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1、实验影响酶促反应的因素第1页，共10页，编辑于2022年，星期五实验原理实验原理 酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在酶的最适温度在 37 37左右。如温度过高，反应左右。如温度过高，反应速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白因速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白因高温变性失活之故。高温变性失活之故。酶活性与溶液酶活性与溶液pHpH有关，有关，pHpH既影响酶蛋白本
2、身构象，既影响酶蛋白本身构象，也影响底物解离程度，从而改变酶与底物结合和也影响底物解离程度，从而改变酶与底物结合和催化作用。故每种酶都有其最适催化作用。故每种酶都有其最适pHpH的作用环境。的作用环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最适唾液淀粉酶的最适pHpH为为6.86.8。氯离子对该酶活性有。氯离子对该酶活性有激动作用，铜离子则有抑制作用。激动作用，铜离子则有抑制作用。第2页，共10页，编辑于2022年，星期五 本实验利用碘与淀粉及其水解产物本实验利用碘与淀粉及其水解产物(大分子糊精、大分子糊精、麦芽糖麦芽糖)的颜色反应
3、，来比较唾液淀粉酶在不同条件的颜色反应，来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的速度，从而判断温度、下催化淀粉水解的速度，从而判断温度、pHpH、激动、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。剂和抑制剂对酶活性的影响。淀粉淀粉糊精糊精麦芽糖麦芽糖与与碘碘呈呈 蓝色蓝色 与与碘碘呈呈 紫色紫色至至红色红色 与与碘碘 不呈色不呈色第3页，共10页，编辑于2022年，星期五试剂试剂1 11 1淀粉溶液淀粉溶液2 2新鲜配制的稀释唾液新鲜配制的稀释唾液3 3不同不同pHpH缓冲液缓冲液 (1)pH6.8 (1)pH6.8缓冲液缓冲液 (2)pH5.0 (2)pH5.0缓冲液缓冲液 (3)pH8.0 (3)pH
4、8.0缓冲液缓冲液4 40.90.9NaCINaCI溶液溶液(即生理盐水即生理盐水)5 51 1CuSOCuSO4 4溶液溶液6 6碘液碘液第4页，共10页，编辑于2022年，星期五操作操作1 1温度温度对酶活性的影响对酶活性的影响 (1)(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂取试管三支，编号，按下表加入试剂 (2)(2)混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴、恒混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴、恒温水浴温水浴(37)(37)中预温中预温5 5分钟。再向各管加入稀唾液分钟。再向各管加入稀唾液5 5滴，继续在原水浴中放置滴，继续在原水浴中放置1010分钟。分钟。(3)(3)取出各管，各滴加碘液
5、取出各管，各滴加碘液1 1滴滴(切忌摇动切忌摇动)，观察，观察颜色并记录。颜色并记录。管号管号试剂（滴）试剂（滴）1 12 23 3pH6.8pH6.8缓冲液缓冲液1515151515151 1淀粉溶液淀粉溶液5 55 55 5第5页，共10页，编辑于2022年，星期五2 2pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响 (1)(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂取试管三支，编号，按下表加入试剂(2)(2)将各管摇匀，同时置将各管摇匀，同时置3737水浴中恒温水浴中恒温1010分钟分钟(3)(3)取出各管，各滴加碘液取出各管，各滴加碘液1 1滴滴(切忌摇动切忌摇动)，观察颜，观察颜色并记录。色并记录。
6、管号管号试剂试剂(滴滴)1 12 23 3pH5.0pH5.0缓冲液缓冲液1515pH6.8pH6.8缓冲液缓冲液1515pH8.0pH8.0缓冲液缓冲液15151 1淀粉溶液淀粉溶液5 55 55 5稀唾液稀唾液5 55 55 5第6页，共10页，编辑于2022年，星期五3 3激动剂、抑制剂激动剂、抑制剂对酶活性的影响对酶活性的影响(1)(1)取试管三支，编号，按下表加入试剂取试管三支，编号，按下表加入试剂(2)(2)将各管摇匀，同时置将各管摇匀，同时置3737水浴中恒温水浴中恒温1010分钟分钟(3)(3)取出各管，各滴加碘液取出各管，各滴加碘液l l滴滴(切忌摇动切忌摇动)，观察颜，观察
7、颜色并记录。色并记录。管管 号号试剂试剂(滴滴)123蒸馏水蒸馏水100.9 NaCl溶液溶液101CuSO4溶液溶液10pH6.8缓冲液缓冲液1515151淀粉溶液淀粉溶液 555稀唾液稀唾液 555第7页，共10页，编辑于2022年，星期五实验报告实验报告1 1结合本次实验，说说影响酶作用的几个因素结合本次实验，说说影响酶作用的几个因素2 2根据实验结果，正确填写下列各表，并作简单根据实验结果，正确填写下列各表，并作简单分析分析(1)(1)温度温度影响影响试管号试管号实验条件实验条件加碘液后加碘液后 颜色颜色结果分析结果分析1 1冰冰 浴浴2 2沸水浴沸水浴3 3恒温水浴恒温水浴第8页，共
8、10页，编辑于2022年，星期五(2)(2)pHpH影响影响(3)(3)激动剂激动剂与与抑制剂抑制剂影响影响试管号试管号 实验条件实验条件 加碘液后加碘液后 颜色颜色结果分析结果分析1 1pH5.0pH5.02 2pH6.8pH6.83 3pH8.0pH8.0试管号试管号 实验条件实验条件加碘液后加碘液后 颜色颜色结果分析结果分析1 1蒸馏蒸馏 水水 2 20.90.9 NaCLNaCL溶溶液液3 3l lCuS04CuS04溶液溶液第9页，共10页，编辑于2022年，星期五思考題思考題 加入碘液观察结果以前，切忌摇动。你不妨试加入碘液观察结果以前，切忌摇动。你不妨试试在观察后把不起蓝色反应的试管摇动几下，或试在观察后把不起蓝色反应的试管摇动几下，或再滴加碘液，很可能会变为蓝色。这是什么缘故再滴加碘液，很可能会变为蓝色。这是什么缘故?第10页，共10页，编辑于2022年，星期五