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1、工具酶的发现和基因工程的诞生1、基因工程的概念：（1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移 到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。（2）基因工程：就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它 获得新的遗传性状。基因工程的核心是构建重组DNA分子。由于基因工程是在DNA分子水 平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。（3）基因工程诞生的理论基础：DNA是遗传物质的发现、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。2、基因工程的基本工具（1）“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶（限制酶
2、）来源：主要是从原核生物中分离 纯化出来的。功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核甘酸序列,并能切割（使每一条链中特定 部位的两个核甘酸之间的磷酸二酯键断开）,因此具有专一性。结果：能将DNA分子切割成许多不同的片段。备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都也回；同一个DNA 分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。（2） “分子缝合针” 一一DNA连接酶作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的DNA 分子称为重组DNA分子。 因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因 和载体DNA连接在一起。（3） “分子运输车”一一载体一一质粒载体具备的条件：1）能在受体细胞中复制并稳定保存。2）具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。3）具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。最常用的载体一一质粒：质粒在细菌中以独立于拟核之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质，并具有自我复制能力 的双链环状DNA分子。最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒