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1、实验一细胞凝集反应 和细胞膜的渗透性第1页,共15页,编辑于2022年,星期五【课前预习】1土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的原理?2在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态吗?3预测红细胞在各种溶液中的溶血速度?第2页,共15页,编辑于2022年,星期五一、实验目的一、实验目的1 了解细胞膜的表面结构;2了解细胞糖被的特点和功能,了解植物凝集素的作用3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度第3页,共15页,编辑于2022年,星期五二、实验的原理二、实验的原理1.细胞凝集反应细胞凝集反应细胞膜表面的有分支状糖外被,细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有
2、关。凝集素(lectin)是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞表面间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。第4页,共15页,编辑于2022年,星期五2.细胞膜的渗透性细胞膜的渗透性在低渗液中,红细胞很快吸水胀裂,称为溶血。在等渗液中,由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高,细胞也会吸水胀裂,由于各种物质透入细胞的速度不同,溶血的时间不同第5页,共15页,编辑于2022年,星期五三、实验用品三、实验用品1.器材:显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、
3、试管架2.材料:土豆块茎3.试剂:鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85生理盐水、2鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第6页,共15页,编辑于2022年,星期五四、实验步骤第7页,共15页,编辑于2022年,星期五(一一)细胞凝集反应细胞凝集反应1.2鸡血红细胞悬液制备新鲜鸡血加抗凝剂,生理盐水洗5次,每次2000r/min,离心5min,按红细胞压积用生理盐水配成2鸡血红细胞悬液。2.土豆凝集素制备 土
4、豆2克,加10ml PBS,浸泡2h。3.细胞凝集反应土豆凝集素1滴、2鸡血红细胞液1滴。载玻片上混匀,静置20min。4.对照PBS1滴、2鸡血红细胞液1滴。第8页,共15页,编辑于2022年,星期五(二)细胞膜的渗透性(二)细胞膜的渗透性1.低渗溶液试管一支:鸡血红细胞液1ml;蒸馏水10ml;结果溶血,溶液变透明。2.等渗溶液0.17M氯化钠、0.17M氯化铵、0.17M醋酸胺、0.17M硝酸钠、0.17M草酸铵、0.17M硫酸钠、0.17M葡萄糖、0.17M甘油、0.17M乙醇、0.17M丙酮第9页,共15页,编辑于2022年,星期五未溶血溶血第10页,共15页,编辑于2022年,星期五【实验结果】1土豆凝集素能使鸡红细胞凝集,PBS对照液中红细胞分散均匀第11页,共15页,编辑于2022年,星期五未凝血第12页,共15页,编辑于2022年,星期五凝血第13页,共15页,编辑于2022年,星期五2细胞膜渗透性实验结果比较和分析第14页,共15页,编辑于2022年,星期五【实验报告】1简图表示凝集素使血细胞凝集原理2怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度?物质进入细胞的快慢有什么规律?第15页,共15页,编辑于2022年,星期五