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1、实验十六实验十六 显微摄影术显微摄影术一、实验原理一、实验原理:光源入射光束,经聚光镜有效聚焦到标本上,由标本表面的光入射到物镜上,标本经物镜放大,其光线再经照相目镜聚焦在照相暗盒的胶片上,光电转换器将标本成象的光线转换成电信号,自动曝光控制器根据信号的强弱、胶卷尺寸的大小、胶卷感光速度、胶卷倒易率失效补偿、色温大小等数据由机内电子计算机进行计算、修正,准确算出最佳曝光时间.经曝光后,就可以在胶片上获得与标本相反的实象,即潜像.二、试剂与器材 显微镜、摄影装置、胶卷。显微摄影装置显微摄影装置三.实验程序(一）显微摄影一）显微摄影 11把把“MODE/EXPOSURE TIME”MODE/EXP
2、OSURE TIME”曝光方式选择曝光方式选择器的旋钮对准器的旋钮对准“AUTOAUTO位以进行自动曝光。位以进行自动曝光。2 2按下按下“FORMAT”FORMAT”胶卷规格选择器上胶卷规格选择器上3 3个按钮中个按钮中标明标明“35”“35”的按键。的按键。3 3 打开照相机的后盖，装入胶片。把胶片的头端放人收片打开照相机的后盖，装入胶片。把胶片的头端放人收片轴的片槽时，不要使它超出片槽的另一端。轴的片槽时，不要使它超出片槽的另一端。4 4 按自动曝光控制器的按自动曝光控制器的“WINDING”WINDING”卷片钮卷片钮2-32-3次，进行次，进行空卷空拍。在卷胶片时，要观察胶空卷空拍。
3、在卷胶片时，要观察胶 片的计数器是否转动。如片的计数器是否转动。如果没有转动，说明胶片的齿孔与片轴的齿牙没有衔接好，需要果没有转动，说明胶片的齿孔与片轴的齿牙没有衔接好，需要再一次打开再一次打开 照相机后盖，使其紧密地衔接好。照相机后盖，使其紧密地衔接好。5 5 选用所使用胶片的感光度。目前国内所用的胶片多选用所使用胶片的感光度。目前国内所用的胶片多为为ASA100ASA100。6 6 选定所使用胶片的倒易律失效的补偿指数。然后对选定所使用胶片的倒易律失效的补偿指数。然后对准刻度盘。一般情况下，使用黑白胶卷对准准刻度盘。一般情况下，使用黑白胶卷对准44，彩色，彩色胶卷对准胶卷对准22。7 7
4、测量色温，彩色照相时，把照明的色温调整到胶片测量色温，彩色照相时，把照明的色温调整到胶片规定的色温上。测量色温应在标本或载玻片的空白处进规定的色温上。测量色温应在标本或载玻片的空白处进行，而不能在有标本的区域进行。行，而不能在有标本的区域进行。8.8.黑白照相时，把照明光源的电压调在黑白照相时，把照明光源的电压调在6 6V V以上。使用以上。使用绿色滤色镜，或在照明度亮的时候使用中灰滤色镜绿色滤色镜，或在照明度亮的时候使用中灰滤色镜。9 9 对焦与调节孔径光阑，将标本对焦并调节聚光镜的对焦与调节孔径光阑，将标本对焦并调节聚光镜的孔径光阑，以取得合适的反差。孔径光阑一般收缩到物孔径光阑，以取得合
5、适的反差。孔径光阑一般收缩到物镜数值孔径的镜数值孔径的60%60%到到80%80%。10 10 根据标本的分布密度情况，把根据标本的分布密度情况，把“EXPOSURE ADJ”EXPOSURE ADJ”曝光补偿刻度盘调整到适当的位置上曝光补偿刻度盘调整到适当的位置上“1”“1”。11 11 对焦转动调焦目镜上的屈光度调节环，使取景框中的对焦转动调焦目镜上的屈光度调节环，使取景框中的双十字线达到最清晰的程度。在使用低倍率物镜时，需要双十字线达到最清晰的程度。在使用低倍率物镜时，需要使用对焦望远镜使用对焦望远镜(FT-36)FT-36)。12 12 按下曝光按钮按下曝光按钮“EXPOSE”EXPO
6、SE”，快门开启，胶片感光快门开启，胶片感光;曝光同时，工作信号灯曝光同时，工作信号灯“Work”Work”灯亮灯亮;快门闭合，曝光结快门闭合，曝光结束，灯熄灭，胶卷已自动进片一帧。束，灯熄灭，胶卷已自动进片一帧。1212、根根据据实实际际需需要要重重复复拍拍摄摄,直直到到整整个个胶胶卷卷拍拍摄摄完完时时,胶胶片片的结束信号灯的结束信号灯“FILM END”FILM END”亮亮.1313、按操作规程取下胶卷、按操作规程取下胶卷 四、注意事项 1、装入胶片后，要注意按自动曝光控制器的 “WINDING”卷片钮。2、注意选定所使用胶片的倒易律失效的补偿指数。3、注意调好“双十字”线。五、思考题 1、显微镜摄影时应掌握哪些关键步骤？