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1、实验三酶的基本性质第1页,共13页,编辑于2022年,星期五n酶的定义:酶的定义:是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶催物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下进行的。化下进行的。n酶的特点:酶的特点:酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特性酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特性 。n温度、温度、pHpH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。第2页,共13页,编辑于2022年,星期五一、目的一、目的n通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性,了解温度对酶通过检验不同温度下
2、唾液淀粉酶的活性,了解温度对酶活性的影响,明确最适温度的概念;活性的影响,明确最适温度的概念;n了解了解pHpH值对酶活力的影响,学习测定最适值对酶活力的影响,学习测定最适pHpH值的方法;值的方法;n了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响,学习检定激了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响,学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。第3页,共13页,编辑于2022年,星期五二、原理二、原理n酶的催化作用受温度的影响很大酶的催化作用受温度的影响很大n提提高高温温度度可可以以增增加加酶酶促促反反应应的的速速度度。通通常常温温度度每每升升高高1010摄摄氏氏度度,反反应应
3、速速度度加加快快一一倍倍左左右右,最最后后反反应应速速度度达达到到最最大大值。值。n酶酶是是一一种种蛋蛋白白质质,温温度度过过高高可可引引起起蛋蛋白白质质变变性性,导导致致酶酶的的失失活活。因因此此,反反应应速速度度达达到到最最大大值值以以后后,随随着着温温度度升升高高,反反应应速速度度反反而而逐逐渐渐下下降降,以至完全停止反应。以至完全停止反应。n反反应应速速度度达达到到最最大大值值时时的的温温度度称称为为某某种种酶酶作作用用的的最最适适温温度度。高高于于或或低低于最适温度时,反应速度逐渐降低。于最适温度时,反应速度逐渐降低。最适温度最适温度(一)温度对酶活性的影响(一)温度对酶活性的影响第
4、4页,共13页,编辑于2022年,星期五二、原理二、原理n酶的活性受环境酶的活性受环境pHpH的影响极为显著。的影响极为显著。n通常各种酶只有在一定的通常各种酶只有在一定的pHpH范围内才表现它的活性。范围内才表现它的活性。一种酶表现其活一种酶表现其活性最高时的性最高时的pHpH值,称为该酶的最适值,称为该酶的最适pHpH。低于或高于最适低于或高于最适pHpH时,酶的时,酶的活性逐渐降低。活性逐渐降低。n不同酶的最适不同酶的最适pHpH值不同,例如,胃蛋白酶的最适值不同,例如,胃蛋白酶的最适pHpH为为1.5-2.51.5-2.5,胰,胰蛋白酶的最适蛋白酶的最适pHpH为为8 8等。等。(二)
5、(二)pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响第5页,共13页,编辑于2022年,星期五n酶的活性常受某些物质的影响。酶的活性常受某些物质的影响。n有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂;有些物质能使酶的活性增加,称为酶的激活剂;n有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。有些物质能使酶的活性降低,称为酶的抑制剂。例如,例如,氯化钠氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂,为唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜硫酸铜为其抑制剂。为其抑制剂。n很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特异性。异性。n激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂和
6、抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。例如,氯化钠达到例如,氯化钠达到1/31/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。二、原理二、原理(三)酶的激活和抑制(三)酶的激活和抑制第6页,共13页,编辑于2022年,星期五二、原理二、原理 本实验分别在不同温度、不同本实验分别在不同温度、不同pHpH值及不同物质作用的条件下值及不同物质作用的条件下使淀粉酶作用于其底物使淀粉酶作用于其底物淀粉,并用碘液检查酶促淀粉水解程淀粉,并用碘液检查酶促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。度来
7、说明各条件与酶活力之间的关系。淀粉淀粉糊精糊精麦芽糖麦芽糖淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶大大小小中中碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液蓝色蓝色蓝紫色蓝紫色暗褐色暗褐色红色红色碘色碘色第7页,共13页,编辑于2022年,星期五三、仪器和试剂三、仪器和试剂n仪器仪器移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘n试剂试剂1%淀粉溶液(含0.3%NaCl),0.1%淀粉溶液,唾液淀粉酶液,pH7.0、8.0、5.0的磷酸缓冲液(PB),碘液,1%NaCl,1%CuSO4,蒸馏水(dH2O)第8页,共13页,编辑于2022年,星期五四、实验方法四、实验方法n(一)温度对酶活性的影响(一
8、)温度对酶活性的影响操作项目操作项目管号管号1 12 23 3唾液淀粉酶液(唾液淀粉酶液(mLmL)1 11 11 1酶液处理酶液处理5min5min003737100100pH7.0pH7.0缓冲液(缓冲液(mLmL)2 22 22 21%1%淀粉液(含淀粉液(含0.3%NaCl0.3%NaCl)()(mLmL)1 11 11 1反应反应10min10min003737100100冷却冷却3min3min流动水冷却流动水冷却碘液(滴)碘液(滴)1 11 11 1第9页,共13页,编辑于2022年,星期五四、实验方法四、实验方法n(二)(二)pHpH值对酶活性的影响值对酶活性的影响操作项目操作
9、项目管号管号1 12 23 3pH5.0pH5.0缓冲液(缓冲液(mLmL)3 3/pH7.0pH7.0缓冲液(缓冲液(mLmL)/3 3/pH8.0pH8.0缓冲液(缓冲液(mLmL)/3 31%1%淀粉液(含淀粉液(含0.3%NaCl0.3%NaCl)()(mLmL)1 11 11 1淀粉酶液(淀粉酶液(mLmL)1 11 11 1保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温2min2min后,从后,从2 2号试管中取出号试管中取出1 1滴滴溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀粉的水解程度粉的水解程度碘液(滴)
10、碘液(滴)1 11 11 1第10页,共13页,编辑于2022年,星期五四、实验方法四、实验方法n(三)酶的激活和抑制(三)酶的激活和抑制操作项目操作项目管号管号1 12 23 31%NaCl1%NaCl(mLmL)1 1/1%CuSO1%CuSO4 4(mLmL)/1 1/蒸馏水(蒸馏水(mLmL)/1 1淀粉酶液(淀粉酶液(mLmL)1 11 11 10.1%0.1%淀粉液(淀粉液(mLmL)3 33 33 3保温保温将各管混匀将各管混匀37 37 水浴中保温水浴中保温检查淀粉水解程度检查淀粉水解程度保温保温1min1min后,从后,从1 1号试管中取出号试管中取出1 1滴滴溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀溶液置于白磁盘上,用碘液检查淀粉的水解程度粉的水解程度碘液(滴)碘液(滴)2 22 22 2第11页,共13页,编辑于2022年,星期五五、结果与分析五、结果与分析n(三)酶的激活和抑制(三)酶的激活和抑制 各试管中现象,解释原因各试管中现象,解释原因n(一)温度对酶活性的影响(一)温度对酶活性的影响 各试管中现象,解释原因各试管中现象,解释原因n(二)(二)pHpH值对酶活性的影响值对酶活性的影响 各试管中现象,解释原因各试管中现象,解释原因第12页,共13页,编辑于2022年,星期五六、讨论与心得六、讨论与心得第13页,共13页,编辑于2022年,星期五