1998,100:121132.）体育锻炼对淋巴亚群的影响24 2014 Mindray Conf
13、idential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。临床需要监测免疫功能的常见疾病疾病类别内容原发性免疫缺陷B细胞免疫缺陷、T细胞免疫缺陷、联合免疫缺陷继发性免疫缺陷感染（HIV、CMV）免疫抑制剂的使用肿瘤代谢性疾病、营养不良、衰老自身免疫病SLE、RA血液肿瘤白血病/淋巴瘤其他手术（KubyImmunology,7th,2013）25 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。TBNK淋巴细胞亚群检测CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APCCD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC2
14、6 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测与脊柱关节病l脊柱关节病（Spondyloarthritis,SpA）疾病疾病HLA-B27阳性率阳性率(%)强直性脊椎炎90Reiters综合症7090银屑病性关节炎5060急性前葡萄膜炎4050溃疡性结肠炎伴关节病510正常人群2727 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。强直性脊柱炎强直性脊柱炎（强直性脊柱炎（AS）定义：）定义：一种慢性、进行性和炎性疾病，也是血清阴性脊柱关节病（SpA）中最具代表性的疾病。主要累计骶髂关节、脊柱、
15、脊柱软组织及四肢关节，表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化，椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生，严重者可失去劳动能力。实验室检查：实验室检查：CRP升高血沉加快HLA-B27阳性类风湿因子阴性28 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测与AS辅助诊断l1984年修订的纽约标准；l1991年欧洲脊柱关节病研究组（ESSG）标准；l2009年国际脊柱关节病评估工作组（ASAS）SpA诊断标准标准增加HLA-B27作为重要的诊断指标RudwaleitM.CurrOpinRheumatol.2010,22:375-380）29 2
16、014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测在AS中的诊断价值临床意义：临床意义：1.辅助疾病早期确诊辅助疾病早期确诊,早期治疗早期治疗;2.鉴别诊断症状相似的疾病鉴别诊断症状相似的疾病;3.对高危人群进行预测对高危人群进行预测;HLA-B27+HLA-B27+的ASHLA-B27-的AS约5-10%的AS患者为HLA-B27-HLA-B27阳性率在我国为27%，AS的患病率为0.1%，因此大部分HLA-B27+并不患AS AS患者中HLA-B27+达9095%30 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之
17、处，请联系改正。不同HLA-B27检测方法比较方法检测手段优点缺点MLCT显微镜人工观察经济，无需昂贵的设备 操作步骤繁琐、费时，且易受血清、补体、单抗的品质以及操作者主观因素的影响，常出现误判漏判。灵敏度、特异性和重复性均较差。目前，仅少数实验室使用。ELISA酶标仪测定吸光度敏感性较高，设备简单，可进行高通量检测操作步骤较多，洗涤步骤复杂、要求严格，易污染导致假阳性，重复性一般。PCRDNA扩增后，电泳紫外分析敏感性、特异性高实验室常用方法，耗时长，需要提取DNA、PCR扩增后还需要电泳分析；容易污染，假阳性率高：空气中DNA气溶胶极易污染扩增产物，对环境要求高。FCM计算机数据分析操作步
18、骤简单、快捷，敏感性和特异性高 实验室常用方法，需配备流式细胞仪；注意抗原/抗体交叉反应。31 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测的敏感性和特异性（RudwaleitM,SieperJ.NatRevRheumatol.2012,8:262-268）与其他指标相比，HLA-B27在SpA鉴别和诊断上具更高的敏感性、特异性ParameterSensitivity%SpecificityInflammatory back pain38-9576-100Heel pain(enthesitis)16-5289-96Periphera
19、l arthritis26-6291-100Dactylitis12-2796-99Anterior uveitis10-2297-100Psoriasis1-1796IBD2-799Positive family history for AS,reactive arthritis,IBD,psoriasis,anterior uveitis7-3693-100Response to NSAIDs64-7775-85Elevated acute phase reactants(CRP)38-6967-100HLA-B2783-9691-96MRI of sacroiliac joints54-
20、9383-10032 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测配套试剂健康人（左）和强直性脊柱炎患者（右）的HLA-B27的检测结果（上：同型对照，下：测试样本）FITC-HLA-B27/PE-HLA-B7双色双色33 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1342流式细胞术的基本原理流式的临床应用迈瑞流式介绍专家对迈瑞流式的评价专家对迈瑞流式的评价目目录录34 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。迈瑞流式细胞仪及配套试剂BriCyt
21、e E6流式细胞仪及配套试剂流式细胞仪及配套试剂35 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。人性化设计降低临床操作难度l临床常规项目全自动软件l双向LIS连接l全中文操作界面36 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。智能化自动设计自动分析软件资料仅供参考,不当之处，请联系改正。智能化自动检测设计l自动调节-准确、可靠临床软件TBNK淋巴细胞分析HLA-B27检测电压补偿质控38 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。自动电压调节39 2014 Min
22、dray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。自动补偿调节8.0040 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。单平台绝对计数无需内标微球l内置高精度流量传感器，精确测定样本流体积，直接计算绝对计数；l采用陶瓷泵负压吸样形成有效“双闭环”，稳定控制样本流；41 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。智能温度控制 15到32无需调整光路全封闭防尘设计简洁稳定-光学系统资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1275mm试管1275mm试管1.5mL、2mL微量离心管方便快捷-多种进样
23、方式43 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。机型机型BriCyteE6FC500CantoII外形尺寸*(mm，宽高深)500500550610978889910630610重量*(Kg)5585146自动进样器重量(Kg)15-22气源不需要需要需要稳压电源不需要需要需要简洁稳定资料仅供参考,不当之处，请联系改正。仪器性能：高分辨率BriCyte E6 检测305A八峰粒子PE50 MESF BD FACSCanto II检测305A八峰粒子PE50 MESF45 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请
24、联系改正。淋巴细胞亚群分析临床评估北京协和医院北京协和医院北医三院北医三院四川省人民医院四川省人民医院临床评估病人；42例对照仪器：BCIFC500临床评估病人；30例对照仪器：BDFACSCantoII临床评估病人；34例对照仪器：BCIFC50046 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。HLA-B27检测临床评估试验仪器试验仪器对照仪器对照仪器合计合计阴性阴性阳性阳性阴性阴性23023阳性阳性077小计小计23730结果结果判读标准判读标准结论结论阳性符合率阳性符合率100.00%95%Pass阴性符合率阴性符合率100.00%95%Pas
25、s总体符合率总体符合率100.00%95%PassKappa10.8Pass试验仪器试验仪器对照仪器对照仪器合计合计阴性阴性阳性阳性阴性阴性16016阳性阳性01717小计小计161733结果结果判读标准判读标准结论结论阳性符合率阳性符合率100.00%95%Pass阴性符合率阴性符合率100.00%95%Pass总体符合率总体符合率100.00%95%PassKappa10.8Pass北医三院四川省人民医院临床评估病人：30例对照仪器：BD FACSCanto II临床评估病人；33例对照仪器：BCI FC50047 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，
26、请联系改正。项目BriCyteE6传统流式细胞仪软件界面全中文操作软件，模块化设计，可见即所得，两小时掌握仪器操作英文界面，菜单式设计，需要长时间熟悉菜单功能位置仪器开关机1.开机（10分钟以内）；2.关机（7分钟以内）1.开机（15分钟）；2.关机（至少15分钟）；仪器质控1.无2.无3.无3.质控结果自动输入到LIS中1.手动调节电压2.手动设门3.手动调节阈值3.质控结果手工输入到LIS中LIS连接1.自动获取病人信息2.自动传输实验数据1.手工输入病人信息2.人工转移数据实现单向连接进样系统灵活进样系统，负压吸样兼容多种上样管，珍贵标本直接上机检测单一进样模式，正压吸样只支持标准流式管
27、绝对计数内置高精度流量传感器，无需内标微球直接计算绝对计数必需额外内标微球间接换算绝对计数仪器关机1.将清洗液和纯水放入指定位置，仪器自动完成关机过程2.无1.将清洗液和纯水放入指定位置，仪器进行清洗2.再进行真空管路清洗后关机常规检测配套试剂支持全自动软件，一键获得结果1.无全自动软件支持；2.有全自动软件支持，但需人工参与数据分析；48 2014 Mindray Confidential资料仅供参考,不当之处，请联系改正。1342流式细胞术的基本原理流式的临床应用迈瑞流式介绍专家对迈瑞流式的评价专家对迈瑞流式的评价目目录录49 2014 Mindray Confidential资料仅供参考
28、,不当之处，请联系改正。-易学医用易学医用易学医用易学医用-自自自自动动化程度高化程度高化程度高化程度高-适用适用适用适用临临床床床床检验检验科使用科使用科使用科使用-半天熟悉流式半天熟悉流式半天熟悉流式半天熟悉流式软软件件件件-体体体体积积小，噪音小小，噪音小小，噪音小小，噪音小-绝对计绝对计数精度高数精度高数精度高数精度高-性能参数可媲美国外品牌性能参数可媲美国外品牌性能参数可媲美国外品牌性能参数可媲美国外品牌-价格价格价格价格优势优势明明明明显显-临临床服床服床服床服务务好好好好-激光器温控范激光器温控范激光器温控范激光器温控范围宽围宽-体体体体积积小，运行安静小，运行安静小，运行安静小
29、，运行安静-临临床床床床软软件非常件非常件非常件非常实实用用用用沈立松沈立松沈立松沈立松崔巍崔巍崔巍崔巍张剑张剑波波波波王小林王小林王小林王小林专家精彩点评专家精彩点评-北京协和医院检验科副主任北京协和医院检验科副主任-美国临床化学委员会（美国临床化学委员会（AACCAACC）会员）会员-中华医学会检验分会委员兼副秘书长中华医学会检验分会委员兼副秘书长上海新华医院检验科主任上海新华医院检验科主任-中华医学会检验分会委员中华医学会检验分会委员-上海医学会检验医学分会副主委上海医学会检验医学分会副主委-北医三院检验科副主任北医三院检验科副主任四川省人民医院四川省人民医院中心实验室主任中心实验室主任资料仅供参考,不当之处，请联系改正。THANKS！51 2013 Mindray Confidential