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1、第二节第二节 红细胞检查红细胞检查主要内容一一.红细胞计数红细胞计数二二.血红蛋白测定血红蛋白测定三、血细胞比容测定三、血细胞比容测定四、红细胞平均值的计算四、红细胞平均值的计算五五.红细胞形态检查红细胞形态检查六、网织红细胞计数六、网织红细胞计数七、嗜碱性点彩红细胞计数七、嗜碱性点彩红细胞计数八、红细胞沉降率侧定八、红细胞沉降率侧定九、红斑狼疮细胞检查九、红斑狼疮细胞检查一一.红细胞计数红细胞计数（red blood cellred blood cell）【概述概述】【检测原理检测原理】【方法学评价方法学评价】【参考值参考值】【质量控制质量控制】【临床意义临床意义】返回返回 【概述概述】红细
2、胞在正常情况下几乎占血容量的红细胞在正常情况下几乎占血容量的1/2，平均寿命是，平均寿命是120天，每天约有天，每天约有8%的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏，的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏，血红蛋白降解，分解为铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋血红蛋白降解，分解为铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋白的重新合成。白的重新合成。红细胞外形红细胞外形：双凹圆盘形，平均直径：双凹圆盘形，平均直径7.2m，厚约，厚约2m，无核无核主要成分（除水外）主要成分（除水外）：主要是血红蛋白，主要是：主要是血红蛋白，主要是O2和和 CO2，并协同维持酸碱平衡。，并协同维持酸碱平衡。返回返回【检测原理检测原理】红细胞计数
3、：红细胞计数：即测定单位体积血液中即测定单位体积血液中RBC的数量的数量。有显微镜法和仪器法。有显微镜法和仪器法。1、红细胞显微镜计数法原理：、红细胞显微镜计数法原理：用等渗的稀释液将血用等渗的稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定液稀释一定倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定范围的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细范围的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数胞数 红细胞稀释液红细胞稀释液 Hayem液：液：NaCl：调节渗透压调节渗透压 Na2SO4：提高比重防止细胞粘连：提高比重防止细胞粘连 HgCl2：防腐防腐 缺点：不适宜高球蛋白血症患者。缺点：不
4、适宜高球蛋白血症患者。枸橼酸钠稀释液：枸橼酸钠稀释液：普通生理盐水或加普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水：甲醛的生理盐水：2、血细胞分析仪法：、血细胞分析仪法：电阻抗和（或）光散射原理电阻抗和（或）光散射原理返回返回【方法学评价方法学评价】1、手工显微镜法：、手工显微镜法：是传统的红细胞计数法，不需要特殊的设备，但操作复杂、是传统的红细胞计数法，不需要特殊的设备，但操作复杂、费时，现虽不常用，但仍作为：费时，现虽不常用，但仍作为：血液分析仪的校正血液分析仪的校正。与白细胞减少或血小板严重减少时的对照核实与白细胞减少或血小板严重减少时的对照核实。血小板受小红细胞干扰时的校正血小板受小红细胞干扰时
5、的校正2、血细胞分析仪法：、血细胞分析仪法：仪器法已成为目前细胞计数的主要方法仪器法已成为目前细胞计数的主要方法,仪器法比手工法仪器法比手工法更精确更精确,且操作简便、快速，且操作简便、快速，已广泛应用。已广泛应用。返回返回【参考值参考值】成年男性：成年男性：(4.05.5)1012/L 成年女性：成年女性：(3.55.0)1012/L 初生儿：初生儿：(6.07.0)1012/L返回返回【质量控制质量控制】1计数误差：同白细胞计数计数误差：同白细胞计数2白细胞的影响：当白细胞的影响：当WBC100 109/L，RBC计数应校正。计数应校正。方法以有两种：方法以有两种：（1）可直接将病人红细胞
6、数减去白细胞数。）可直接将病人红细胞数减去白细胞数。（2）直接在高倍镜下区别红白细胞。）直接在高倍镜下区别红白细胞。返回返回【临床意义临床意义】1 1生理性变化生理性变化2 2病理性变化病理性变化（1）病理性增多）病理性增多（2）病理性减少）病理性减少返回返回1 1、生理性变化、生理性变化年龄与性别差异年龄与性别差异:精神因素精神因素:剧烈体力运动和体力劳动剧烈体力运动和体力劳动:气压降低气压降低:妊娠中后期妊娠中后期:血血红红蛋蛋白白红红细细胞胞计计数数1201301405.04.84.64.44.2150 10 20 30 40 50 60返回返回（1 1）病理性增多）病理性增多相对性增多
7、：相对性增多：暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。绝对性增多：绝对性增多：包括继发性增多的组织缺氧包括继发性增多的组织缺氧EPO代代偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绀性先天性偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绀性先天性心脏病、异常血红蛋白病等；心脏病、异常血红蛋白病等；EPO非代偿性增高非代偿性增高如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多癌、子宫肌瘤、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多囊肾和肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、囊肾和
8、肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。良性家族性红细胞增多症等。返回返回（2）病理性减少）病理性减少1 1）红细胞生成减少）红细胞生成减少 骨髓功能衰竭骨髓功能衰竭 造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血2 2）红细胞破坏过多）红细胞破坏过多 红细胞内在缺陷如膜缺陷红细胞内在缺陷如膜缺陷 红细胞酶缺陷红细胞酶缺陷 血红蛋白异常血红蛋白异常 不稳定不稳定Hb和红细胞外在异常等和红细胞外在异常等3 3）红细胞丢失）红细胞丢失 急性、慢性失血性贫血急性、慢性失血性贫血返回返回二、血红蛋白测定二、血红蛋白测定【概述概述】【检测原理检测原理】【方法学评
9、价方法学评价】【参考值参考值】【质量控制质量控制】【红细胞计数和血红蛋白测定的红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义临床意义】返回返回【概述概述】1.1.化学成分：化学成分：珠蛋白（含两条珠蛋白（含两条 链和两条非链和两条非 链）链）+亚铁血亚铁血红素（红素（Fe+2+2+原卟啉原卟啉）HbFe2+O2 称氧合血红蛋白（称氧合血红蛋白（Hb O2）。）。HbFe2+CO 碳氧血红蛋白碳氧血红蛋白(HBCO)HbFe2+（99%）称还原）称还原Hb(Hbred).HbFe3+（1%）高铁血红蛋白）高铁血红蛋白(Hi)或正铁血红蛋白或正铁血红蛋白(MHB)2 2空间结构：空间结构：四聚体四聚体3 3血
10、红蛋白种类：血红蛋白种类：正常成人：正常成人：HbA（22）占占9698%HbA2（22）占占2%-3%HbF（22）占占2%以下以下 胎儿主要血红蛋白胎儿主要血红蛋白返回返回血红蛋白结构血红蛋白结构 返回返回【检测原理检测原理】血红蛋白是一种色素蛋白血红蛋白是一种色素蛋白,可以用比色法测定可以用比色法测定.血液中血红蛋白血液中血红蛋白以各种形式存在以各种形式存在,包括氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血包括氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白或其他衍生物。红蛋白或其他衍生物。1 1、氰化高铁血红蛋白（、氰化高铁血红蛋白（HiCNHiCN）测定法：）测定法：在血液中各种血红蛋白（在血液中各种
11、血红蛋白（HbS外）均可被高铁氰化钾氧化为外）均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再和高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的氰化高铁血红蛋白结合生成稳定的氰化高铁血红蛋白（HiCN）HiCN在在540有一吸收波峰有一吸收波峰,用分光光度计测定该用分光光度计测定该处的吸光度处的吸光度,再换算成每升血液中血红蛋白的浓度再换算成每升血液中血红蛋白的浓度,或制备标准或制备标准曲线计算曲线计算:HICN的最大吸收峰为的最大吸收峰为540nm,消光系数为消光系数为44 Lmmol-1 cm-1。下一页下一页计算公式计算公式可根据下式进行计算：可根据下式进行计算：Hb（g/L）=A/4464458（mg）/
12、1000251 =A367.7=Hb（g/l）A：为测定管吸光度：为测定管吸光度 44：为毫摩尔消光系数：为毫摩尔消光系数 64458/1000：为：为1mmol/LHb溶液中所含溶液中所含Hb 251：为稀释倍数：为稀释倍数下一页下一页2 2、其他方法、其他方法 1 1、十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法（、十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法（SLSSLSHbHb）2 2、碱羟血红蛋白（、碱羟血红蛋白（AHD575AHD575）3 3、叠氮高铁血红蛋白（、叠氮高铁血红蛋白（HiHi）返回返回【方法学评价方法学评价】1 1、氰化高铁血红蛋白测定法（、氰化高铁血红蛋白测定法（HiCNHiCN ）
13、是国际血液血标准化委员会推荐的血红蛋白国际标准参考方是国际血液血标准化委员会推荐的血红蛋白国际标准参考方法。法。HiCNHiCN法操作简单，显色快且结果可靠，可检测除硫化血红法操作简单，显色快且结果可靠，可检测除硫化血红蛋白（蛋白（SHbSHb）外的各种血红蛋白，但强调仪器的标准化，在实际）外的各种血红蛋白，但强调仪器的标准化，在实际工作中，往往使用工作中，往往使用HiCNHiCN参考液，通过绘制标准曲线求出参考液，通过绘制标准曲线求出K K值来教值来教正结果，正结果，HiCNHiCN法在国内已经普及但并非理想的方法，其致命的法在国内已经普及但并非理想的方法，其致命的弱点是试剂氰化钾有巨毒。弱
14、点是试剂氰化钾有巨毒。2 2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SLSSLSHbHb）突出优点是试剂无毒，多用此法代替突出优点是试剂无毒，多用此法代替HiCNHiCN，但其摩尔消光系，但其摩尔消光系数还未最后测定，故其用数还未最后测定，故其用HiCNHiCN法间接出结果。破坏白细胞，不法间接出结果。破坏白细胞，不能用此稀释液做白细胞计数。能用此稀释液做白细胞计数。返回返回【参考值参考值】成年男性：成年男性：120160g/L 成年女性成年女性：110150g/L 新生儿：新生儿：170200g/L返回返回【质量控制质量控制】1 1技术误差：技术误差：稀释倍数、分光光
15、度计、比色杯稀释倍数、分光光度计、比色杯2 2HICNHICN转化液：转化液：置于棕色玻璃瓶置于棕色玻璃瓶3 3HICNHICN参考液：参考液：部级质量参考标准部级质量参考标准4.4.质控物：质控物：（1）ACD抗凝的全血抗凝的全血（2）进口的全血质控物）进口的全血质控物（3）醛化半固定的红细胞）醛化半固定的红细胞（4）溶血液）溶血液（5）冻干全血）冻干全血返回返回下一页下一页【红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义】1 1红细胞和血红蛋白增高红细胞和血红蛋白增高 标准：标准：成年男性成年男性RBC6.0 1012/L,Hb 170g/L 成年女性成年女性RBC5
16、.5 1012/L,Hb 160g/L(1)(1)生理性变化：生理性变化：年龄与性别差异年龄与性别差异:精神因素精神因素:剧烈体力运动和体力劳动剧烈体力运动和体力劳动:气压降低气压降低:妊娠中后期妊娠中后期:（2)2)病理性增多：病理性增多：相对增多相对增多：如呕吐、大面积烧伤、如呕吐、大面积烧伤、严重腹泻、大量出汗等。严重腹泻、大量出汗等。绝对增多：绝对增多：慢性心肺疾病、真性红慢性心肺疾病、真性红 细胞增多症。细胞增多症。血血红红蛋蛋白白红红细细胞胞计计数数1201301405.04.84.64.44.2150 10 20 30 40 50 602 2红细胞和血红蛋白减低红细胞和血红蛋白减
17、低生理性贫血生理性贫血:如妊娠中晚期、如妊娠中晚期、6 6个月至个月至2 2岁、老年人。岁、老年人。病理性贫血：病理性贫血：1 1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、2 2、造血原料不足：缺铁性贫血、巨幼性贫、造血原料不足：缺铁性贫血、巨幼性贫 3 3、红细胞破坏增加：、红细胞破坏增加：4 4、红细胞的丢失过多、红细胞的丢失过多贫血的分度贫血的分度 轻度贫血：成年男性轻度贫血：成年男性 120g/L120g/L，成年女性，成年女性 110g/L 110g/L 中度贫血：中度贫血：HbHb 90g/L 90g/L 重度贫血：重度贫血：HbHb 60g/L 60g
18、/L 极度贫血：极度贫血：HbHb 30g/L 30g/L 返回返回三三.血细胞比容测定血细胞比容测定【概述概述】【检测原理检测原理】【测定方法及方法学评价测定方法及方法学评价】【质量控制质量控制】【参考值参考值】【临床意义临床意义】返回返回【概述概述】红细胞比积：红细胞比积：（hematocrit,Hct,Ht,HCT或或packed cell volume,PCV）以前称为红细胞压积以前称为红细胞压积指在一定条件下经离心指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。其高低与其高低与红细胞数量及大小有关。红细胞数量及大小有关。ISC
19、H建议的缩写符号是建议的缩写符号是PCV表示。表示。HCT常用于常用于血细胞分析仪上的测定血细胞分析仪上的测定结果。结果。PCV测定的常规方测定的常规方法分为：法分为：常量法常量法（wintrobe法）法）微量法微量法（microhematocrit）返回返回【检测原理检测原理】1 1、wintrobewintrobe法和微量法：法和微量法：均属于均属于离心法离心法。将抗凝的血液（全血）置于孔径统一的温氏。将抗凝的血液（全血）置于孔径统一的温氏管或标准毛细管中，以一定转速离心一定时间后，计算管或标准毛细管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细红细胞层占全血的体积比。胞层占全血的体积比。2 2、
20、血液分析仪法：、血液分析仪法：由由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标导出红细胞平均体积和红细胞计数两项指标导出。HCT=红细红细胞计数胞计数红细胞平均体积红细胞平均体积返回返回【测定方法及方法学评价测定方法及方法学评价】（一）手工法：（一）手工法：1 1、wintrobewintrobe法：法：方法：方法：将将EDTAK2EDTAK2抗凝血灌注于抗凝血灌注于WintrobeWintrobe管，在一定条件下管，在一定条件下离心（离心（2264g2264g、minmin）得到红细胞在全血中所占体积的百分）得到红细胞在全血中所占体积的百分比，称为血细胞比容比，称为血细胞比容 。离心后血细胞分五层：。
21、离心后血细胞分五层：分别为血浆层分别为血浆层（淡黄色）、血小板层（白色乳糜）、白细胞层（灰红色）、（淡黄色）、血小板层（白色乳糜）、白细胞层（灰红色）、有核红细胞层（灰红色）、还原红细胞层（黑色）及带氧红细有核红细胞层（灰红色）、还原红细胞层（黑色）及带氧红细胞层胞层，读数，读数红细胞层红细胞层（还原红细胞层及带氧红细胞层）（还原红细胞层及带氧红细胞层）方法学评价：方法学评价：该法无法完全排除血细胞之间的残存留的血该法无法完全排除血细胞之间的残存留的血浆，因此要比真实值要高（浆，因此要比真实值要高（3 3），标本量多，耗时长，目），标本量多，耗时长，目前已被微量法代替前已被微量法代替下一页下一
22、页2 2微量法微量法方法：方法：微量法采用一次性的使用的毛细玻璃管（长：微量法采用一次性的使用的毛细玻璃管（长：75mm 内内径：径：0.81.0mm 厚厚:0.200.25mm),离心力为离心力为10000g5min方法学评价方法学评价:该法标本用该法标本用血量小血量小、简便简便、快捷快捷、血细胞间残留血浆量血细胞间残留血浆量 较温氏法低，被较温氏法低，被WHO作为首推方法。作为首推方法。下一页下一页（二）血细胞分析仪法：（二）血细胞分析仪法：1 1电阻抗微量比容法电阻抗微量比容法 原理原理:利用血浆是电的良导体利用血浆是电的良导体,而相对血细胞是电的不良导体而相对血细胞是电的不良导体的原理
23、的原理方法学评价方法学评价:自动化程度高、快速自动化程度高、快速(15s30s)、操作简便、便、操作简便、便于推广，但血样中白细胞和血小板明显增加或有异常蛋白于推广，但血样中白细胞和血小板明显增加或有异常蛋白质时会引起测量误差质时会引起测量误差。2 2血细胞分析仪法血细胞分析仪法 MCV和和RBC导出导出,由于仪器测定数万个血细胞体积产生的由于仪器测定数万个血细胞体积产生的脉冲叠加后换算而来的脉冲叠加后换算而来的,避免了血浆的残留引起的误差。避免了血浆的残留引起的误差。返回返回【质量控制质量控制】1 1、手工法：、手工法：注意避免以下因数：注意避免以下因数：抗凝剂量不准确，混匀不充分，离心抗凝
24、剂量不准确，混匀不充分，离心速度不够均会产生误差。速度不够均会产生误差。红细胞形态异常时可是血浆的残红细胞形态异常时可是血浆的残留增加留增加6%6%，红细胞增多症时，血细胞比容明显增高是血浆，红细胞增多症时，血细胞比容明显增高是血浆残留也会增高残留也会增高2 2、血液细胞分析仪法：、血液细胞分析仪法：返回返回【参考值参考值】温氏法：温氏法：男：男：0.40-0.50 女：女：0.37-0.47 微量法：微量法：男：男：0.470.04;女：女：0.420.05返回返回【临床意义临床意义】1、红细胞比积增高：、红细胞比积增高：生理性增高：高原生活、剧烈运动、新生儿生理性增高：高原生活、剧烈运动、
25、新生儿 病理性增高：原发性和继发性红细胞增多症、脱水、烧病理性增高：原发性和继发性红细胞增多症、脱水、烧伤伤2、红细胞比积减低红细胞比积减低：各种贫血，心衰，输血各种贫血，心衰，输血3、可用作真性红细胞增多症、临床输血及输液疗效观察的可用作真性红细胞增多症、临床输血及输液疗效观察的一项指标一项指标4、Hct是计算是计算MCV、MCHC的基础数据之一的基础数据之一5、Hct是影响全血粘度的决定性因素之一是影响全血粘度的决定性因素之一返回返回四、四、红细胞红细胞平均值计算平均值计算（一）平均红细胞体积（一）平均红细胞体积(MCV)(MCV)（二）平均红细胞血红蛋白含量（二）平均红细胞血红蛋白含量(
26、MCH)(MCH)（三）平均红细胞血红蛋白浓度（三）平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)(MCHC)（四）临床意义（四）临床意义返回返回（一）平均红细胞体积（一）平均红细胞体积平均红细胞体积（平均红细胞体积（mean corpuscular volume,MCVmean corpuscular volume,MCV）：）：指红细胞群体中各个红细胞体积的平均值指红细胞群体中各个红细胞体积的平均值 单位：单位：fl（10-15 L）MCV=每升血液中红细胞比积每升血液中红细胞比积/每升血液中红细胞个数每升血液中红细胞个数 MCV=HCT/RBC参考值参考值 手工法手工法：80-92fl 1mL=10
27、12fl返回返回（二）平均红细胞血红蛋白含量（二）平均红细胞血红蛋白含量(MCH)(MCH)平均红细胞血红蛋白含量平均红细胞血红蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）指红细胞群体）指红细胞群体中各个红细胞血红蛋白含量的平均值中各个红细胞血红蛋白含量的平均值 单位：单位：pg（10-12 g）MCH=每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数每升血液中红细胞个数Hb1012/RBC/L（皮克）（皮克）参考值参考值 手工法手工法：27-31pg 1g=1012pg返回返回（三）平均红细胞血红蛋白浓度（三）平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血
28、红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度.(concentration mean corpuscular hemoglobin,MCHC)：指测：指测Hct时被压紧的时被压紧的RBC 的血红蛋白浓度（的血红蛋白浓度（g/L）MCHC=每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比积每升血液中红细胞比积 MCHC=Hb/(g/L)/Hct参考值 320-360g/L返回返回（四）临床意义（四）临床意义类型类型 MCV(fl)MCH(pg)MCHC 常见疾常见疾病病正常细胞正常细胞 8094 2632 310350 AAAA、多数、多数HAHA等等性贫血性贫血大细胞大细胞 94 32 3
29、10350 MAMA性贫血性贫血单纯小细单纯小细 80 26 310350胞性贫血胞性贫血 小细胞低小细胞低 80 26 310 IDA 色素性贫血色素性贫血返回返回五、红细胞形态检查五、红细胞形态检查（一）概述（一）概述（二）正常红细胞形态（二）正常红细胞形态（三）异常红细胞形态（三）异常红细胞形态 1 1.大小异常大小异常 2.2.形态异常形态异常 3.3.染色异常染色异常 4.4.结构异常结构异常返回返回（一）概述（一）概述 贫血不仅与红细胞数量有关，而且与红细胞形态变化贫血不仅与红细胞数量有关，而且与红细胞形态变化密切相关。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引密切相关。各种病因作用
30、于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形起相应的病理变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。返回返回（二）正常红细胞形态（二）正常红细胞形态(图图)经瑞氏染色后，血膜片中正常的红细胞大小形态较为一致，经瑞氏染色后，血膜片中正常的红细胞大小形态较为一致，直径为直径为6.77.7m,呈淡红色
31、圆盘状，中央着色较边缘淡。呈淡红色圆盘状，中央着色较边缘淡。见于健康人、再障、急性失血、白血病等。见于健康人、再障、急性失血、白血病等。返回返回1 1.大小异常（大小异常（图图）（1）小红细胞）小红细胞直径直径小于小于6m者称为小红细胞者称为小红细胞.。见于缺铁性。见于缺铁性贫血、地中海贫血，慢性炎症引起的继发性贫血、遗传性贫血、地中海贫血，慢性炎症引起的继发性贫血、遗传性球形红细胞增多症。球形红细胞增多症。（2）大红细胞）大红细胞直径直径大于大于10m。见于溶血性贫血及巨幼细胞。见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血。贫血。（3）巨红细胞）巨红细胞直径直径大于大于15m。最常见于巨幼细胞性贫血。最常见
32、于巨幼细胞性贫血。（4）红细胞大小不均）红细胞大小不均是指红细胞之间直径是指红细胞之间直径相差一倍以上相差一倍以上而而言。常见于严重的增生性贫血血涂片中。而巨幼细胞性贫言。常见于严重的增生性贫血血涂片中。而巨幼细胞性贫血时尤为明显。血时尤为明显。返回返回 2.2.形态异常（形态异常（图图）（1 1）球形红细胞）球形红细胞（2 2）椭圆形红细胞）椭圆形红细胞（3 3）靶形红细胞）靶形红细胞（4 4）镰形红细胞）镰形红细胞（5 5）口形红细胞）口形红细胞（6 6）棘细胞）棘细胞（7 7）裂片红细胞）裂片红细胞（8 8）红细胞形态不齐）红细胞形态不齐返回返回3.3.染色异常（染色异常（图图）1)低色
33、素性：低色素性：红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少，常见于缺环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少，常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病时也常见到。某些血红蛋白病时也常见到。2)高色素性：高色素性：指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细胞均染成红色，而且胞体也大。最常见于巨幼细胞性贫血。胞均染成红色，而且胞体也大。最常见于巨幼细胞性贫血。3)嗜多色性：嗜多色性：属于尚未完全成熟的红
34、细胞，故细胞较大，由属于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大，由于胞质中含人多少不等的嗜碱性物策于胞质中含人多少不等的嗜碱性物策RNA而被染成灰色蓝而被染成灰色蓝色。嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能活跃。在色。嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能活跃。在增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见。增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见。返回返回 4.4.结构异常（结构异常（图图）1)染色质小体染色质小体：位于成熟或幼红细胞的胞质中：位于成熟或幼红细胞的胞质中紫红色小体紫红色小体，呈圆，呈圆形，有形，有1-2m大小，染紫红色，可大小，染紫红色，可1至数个，已证实为核残余至数个，已证实为核残余物，
35、常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除术后。物，常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除术后。2)碱性点彩红细胞：碱性点彩红细胞：在瑞氏染色条件下，红细胞内出现大小不一、在瑞氏染色条件下，红细胞内出现大小不一、多少不等的多少不等的嗜碱紫黑色粒颗嗜碱紫黑色粒颗、正常人血涂片中很少见到，仅为、正常人血涂片中很少见到，仅为万分之一。有铅、铋、汞中毒时增多，常作为各种铅中毒的诊万分之一。有铅、铋、汞中毒时增多，常作为各种铅中毒的诊断的筛选指标。断的筛选指标。返回返回3)3)卡波环：卡波环：在嗜多色性或碱性点彩红细胞的在嗜多色性或碱性点彩红细胞的胞质中出现的胞质中出现的紫红色细线圈状结构紫红色细线圈状
36、结构，有时绕，有时绕成成8 8字形。现认为可能是胞质中脂蛋白变性字形。现认为可能是胞质中脂蛋白变性所致常与染色质小体同时存在。见于巨细胞所致常与染色质小体同时存在。见于巨细胞性贫血和铅中毒患者。性贫血和铅中毒患者。4)4)有核红细胞：有核红细胞：正常成人外周血液中不能见正常成人外周血液中不能见到。到。1 1周之内婴儿的血涂片可见到少量。最周之内婴儿的血涂片可见到少量。最常见于各种溶血性贫血，急、慢性白血病及常见于各种溶血性贫血，急、慢性白血病及红白血病。红白血病。正常红细胞形态正常红细胞形态返回返回大小异常和染色异常大小异常和染色异常小红细胞小红细胞 大红细胞大红细胞 大红细胞大红细胞 巨红细
37、胞巨红细胞 返回返回形态异常形态异常下一页下一页形态异常形态异常下一页下一页异常红细胞（泪滴状）异常红细胞（泪滴状）泪滴状泪滴状红细胞红细胞下一页下一页5、镰形红细胞、镰形红细胞返回返回染色和结构异常染色和结构异常染色质小染色质小体体有核红细有核红细胞胞 染色染色质小体质小体嗜碱性点嗜碱性点彩红细胞彩红细胞卡波环卡波环下一页下一页嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞下一页下一页14、豪、豪周小体周小体Howell-Jolly body返回返回主要内容主要内容 一一.网织红细胞计数网织红细胞计数 二二.血细胞比容测定血细胞比容测定 三三.红细胞红细胞平均值计算平均值计
38、算 四四.红细胞平均直径和直径曲线测定（了解）红细胞平均直径和直径曲线测定（了解）五五.嗜碱性点彩红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数 六六.嗜酸性粒细胞直接计数嗜酸性粒细胞直接计数 七七.红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定 八八.红斑狼疮细胞检查红斑狼疮细胞检查下一页下一页返回返回六、网织红细胞计数六、网织红细胞计数【概述概述】【检测原理检测原理】【方法学评价方法学评价】【质量控制质量控制】【参考值参考值】【临床意义临床意义】计算练习计算练习返回返回【概述概述】网织红细胞（网织红细胞（reticulocyte,RET）：）：是介于晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞之间的过渡型是介于晚幼红细胞脱核后到完
39、全成熟红细胞之间的过渡型的尚未完全成熟的红细胞。的尚未完全成熟的红细胞。其胞浆内还残存多少不等的其胞浆内还残存多少不等的嗜碱性物质嗜碱性物质（RNA），经灿烂），经灿烂甲酚蓝、新亚甲蓝等活体染色法染色，嗜碱物质凝成颗粒，甲酚蓝、新亚甲蓝等活体染色法染色，嗜碱物质凝成颗粒，其颗粒又联缀成线，而构成浅蓝或深蓝的网织状结构，称其颗粒又联缀成线，而构成浅蓝或深蓝的网织状结构，称网织红细胞网织红细胞。分型分型：O型（花冠型）、型（花冠型）、型（丝球型）、型（丝球型）、型（网型（网 型）、型）、型型(破网型破网型)型（点粒型），型（点粒型），型占外周血网织红细胞的型占外周血网织红细胞的60%以上以上 O型
40、为有核红细胞。型为有核红细胞。（演变图演变图）（图图）返回返回网织红细胞演变模型图网织红细胞演变模型图返回返回网织红细胞网织红细胞网型破网型点粒型返回返回【检测原理检测原理】1 1、普通光学显微镜法：、普通光学显微镜法：用活体染色（新亚甲或黄焦油蓝等染料）方法显示红细胞用活体染色（新亚甲或黄焦油蓝等染料）方法显示红细胞内网状结构，并在显微镜下计数内网状结构，并在显微镜下计数10001000个红细胞中所占的网个红细胞中所占的网织红细胞数，织红细胞数，以百分比或分数表示以百分比或分数表示。2 2、网织细胞计数仪法：、网织细胞计数仪法：用用荧光染料使含荧光染料使含RNARNA的网织红细胞着色的网织红
41、细胞着色，用流式细胞术，用流式细胞术（FCMFCM）计算出网织红细胞的百分比。）计算出网织红细胞的百分比。3 3、血液分析仪法：、血液分析仪法：和网织细胞计数仪相似。和网织细胞计数仪相似。返回返回【方法学评价方法学评价】一、显微镜计数法：一、显微镜计数法：1.1.新亚甲蓝染色液新亚甲蓝染色液（WHO推荐使用首选方法）推荐使用首选方法）特点：染色力强、稳定。特点：染色力强、稳定。2.2.灿烂甲酚蓝染色法灿烂甲酚蓝染色法 特点：历史长、范围广，但易产生沉淀。特点：历史长、范围广，但易产生沉淀。制片方法制片方法:玻片法：玻片法：容易使混合血液中的水分蒸发，染色时间偏短，容易使混合血液中的水分蒸发，染
42、色时间偏短，因此结果偏低。因此结果偏低。试管法：试管法：容易掌握，重复性效好，必要时还可以从混合血容易掌握，重复性效好，必要时还可以从混合血液中再取标本重新涂片复查，避免再次给被检者穿刺造成不液中再取标本重新涂片复查，避免再次给被检者穿刺造成不必要的痛苦，被列为手工法网织红细胞计数的推荐方法。必要的痛苦，被列为手工法网织红细胞计数的推荐方法。使用米勒窥盘进行计数：使用米勒窥盘进行计数：规范了计算区域，减少了实验误规范了计算区域，减少了实验误差，使结果准确性有所提高。（差，使结果准确性有所提高。（图图）下一页下一页米勒窥盘返回返回网网织红细织红细胞百分数胞百分数100小方格内需要小方格内需要计计
43、数数红细红细胞数胞数（达到（达到CV=10%）所所计计数目达到相当于数目达到相当于总总的的红细红细胞胞数数1 121 0001 0009 0009 0003 355005004 5004 5006 6102002001 8001 8001111201001009009002 2流式细胞仪测定法流式细胞仪测定法 流式细胞仪的应用，为网织红细胞计数提供了更先进的测流式细胞仪的应用，为网织红细胞计数提供了更先进的测试手段。这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理，不但试手段。这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理，不但能客观地测量大量网织红细胞，而且还能将其分为能客观地测量大量网织红细胞，而且还能将其分为
44、高高荧光荧光强度、中荧光强度、低荧光强度强度、中荧光强度、低荧光强度三类，这种分类法对估计三类，这种分类法对估计化疗后骨髓造血功能的恢复及骨髓移植效果有较重要的意化疗后骨髓造血功能的恢复及骨髓移植效果有较重要的意义。具有测量多、避免主观因素、方法易于标准化等特点，义。具有测量多、避免主观因素、方法易于标准化等特点，国外广泛应用。国外广泛应用。返回返回【质量控制质量控制】1.1.用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干后方能加用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干后方能加入血液，否则血液可使血液凝固。染色时间一定要充足。入血液，否则血液可使血液凝固。染色时间一定要充足。2.2.染色温度控制在染
45、色温度控制在37370 0C C为宜。为宜。3.3.试管法测网织红细胞染液与血液的比例以试管法测网织红细胞染液与血液的比例以1 1：1 1为宜，严为宜，严重贫血时，可适量增加血液的比例，制片不宜太薄太厚。重贫血时，可适量增加血液的比例，制片不宜太薄太厚。返回返回【参考值参考值】相对值：相对值：成成 人人：0.8%2.0%新生儿新生儿：2%6%绝对值：绝对值：成成 人人：（2575）109/L返回返回【临床意义临床意义】1.1.反映骨髓的造血功能的一个诊断指标反映骨髓的造血功能的一个诊断指标。对贫血的鉴别诊断和鉴别诊断。对贫血的鉴别诊断和鉴别诊断有重要参考价值。有重要参考价值。（1 1）网织红细
46、胞增加：）网织红细胞增加：如溶血性贫血。急性失血后如溶血性贫血。急性失血后5-10天网织红细胞达天网织红细胞达高峰，高峰，2周后恢复。网织红细胞持续升高提示慢性失血。周后恢复。网织红细胞持续升高提示慢性失血。（2 2）网织红细胞减少：）网织红细胞减少：如再障。临床将贫血病人网织红细胞绝对值低于如再障。临床将贫血病人网织红细胞绝对值低于15109/L，作为急性再障的诊断指标。，作为急性再障的诊断指标。2 2评价疗效评价疗效（1 1）观察贫血疗效：）观察贫血疗效：IDA或或MA经有效治疗后，经有效治疗后，23d后后Ret开始上升，开始上升，710d达到最高峰（约达到最高峰（约10%），），2周后逐
47、渐降至正常水平。周后逐渐降至正常水平。（2 2）骨髓移植后监测骨髓造血恢复：）骨髓移植后监测骨髓造血恢复：移植后第移植后第21天，如天，如Ret大于大于15109/L，常表示无并发症；若骨髓开始恢复造血功能，首先表现为，常表示无并发症；若骨髓开始恢复造血功能，首先表现为HFR和和MFR的上升，其次为网织红细胞计数值上升，的上升，其次为网织红细胞计数值上升，3 3放疗和化疗的监测放疗和化疗的监测返回返回计算练习计算练习1.网织红细胞计数时网织红细胞计数时,使用使用Miller氏窥盘氏窥盘,小方格数红细小方格数红细胞胞111个时计数网织红个时计数网织红 细胞数细胞数 8个个,则此病人的网织则此病人
48、的网织红细胞数百分比为多少红细胞数百分比为多少?返回返回 七、嗜碱性点彩红细胞计数七、嗜碱性点彩红细胞计数【概述概述】【参考值参考值】【临床意义临床意义】返回返回【概述】是某些是某些重金属中毒重金属中毒时，胞质中残存的嗜碱性物质时，胞质中残存的嗜碱性物质RNA变性沉淀而形成的，用瑞氏染色，可见红细胞的粉变性沉淀而形成的，用瑞氏染色，可见红细胞的粉红胞质中含有粗细不等的红胞质中含有粗细不等的蓝黑色颗粒蓝黑色颗粒；如用；如用碱性美蓝染色碱性美蓝染色，则点彩红细胞的胞质呈淡蓝绿色，而颗粒为深蓝色，色泽则点彩红细胞的胞质呈淡蓝绿色，而颗粒为深蓝色，色泽鲜明，易于识别。操作时用油镜按网织红细胞计数法，计
49、鲜明，易于识别。操作时用油镜按网织红细胞计数法，计数数1000个红细胞中，所见点彩红细胞数，然后除以个红细胞中，所见点彩红细胞数，然后除以1000，即为碱性点彩红细胞的百分率。（，即为碱性点彩红细胞的百分率。（图图）返回返回【参考值】0.03%0.03%返回返回【临床意义】点彩红细胞明显增多可见于点彩红细胞明显增多可见于铅、汞、硝基苯、苯胺等中毒铅、汞、硝基苯、苯胺等中毒病人。病人。此外，溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤此外，溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤等也可见增多。等也可见增多。返回返回嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞返回返回 八、
50、红细胞沉降率测定八、红细胞沉降率测定【概述概述】【测定方法及评价测定方法及评价】【质量控制质量控制】【参考值参考值】【临床意义临床意义】返回返回【概述概述】红细胞沉降率红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR）是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉血沉。在健。在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内，在许多病理情况下康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内，在许多病理情况下血沉明显增快。红细胞沉降是多种因素互相作用的结果，是血沉明显增快。红细胞沉降是多种因素互相作用的结果，是反映红细胞聚集性的一个常用指标反映红