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1、LOGO检验二科 刘 玲临床微生物标本的规范采集和送检临床微生物标本的规范采集和送检临床标本微生物检验流程临床标本微生物检验流程标本采集标本采集标本检验标本检验报告解读报告解读检验报告检验报告采集部位采集部位采集方法采集方法送检要求送检要求涂片镜检涂片镜检培养鉴定培养鉴定药敏试验药敏试验涂片报告涂片报告培养报告培养报告药敏报告药敏报告 诊断诊断 治疗治疗 评估评估标本本质量量临床信息？床信息？标本本质量？量？临床意床意义？结合合临床症床症状状、体征、影像、体征、影像、其其它它检查等等 如何提高微生物检验的诊疗价值？如何提高微生物检验的诊疗价值？微生物学标本采集的一般原则微生物学标本采集的一般原
2、则u早期采集早期采集 用抗菌药物前用抗菌药物前 下次用药前下次用药前u无菌观念无菌观念 不污染标本不污染标本 无菌密闭容器无菌密闭容器u正确的采集方法正确的采集方法 如：针吸或组织培养如：针吸或组织培养 少用拭子少用拭子u适量的标本适量的标本u运送时间运送时间 1 1小时，最长不超过小时，最长不超过2 2小时小时u二区三区生长二区三区生长u一区（原始区）一区（原始区）无生长无生长原始区因为原始区因为抗生素富集抗生素富集细菌生长被细菌生长被抑制抑制一区一区一区一区三区三区二区二区三区三区二区二区？痰痰标本本标本送检暴露出的问题标本送检暴露出的问题标本类型：气管吸取物标本类型：气管吸取物而不是痰而
3、不是痰标本送检暴露出的问题标本送检暴露出的问题u标本是否合格？标本是否合格？u容器是否无菌？容器是否无菌？u是否需要细菌培养？是否需要细菌培养？u标本的留取至关重要标本的留取至关重要-选择有价值的标本种类选择有价值的标本种类（有疾病代表性）（有疾病代表性）-采集合格的标本采集合格的标本（无菌操作、标本采集指南）（无菌操作、标本采集指南）错误的标本错误的结果错误的治疗错误的标本错误的结果错误的治疗什么是有价值的标本什么是有价值的标本?u组织和无菌体液组织和无菌体液（血、骨髓、脑脊液、关节液、（血、骨髓、脑脊液、关节液、胸腹腔穿刺液）胸腹腔穿刺液）标本进行细菌学检验，有很高的标本进行细菌学检验，有
4、很高的诊断价值，鼓励多送检。诊断价值，鼓励多送检。u尿培养有助于尿路感染的诊断尿培养有助于尿路感染的诊断u大便培养只能检出沙门和志贺菌大便培养只能检出沙门和志贺菌u口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、恶露、口腔和肠内容物、直肠周围脓肿、褥疮、恶露、呕吐物等诊断价值低，不建议做细菌培养呕吐物等诊断价值低，不建议做细菌培养血培养血培养血培养是一切感染判断的试金石，通过它捕获血培养是一切感染判断的试金石，通过它捕获到的病原体，是真正引起感染的病原体，可以到的病原体，是真正引起感染的病原体，可以有针对性的选择药物，这对于挽救患者来说，有针对性的选择药物，这对于挽救患者来说，是非常重要的。是非常重要的。
5、血培养危急报告和分级报告制度血培养危急报告和分级报告制度G G实验实验 GM GM实验：深部真菌感染的血清学试验实验：深部真菌感染的血清学试验隐球菌抗原乳胶凝集试验隐球菌抗原乳胶凝集试验(血清、脑脊液血清、脑脊液)血培养的现状血培养的现状血培养的现状血培养的现状u血培养阳性检出率低血培养阳性检出率低10%-采血时间不适宜，药物影响，采血量不足，套数不采血时间不适宜，药物影响，采血量不足，套数不够，污染问题，够，污染问题，送检率低送检率低u临床不愿意送检，配合度不高临床不愿意送检，配合度不高u结果对临床至关重要且无法替代结果对临床至关重要且无法替代u按照指南规范送检，提高阳性率的最好方式按照指南
6、规范送检，提高阳性率的最好方式u提高送检意识，规范和积极性提高送检意识，规范和积极性 血培养的关键要点血培养的关键要点n 采血指征采血指征n 采血时机采血时机n 采血套数采血套数n 接种血量接种血量n 消毒灭菌消毒灭菌用药之前用药之前 寒战初起寒战初起 三步消毒三步消毒 双侧双套双侧双套采血指征采血指征u发热（发热（38）或低温（）或低温（36）u白细胞增多（计数大于白细胞增多（计数大于10X10/L）,粒细胞减少（成熟的多粒细胞减少（成熟的多核白细胞核白细胞10X10/L）,血小板减少血小板减少u皮肤粘膜出血皮肤粘膜出血u严重的局部感染严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹脑膜
7、炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，部术后感染，)u寒战，昏迷寒战，昏迷，休克，休克u多器官衰竭多器官衰竭uCRP升高升高uPCT升高升高血培养采集时间血培养采集时间菌量菌量寒战采血培养体体温温寒战高热前1h左右菌量最多，宜在寒战高热高峰前采血培养Time采集血培养的最佳时间采集血培养的最佳时间u尽可能在寒战或开始发热时采血尽可能在寒战或开始发热时采血u在接受抗生素治疗前采血在接受抗生素治疗前采血u如已经应用抗菌药物进行治疗，应在如已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药下一次用药之前之前采血培养采血培养（稀释，吸附稀释，吸附）采血套数采血套数CLSI M47-A：每位患者采集：每位患
8、者采集23套血培养（套血培养（4060ml）1套：一个穿刺点，通常为1个需氧+1个厌氧成人瓶：810ml；儿童瓶：13ml；婴幼儿：总血量1%明显地提高阳性率判断是否污染指南强调：初期诊断时不允许只采集一套血培养如果采血量不足，应优先将血液注入需氧瓶，剩余血液注入如果采血量不足，应优先将血液注入需氧瓶，剩余血液注入厌氧瓶，因为大部分需氧菌、兼性厌氧菌、酵母菌可以在厌氧瓶，因为大部分需氧菌、兼性厌氧菌、酵母菌可以在需氧瓶中生长需氧瓶中生长采血量采血量是影响血培养阳性率的独立相关因素是影响血培养阳性率的独立相关因素采血量与检出率采血量与检出率血培养物每增加一毫升，血培养物每增加一毫升，成年人菌血症
9、微生物的成年人菌血症微生物的检出率增加出率增加3 但并非越多越好，血液与肉但并非越多越好，血液与肉汤的最佳比例的最佳比例为1：51：10血培养套数与阳性检出率（）血培养套数与阳性检出率（）65809699为什么使用需氧瓶为什么使用需氧瓶+厌氧瓶？厌氧瓶？肠杆菌科、葡萄球菌、肠球菌、链球菌等均属于兼性菌厌氧瓶有助于提高阳性率（尤其是对兼性厌氧苛养菌，如肺炎链球菌等）J Microbiol Immunol Infect.2007;40:445-449血培养常见污染菌（不要轻言污染）u在在多次多次血培养中血培养中单次单次培养下列细菌阳性，可认为培养下列细菌阳性，可认为是污染菌是污染菌n凝固酶阴性葡萄
10、球菌n棒状杆菌n微球菌n丙酸杆菌n芽孢杆菌，等u如如多次多次血培养血培养多次多次阳性，可能为条件致病菌，需阳性，可能为条件致病菌，需结合临床分析结合临床分析u单次培养以上菌种阳性，没有临床诊断价值，不单次培养以上菌种阳性，没有临床诊断价值，不能判断为污染，且有可能因为将其认作污染菌而能判断为污染，且有可能因为将其认作污染菌而漏诊漏诊凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌u医源性感染最常见病原菌；表皮葡萄球菌感染最医源性感染最常见病原菌；表皮葡萄球菌感染最常见。常见。u人体正常菌群（皮肤、口腔、小肠）；属于条件人体正常菌群（皮肤、口腔、小肠）；属于条件致病菌；致病菌；u引起泌尿系统感染、细菌性心内
11、膜炎、败血症引起泌尿系统感染、细菌性心内膜炎、败血症 凝固酶阴性葡萄球菌的检出凝固酶阴性葡萄球菌的检出 采集采集1 1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。血培养的无菌采集血培养的无菌采集n血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。血等其它标本要高。n所以要最先采集血培养标本。所以要最先采集血培养标本。n污染率的指标是污染率的指标是 3%30秒钟n1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒n75%酒精脱碘 u一步法一步法n葡萄糖酸洗必泰作用30 s
12、，或70%异丙醇消毒后自然干燥，但不适用于2个月以内的新生儿。u用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头(如果行第二如果行第二次穿刺，应换针头次穿刺，应换针头)，直接注入血培养，直接注入血培养u采血注射器不能含有抗凝剂采血注射器不能含有抗凝剂蝶翼针采血蝶翼针采血1 皮肤消毒2 培养瓶消毒3 标注采血量4 准备采血针5 静脉穿刺6 负压采血血培养采集后运送血培养采集后运送u室温，不可冷藏或冷冻室温，不可冷藏或冷冻u2h内上机内上机u延迟上机可能导致假阴性延迟上机可能导致假阴性u全天全天24h接受标本接受标本n正常上班时间送至东区二楼细菌室n中午/晚上 送至外科三楼急诊实验
13、室血培养采集间隔血培养采集间隔u一过性或间歇性菌血症一过性或间歇性菌血症n连续采集23套血培养（基于诊断和治疗效果的评价）n不建议在25天内重复采集n对sau阳性血培养，建议在治疗4896h后再次培养，以预测是否为复杂性金黄色葡萄球菌菌血症u感染性心内膜炎除外感染性心内膜炎除外血培养阳性为感染性心内膜炎诊断的主要标准之一血培养阳性为感染性心内膜炎诊断的主要标准之一u急性心内膜炎急性心内膜炎n立即采血培养n在经验性抗菌治疗前，30min采集3套血培养u亚急心内膜炎亚急心内膜炎n持续性感染，不一定在经验性抗菌治疗前采血n间隔30min1h，采集3套血培养n有人工瓣膜的患者，病原菌常为皮肤菌群如SC
14、N，采血时应严格消毒皮肤，采集静脉血，导管血会增加污染机会u采集采集3套血培养，如套血培养，如24h均阴性，再采集均阴性，再采集2套套CRBSIu长时间留置静脉导管后，导致血栓形成，若细菌侵入并繁殖，长时间留置静脉导管后，导致血栓形成，若细菌侵入并繁殖，极易合并化脓性栓塞性静脉炎，并可导致导管败血症。静极易合并化脓性栓塞性静脉炎，并可导致导管败血症。静脉炎的发生率为脉炎的发生率为13-39%13-39%u导管源性感染：当接受导管治疗的病人有不明原因的发冷，导管源性感染：当接受导管治疗的病人有不明原因的发冷，发热时，应首先考虑导管感染或败血症，此时及时采血培发热时，应首先考虑导管感染或败血症，此
15、时及时采血培养及导管近端培养，有助于明确病原菌。养及导管近端培养，有助于明确病原菌。u注：单纯的导管尖培养阳性不能诊断为注：单纯的导管尖培养阳性不能诊断为CRBSICRBSI，除非有感染，除非有感染的症状和体征，否则不要常规拔除导管尖进行培养的症状和体征，否则不要常规拔除导管尖进行培养u静脉或血管导管处有脓液或有深部感染性血栓，应拔除导管，静脉或血管导管处有脓液或有深部感染性血栓，应拔除导管，并做培养并做培养CRBSI-拔管拔管2套外周血套外周血；无菌操作拔除导管无菌操作拔除导管（5cm导管尖）导管尖），采用采用Maki半定量法进行培养半定量法进行培养（15个菌落）n如果1套血培养(+)，并且
16、导管培养(+)，血培养与导管培养菌种相同，提示为CRBSIn如果1 套血培养(+)，并且导管片段培养(-)，无法判断；但是如果血培养分离株为sau或cal，并且没有其它明确的感染源，仍然提示为CRBSI。n如果2套血培养(-)，但导管片段(+)（无论培养出多少个菌落），提示为导管定植而非CRBSI。n如果2套血培养和导管片段(-)，则不可能是CRBSI。CRBSI-保留导管保留导管u应至少做应至少做2套血培养，其中至少有套血培养，其中至少有1套外周血，同套外周血，同时应尽快无菌操作从导管采集另一套血培养。时应尽快无菌操作从导管采集另一套血培养。n2套(+)，且分离的菌种相同，导管血(+)报警时
17、间比外周血(+)报警时间早120min，又没有其它明确感染源，则提示为CRBSI。n2套(+),导管血(+)报警时间比外周血(+)报警时间早120min，2套获得鉴定与药敏谱相同的分离株，仍有可能为CRBSI n仅导管血(+)，则不能判断是否为CRBSI，提示导管有细菌定植或采血过程有污染。下呼吸道感染标本采集建议下呼吸道感染标本采集建议uCAPu门诊治疗者门诊治疗者:n可不行细菌学检查可不行细菌学检查u住院患者住院患者n根据指征行相应的细菌学检查根据指征行相应的细菌学检查n应在使用抗菌素之前采取标本应在使用抗菌素之前采取标本n痰涂片痰涂片意义很大意义很大uHAPu血培养血培养u胸腔积液培养胸
18、腔积液培养u保护性毛刷保护性毛刷u气管吸取物气管吸取物u支气管肺泡灌洗液支气管肺泡灌洗液我国痰培养的现状我国痰培养的现状临床上约半数咳痰标本不合格！临床上约半数咳痰标本不合格！标本送本送检率高率高苛苛养养菌菌检出率低出率低结果重果重复复性差性差感染、定植感染、定植难以以区区分分药敏敏结果果与与治治疗反反应存在差距存在差距痰培养的局限性痰培养的局限性u易受到口咽部定植菌污染，不一定真正代表下呼吸道菌群易受到口咽部定植菌污染，不一定真正代表下呼吸道菌群u尽量在尽量在使用抗菌药物之前使用抗菌药物之前采样采样,否则降低肺炎链球菌，流感嗜血杆否则降低肺炎链球菌，流感嗜血杆菌等苛养菌分离率菌等苛养菌分离率
19、u以晨痰为佳，采集标本前以晨痰为佳，采集标本前1-2小时不可进食小时不可进食u指导采样指导采样!采集前应使用清水或生理盐水嗽口，有假牙的应先取采集前应使用清水或生理盐水嗽口，有假牙的应先取下假牙，嘱病人采集深部咳痰，直接收集入无菌痰杯。下假牙，嘱病人采集深部咳痰，直接收集入无菌痰杯。u1-2h内送检，如延长送检应保存在内送检，如延长送检应保存在28C，但会降低，但会降低苛养菌培养阳苛养菌培养阳性率性率u同时送检同时送检痰涂片检查痰涂片检查，显微镜检查：做革兰染色。显微镜检查：做革兰染色。n每低倍镜视野中P25，为合格下呼吸道标本u对照痰涂片结果，仅对有意义的细菌进行鉴定和药敏试验对照痰涂片结果
20、，仅对有意义的细菌进行鉴定和药敏试验u最后需要由临床医生结合具体情况作出判断，如痰培养中阳性菌最后需要由临床医生结合具体情况作出判断，如痰培养中阳性菌到底是否是致病菌的问题到底是否是致病菌的问题保护性毛刷（保护性毛刷（PSB）u毛毛刷约仅能获得刷约仅能获得0.001ml标本，在空气中很快会干标本，在空气中很快会干燥导致细菌死亡，从而影响检出率，燥导致细菌死亡，从而影响检出率，应应放置于放置于1ml液体运送培养基（如生理盐水和无菌肉汤）液体运送培养基（如生理盐水和无菌肉汤）u定量培养定量培养u诊断肺炎临界点为诊断肺炎临界点为103 CFU/ml，敏感性和特异，敏感性和特异性分别为性分别为6619
21、%和和9015%肺泡灌洗液（肺泡灌洗液（BAL）u涂片观察标本质量：涂片观察标本质量：n 1%细胞为鳞状上皮细胞，不合格的标本（也要培养）n胞内包含病原菌的细胞百分比5%，可诊断肺炎，敏感性6920%，特异性7528%u应进行定量培养，应进行定量培养，诊断肺炎的分界点为诊断肺炎的分界点为104 CFU/ml，敏感，敏感性性7318%较较PSB好好，特异性均特异性均8219%气管吸取物气管吸取物u中度污染标本中度污染标本u可通过气管切开或气管内插管采集标本，但导管可通过气管切开或气管内插管采集标本，但导管插入时必须经过正常菌群聚集区域，从而增加了插入时必须经过正常菌群聚集区域，从而增加了解释培养
22、结果的难度。解释培养结果的难度。u定量培养：定量培养：106CFU/ml（+），），灵敏度达灵敏度达769%，特异度，特异度7528%u培养意义：培养意义：n气管内吸取物培养结果，基本涵盖侵入性定量培养检出的微生物n近期（72 h内）未更改抗生素治疗方案的患者气管吸取物培养阴性对VAP有较高的阴性预测值送检次数送检次数u对于考虑细菌性肺炎的患者，痰标本每天送检对于考虑细菌性肺炎的患者，痰标本每天送检1次，次，连续连续2-3天；天；如患者症状无明显变化，如患者症状无明显变化，不建议不建议24h内重复送检。内重复送检。u考虑分支杆菌感染者，应连续考虑分支杆菌感染者，应连续3天清晨取痰送检天清晨取痰
23、送检上呼吸道标本上呼吸道标本u咽炎：咽炎：A A群群溶血链球菌（化脓链球菌）溶血链球菌（化脓链球菌）、C/GC/G群群溶血链球溶血链球菌、淋病奈瑟菌、白喉棒杆菌、溶血隐秘杆菌菌、淋病奈瑟菌、白喉棒杆菌、溶血隐秘杆菌u咽拭子不推荐一般细菌涂片检查咽拭子不推荐一般细菌涂片检查 依据形态学无法确定致病依据形态学无法确定致病菌菌u喉炎：主要由病毒引起喉炎：主要由病毒引起u会厌炎：不提示进行咽部标本培养会厌炎：不提示进行咽部标本培养(触碰发炎的会厌会引起触碰发炎的会厌会引起气道阻塞气道阻塞)u鼻窦炎：消毒鼻腔，针吸采集鼻窦标本，不使用拭子鼻窦炎：消毒鼻腔，针吸采集鼻窦标本，不使用拭子尿培养尿培养u有症状
24、的患者（尿痛、尿急或尿频），一份标本通常足够诊有症状的患者（尿痛、尿急或尿频），一份标本通常足够诊断，在治疗断，在治疗4872h后再采集另一份标本。后再采集另一份标本。u无症状患者，可能需要采集无症状患者，可能需要采集23份标本。份标本。u如果怀疑肾结如果怀疑肾结核核，应当连续采集三份晨尿。，应当连续采集三份晨尿。u清晨第一份标本最好，尿液细菌浓缩清晨第一份标本最好，尿液细菌浓缩u清洁中段尿清洁中段尿：清洁尿道口和外阴（从前向后清洁皮肤褶皱）：清洁尿道口和外阴（从前向后清洁皮肤褶皱）,采集第一段尿之后的标本。第一段尿将尿道中大部分污染采集第一段尿之后的标本。第一段尿将尿道中大部分污染物冲洗下来
25、，中段尿能够代表膀胱菌群。物冲洗下来，中段尿能够代表膀胱菌群。u1h内送检，如延迟送检需冷藏，但不能超过内送检，如延迟送检需冷藏，但不能超过24hu申请单上应提示患者是否有症状。这一信息对于定量培养结申请单上应提示患者是否有症状。这一信息对于定量培养结果的解释非常重要，尤其是尿标本中菌量低的时候果的解释非常重要，尤其是尿标本中菌量低的时候导管尿导管尿u新插尿管留尿新插尿管留尿u留滞留滞尿尿导管导管（长期插管的更换导管）（长期插管的更换导管）n将导管夹闭，在管中采集尿标本，但夹闭时间不能超过30 minn使用酒精消毒采样口（如果没有采集口消毒采样导管部位）n使用注射器从消毒部位采样n将尿液转入无
26、菌容器u在申请单上注明标本采集自在申请单上注明标本采集自新插尿管新插尿管/留滞导管留滞导管u拒收标本：拒收标本：尿袋尿尿袋尿液，长期留置尿管尿液，导尿管及其尖端液，长期留置尿管尿液，导尿管及其尖端尿培养结果解释尿培养结果解释u结合尿常规：白细胞计数，白细胞酯酶（脓尿）、亚硝酸盐结合尿常规：白细胞计数，白细胞酯酶（脓尿）、亚硝酸盐（菌尿）（菌尿）u清洁中段尿培养清洁中段尿培养n3种菌以上提示污染n细菌计数105CFU/ml提示可能感染；n104105CFU/ml需要根据临床信息做出判断；n104CFU/ml可能为尿道或会阴细菌污染；u泌尿科和儿科患者泌尿科和儿科患者标本、标本、直接导尿直接导尿标
27、本、标本、经前列腺按摩后排经前列腺按摩后排尿采集的尿液尿采集的尿液、有持续症状的患者有持续症状的患者、孕产期的妇女，孕产期的妇女，103CFU/ml可能有意义可能有意义u耻骨上穿刺尿为严格无菌标本，可进行厌氧培养耻骨上穿刺尿为严格无菌标本，可进行厌氧培养大便培养大便培养u无菌容器送检无菌容器送检u普通粪便培养仅能培养出沙门和志贺菌普通粪便培养仅能培养出沙门和志贺菌u住院住院3 3天后出现的腹泻，可能是抗生素相关性腹泻，不建议天后出现的腹泻，可能是抗生素相关性腹泻，不建议做普通细菌培养做普通细菌培养。u通常不主张送检成形的粪便通常不主张送检成形的粪便直接涂片检查直接涂片检查u粪便标本中有各种正常
28、菌群，形态上区分困难，一般粪便标本中有各种正常菌群，形态上区分困难，一般不不推荐做一般细菌涂片检查。推荐做一般细菌涂片检查。u直接涂片检查直接涂片检查 -怀疑肠道菌群失调，真菌性腹泻怀疑肠道菌群失调，真菌性腹泻 -查霍乱弧菌、结核分枝杆菌，或疑似金黄色葡萄球菌查霍乱弧菌、结核分枝杆菌，或疑似金黄色葡萄球菌或难辩梭菌引起的伪膜性肠炎（备注标示明确）或难辩梭菌引起的伪膜性肠炎（备注标示明确）生殖道标本生殖道标本u生殖道是开放器官，标本采集应严格无菌操作以减少杂菌污生殖道是开放器官，标本采集应严格无菌操作以减少杂菌污染。阴道内有大量正常菌群存在，采集宫颈标本时应避免染。阴道内有大量正常菌群存在，采集
29、宫颈标本时应避免触及阴道壁。触及阴道壁。u淋病奈瑟菌检查时，不论男女尿道及子宫颈均需拭子插入尿淋病奈瑟菌检查时，不论男女尿道及子宫颈均需拭子插入尿道及子宫颈道及子宫颈3cm深取样送检，女性要避免受阴道分泌物污深取样送检，女性要避免受阴道分泌物污染。男性：涂片；女性：培养。染。男性：涂片；女性：培养。u引起女性阴道分泌物最常见的三大原因：阴道毛滴虫病，念引起女性阴道分泌物最常见的三大原因：阴道毛滴虫病，念珠菌性阴道炎，细菌性阴道病（阴道加德纳菌）珠菌性阴道炎，细菌性阴道病（阴道加德纳菌）u女性阴道炎时，镜检涂片联合女性阴道炎时，镜检涂片联合PCR检测比培养重要检测比培养重要孕妇孕妇B B群链球菌
30、筛查群链球菌筛查采集时间采集时间:孕期孕期35-3735-37周周阴道阴道-直肠拭子直肠拭子 -先深入阴道1/3深部 -再经过肛门括约肌 -可使用单个或两个拭子 -不要借助诊视器门诊病人自己采集的阴道和直肠拭子亦可门诊病人自己采集的阴道和直肠拭子亦可 尿标本亦可，尿标本亦可，GBS 10 4cfu/ml GBS 10 4cfu/ml为阳性为阳性不可接受：宫颈、肛周、会阴、直肠周的标本不可接受：宫颈、肛周、会阴、直肠周的标本皮肤和软组织感染皮肤和软组织感染u不要培养慢性浅表性伤口或引流窦，因为浅部培不要培养慢性浅表性伤口或引流窦，因为浅部培养与深部感染关联不佳，养与深部感染关联不佳，-只要可能，
31、尽量尝只要可能，尽量尝试取深部培养或活检试取深部培养或活检u伤口表面的培养，包括褥疮溃疡，没有价值伤口表面的培养，包括褥疮溃疡，没有价值u彻底清创后的组织或清创部位取骨组织培养，最彻底清创后的组织或清创部位取骨组织培养，最有诊断价值有诊断价值u行细菌培养的组织标本，行细菌培养的组织标本，不可用福尔马林固定不可用福尔马林固定 u不建议采用拭子，拭子通常因取材不足而不能进不建议采用拭子，拭子通常因取材不足而不能进行革兰染色和培养，如果必须使用拭子，务必确行革兰染色和培养，如果必须使用拭子，务必确保取材数量既够培养又够革兰染色保取材数量既够培养又够革兰染色u用用75%酒精清洁伤口或脓肿表面，待干，尽
32、可能酒精清洁伤口或脓肿表面，待干，尽可能用注射器抽取脓液或液体送检用注射器抽取脓液或液体送检IDSA推荐：拒绝外科过程中拭子标本的使用推荐：拒绝外科过程中拭子标本的使用脓液标本脓液标本明明送检的是一包脓液，可培养的结果明明送检的是一包脓液，可培养的结果却是却是“无细菌生长无细菌生长”？u标本采集前已经使用了抗生素标本采集前已经使用了抗生素 u厌氧菌、厌氧菌、L L型细菌型细菌 脓液组成物是坏死的白细胞和溶解的细菌、组织碎片脓液组成物是坏死的白细胞和溶解的细菌、组织碎片 建议送检坏死和新鲜交界处的组织，取基底部或边缘部采建议送检坏死和新鲜交界处的组织，取基底部或边缘部采样送检样送检采样方法：采样
33、方法：针吸或组织培养比棉签拭子更可靠针吸或组织培养比棉签拭子更可靠无菌体液的标本采集无菌体液的标本采集u脑脊液、胆汁、胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、胆汁、胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等鞘膜液等-最珍贵的标本最珍贵的标本u严格无菌操作严格无菌操作u引流液引流液-最为模糊的标本，胸腔引流液最为模糊的标本，胸腔引流液胸水胸水u必须采集足够量的标本（必须采集足够量的标本（5ml5ml），进行离心、培），进行离心、培养、革兰染色养、革兰染色 无菌体液行细菌培养的诊断价值高，鼓励多送检！无菌体液行细菌培养的诊断价值高，鼓励多送检！中枢神经系统感染中枢神经系统感染u疑似细菌性脑膜炎，应配套疑似细
34、菌性脑膜炎，应配套送检送检2-3套血培养套血培养uCNS标本：脑脊液，中枢引流液，中枢置管标本：脑脊液，中枢引流液，中枢置管u通过腰椎穿刺采集脑脊液，第通过腰椎穿刺采集脑脊液，第1管不应进行微生物学检查管不应进行微生物学检查uCSF不能冷藏！不能冷藏！革兰染色前应进行离心革兰染色前应进行离心,至少至少1mlu培养有表皮葡萄球菌：培养有表皮葡萄球菌：l如果解剖完整，污染？如果解剖完整，污染？l如果有插管，有症状支持，大都是感染如果有插管，有症状支持，大都是感染黏膜屏障黏膜屏障血流血流血脑屏障血脑屏障CNS其他常见系统的感染其他常见系统的感染u自发性腹膜炎和腹水自发性腹膜炎和腹水 -同时应采集2-
35、3套血培养 -培养阴性时应立即评估苛养菌、慢生长菌的可能性u骨和关节感染：血行感染最常见骨和关节感染：血行感染最常见 -不推荐拭子标本；需送检抽吸物或组织活检标本 -同时应采集2-3套血培养；-假体关节感染不必行血培养无菌体液送检时建议同时送检血培养无菌体液送检时建议同时送检血培养标本类型和部位标本类型和部位u血液：经皮抽取血液：经皮抽取/经导管抽取，标明穿刺部位经导管抽取，标明穿刺部位u分泌物，脓液，穿刺液：必须精确标明取材部位分泌物，脓液，穿刺液：必须精确标明取材部位u生殖道分泌物：阴道生殖道分泌物：阴道/宫颈宫颈/宫腔分泌物宫腔分泌物u胸腔胸腔/腹腔腹腔/关节腔引流液关节腔引流液胸腔胸腔
36、积液液/腹腔腹腔积液液/关关节液液u脑室分流液不能写成室分流液不能写成脑脊液脊液；脑脊液不能写成穿刺液脊液不能写成穿刺液u尿液：清洁中段尿尿液：清洁中段尿/新插导管尿新插导管尿/穿刺尿穿刺尿/术中尿液术中尿液u支气管洗液和肺泡灌洗液不能混淆支气管洗液和肺泡灌洗液不能混淆关于涂片报告关于涂片报告一般情况下，除了血液标本，粪便标本外，开具培养一般情况下，除了血液标本，粪便标本外，开具培养+涂片涂片革兰染色革兰染色：普通细菌，适用于除血液，导管，粪便，喉部标：普通细菌，适用于除血液，导管，粪便，喉部标本外的各种标本本外的各种标本抗酸染色抗酸染色：抗酸杆菌，适用于除血液，导管外的各种标本：抗酸杆菌，适用于除血液，导管外的各种标本弱抗酸染色弱抗酸染色：奴卡菌，主要用于呼吸道，中枢神经系统标本：奴卡菌，主要用于呼吸道，中枢神经系统标本墨汁染色墨汁染色：新型隐球菌，脑脊液：新型隐球菌，脑脊液六胺银染色六胺银染色：人肺孢子菌，呼吸道标本：人肺孢子菌，呼吸道标本更多模板下加强加强加强加强沟通沟通沟通沟通与协作与协作与协作与协作规范标本送检规范标本送检规范标本送检规范标本送检提高病原菌的检出率提高病原菌的检出率提高病原菌的检出率提高病原菌的检出率